【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及受体辅助蛋白6及其抑制剂在制备治疗口腔鳞状细胞癌药物中的应用。
技术介绍
1、口腔鳞细胞癌(oscc，oral squamous cell carcinoma)，是口腔和颌骨区最常见的恶性肿瘤，主要发生在舌、口底、牙龈、颊壁和上颚。目前，早期口腔癌患者的主要治疗方法是手术切除结合放疗和化疗。尽管如此，由于oscc的高复发率和高转移，约20％-40％的患者仍然存在局部复发、隐性淋巴结转移和手术后预后不良。尽管有各种方法可以提高口腔癌患者的生活质量，但口腔癌患者的总体5年生存率并没有明显提高，近年来徘徊在50％左右。转移是癌症患者死亡的主要原因。然而，oscc的关键原因及其分子机制仍然未知。口腔癌复发和转移的原因和机制尚不清楚。
2、受体辅助蛋白6(reep6，receptor expression-enhancing protein 6)是内质网(er)塑造蛋白dp1/yop1p超家族的保守成员。dp1/yop1p家族中有六种蛋白质，均为跨膜蛋白，包括reep1、reep2、reep3、reep4、reep5和reep6。最初，reep家族被认为在增强细胞表面嗅觉受体、g蛋白偶联受体(gpcr)和味觉受体的表达方面发挥作用，而关于reep6在肿瘤中的生物学功能的研究很少。之前的研究表明，reep6在维持内质网稳态方面发挥着重要作用。有趣的是，越来越多的研究报告称，内质网应激与铁死亡密切相关。
3、铁死亡是近年来新发现的一种非细胞死亡、铁离子依赖性细胞死亡的形式。细胞中活性
技术实现思路
1、本专利技术的目的是针对现有技术的不足，受体辅助蛋白6及其抑制剂在制备治疗口腔鳞状细胞癌药物中的应用。
2、本专利技术的第一个目的是提供一种用于口腔鳞状细胞癌辅助诊断的产品，所述的产品用于特异性检测reef6基因表达水平或reef6基因表达产物活性；所述的reef6基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
3、优选，所述的产品包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术或免疫测定的方法特异性检测reef6基因表达水平或reef6基因表达产物活性的变化的试剂。
4、优选，所述的产品包括检测reef6基因的表达水平的pcr扩增试剂和pcr引物，所述的pcr引物的核苷酸序列如seq id no.11和seq id no.12所示。
5、本专利技术的第二个目的是提供一种治疗口腔鳞状细胞癌的药物，所述的药物包括reef6基因的抑制剂或reef6基因表达产物的抑制剂；所述的reef6基因的核苷酸序列如seqid no.1所示。
6、本专利技术的第三个目的是reef6基因的抑制剂或reef6基因表达产物的抑制剂在制备治疗口腔鳞状细胞癌药物中的应用，所述的抑制剂在体外和/或体内能降低reef6基因的表达水平或降低reef6基因表达产物的活性；所述的reef6基因的核苷酸序列如seq idno.1所示。
7、本专利技术证实了reef6基因或其表达产物的抑制剂可以抑制口腔鳞状细胞癌细胞的生长、数量的增长、迁移和/或侵袭。
8、优选，所述的抑制剂为以下任一种：
9、a.靶向reef6基因的反义rna、sirna、shrna、mirna、talen或crispr；
10、b.促进reef6基因启动子dna甲基化的试剂。
11、优选，所述的抑制剂为shrna，所述的shrna抑制reef6所用的正向引物和反向引物分别如seq id no.7和seq id no.8所示。
12、优选，所述shrna的靶点序列为gcatggctcccaggccctggaa。
13、本专利技术的第四个目的是一种体外非治疗性抑制口腔鳞状细胞癌细胞生长、数量增长、迁移和/或侵袭的方法，reef6基因的抑制剂或reef6基因表达产物的抑制剂存在的条件下培养口腔鳞状细胞癌细胞，抑制口腔鳞状细胞癌细胞的生长、数量增长、迁移和/或侵袭；所述的reef6基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
14、本专利技术的有益效果：
15、本专利技术公开了受体辅助蛋白6(reef6)作为oscc细胞中的一种新型铁死亡抑制因子，是铁死亡信号途径中的关键蛋白质，可作为克服口腔鳞细胞癌进展的药物靶点；reep6的敲低显著抑制oscc细胞系中的细胞繁殖率，显著促进oscc细胞系中的dna损伤及显著抑制oscc细胞系的迁移和侵袭，因此靶向受体辅助蛋白6的抑制剂可作为口腔鳞状细胞癌治疗药物的应用。本专利技术为制备治疗口腔鳞状细胞癌药物提供了新思路。
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1.一种用于口腔鳞状细胞癌辅助诊断的产品，其特征在于，所述的产品用于特异性检测REEF6基因表达水平或REEF6基因表达产物活性；所述的REEF6基因的核苷酸序列如SEQID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的产品，其特征在于，所述的产品包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术或免疫测定的方法特异性检测REEF6基因表达水平或REEF6基因表达产物活性的变化的试剂。
3.根据权利要求1所述的产品，其特征在于，所述的产品包括检测REEF6基因的表达水平的PCR扩增试剂和PCR引物，所述的PCR引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.11和SEQ IDNO.12所示。
4.一种治疗口腔鳞状细胞癌的药物，其特征在于，所述的药物包括REEF6基因的抑制剂或REEF6基因表达产物的抑制剂；所述的REEF6基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
5.REEF6基因的抑制剂或REEF6基因表达产物的抑制剂在制备治疗口腔鳞状细胞癌药物中的应用，其特征在于，所述的抑制剂在体外和/或体内能降低REEF6基因的表达水平或降低REEF6基因
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的抑制剂为以下任一种：
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的抑制剂为shRNA，所述的shRNA抑制REEF6所用的正向引物和反向引物分别如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述shRNA的靶点序列为GCATGGCTCCCAGGCCCTGGAA。
9.一种体外非治疗性抑制口腔鳞状细胞癌细胞生长、数量增长、迁移和/或侵袭的方法，其特征在于，REEF6基因的抑制剂或REEF6基因表达产物的抑制剂存在的条件下培养口腔鳞状细胞癌细胞，抑制口腔鳞状细胞癌细胞的生长、数量增长、迁移和/或侵袭；所述的REEF6基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
...【技术特征摘要】
1.一种用于口腔鳞状细胞癌辅助诊断的产品，其特征在于，所述的产品用于特异性检测reef6基因表达水平或reef6基因表达产物活性；所述的reef6基因的核苷酸序列如seqid no.1所示。
2.根据权利要求1所述的产品，其特征在于，所述的产品包括通过测序技术、核酸杂交技术、核酸扩增技术或免疫测定的方法特异性检测reef6基因表达水平或reef6基因表达产物活性的变化的试剂。
3.根据权利要求1所述的产品，其特征在于，所述的产品包括检测reef6基因的表达水平的pcr扩增试剂和pcr引物，所述的pcr引物的核苷酸序列如seq id no.11和seq idno.12所示。
4.一种治疗口腔鳞状细胞癌的药物，其特征在于，所述的药物包括reef6基因的抑制剂或reef6基因表达产物的抑制剂；所述的reef6基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
5.reef6基因的抑制剂或reef6基因表达产物的抑制剂在制备治疗口腔鳞状细胞癌药物中...
【专利技术属性】
技术研发人员：夏凌云，冷卫东，钦闪闪，余和东，解龙川，李丹丹，舒欣，苗昕瑞，
申请(专利权)人：十堰市太和医院湖北医药学院附属医院，
类型：发明
国别省市：
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