【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及抑制icam-1–fgg相互作用的药剂在制备治疗癌症的药物中的应用。
技术介绍
1、肺癌是目前世界上致死率较高的癌症之一。因此研究肺癌发生发展的机制，对于肺癌的药物研发和治疗具有非常重要的意义。恶性肿瘤的重要特性是细胞缺乏正常的凋亡机制，可以无限增殖，这也是其导致病人最终机体失衡死亡的重要原因。除了肿瘤内部的基因改变外，肿瘤细胞表面的受体通过接受环境中信号，可能参与肿瘤细胞凋亡信号的调控。在肿瘤细胞表面的众多受体分子中，细胞黏附分子(cell adhesion molecule，cam)是一类沟通连接细胞内外的桥梁分子。细胞黏附分子在众多重要的生命活动如细胞增殖、存活和迁移等过程中都必不可少，同时细胞黏附分子也参与调控肿瘤的发生、浸润和转移，是肿瘤研究的热点和前沿课题。在恶性肿瘤中，细胞黏附分子的异常表达不仅影响细胞黏附，还影响细胞存活等功能。
2、细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1，icam-1)又称cd54，属于免疫球蛋白超家族，是单次跨膜的糖蛋白分子，因糖基化程度的不同，其分子量在74-114kda之间。icam-1由包括5个类似免疫球蛋白结构域的胞外区、1个跨膜区和1短胞浆内尾部组成。胞外头部可与多种分子结合，另外胞内区也包含骨架蛋白和信号分子结合位点。有越来越多的证据表明，在肿瘤发生的过程中，icam-1的表达也会上调，其与肿瘤的关系也开始被广大学者关注。已有研究发现icam-1的表达会影响肿瘤细胞的增殖，在肿瘤细胞中
3、近期有研究发现，在炎症因子刺激下，上皮细胞会过表达icam-1，通过与表面受体纤维蛋白原(fibrinogen，fg)的结合，从而促进上皮细胞在炎症状态下的存活。fg是由α、β、γ三条链成对组成的二聚体，分子量约340kda。编码三条多肽链的基因分别是fga、fgb和fgg。其中fgγ链(fgg)(117-133)位点可以直接与icam-1(8-22)氨基酸序列结合，从而参与调控细胞间的相互作用与信号的传递。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中还未知icam-1–fgg相互作用在癌症发展过程中作用的缺陷，本专利技术提供了抑制icam-1–fgg相互作用的药剂在制备治疗癌症的药物中的应用。本专利技术揭示了icam-1为包括非小细胞肺癌在内的多种实体瘤细胞提供存活信号的新机制，阻断icam-1–fgg相互作用可以作为癌症治疗的潜在分子靶标。
2、本专利技术主要发现icam-1通过与肿瘤分泌的fgg结合维持非小细胞肺癌的存活信号。在正常情况下，非小细胞肺癌细胞表达的icam-1与其分泌的fgg 117-133序列结合，调控icam-1胞内段磷酸化并招募磷酸酶shp-2结合在icam-1的尾部结构域，从而维持细胞生存相关激酶如erk和akt的活化，同时抑制jnk和p 38mapk的磷酸化，最终维持癌细胞的存活和增殖信号。一旦破坏icam-1与fgg的相互作用，icam-1胞内段将经历去磷酸化并丢失shp-2的结合，细胞生存关键激酶erk和akt的活化受到抑制，应激与凋亡相关激酶如jnk和p38mapk的活化明显上调，非小细胞肺癌细胞启动caspase-9/3信号通路依赖的凋亡程序，最终影响肿瘤细胞体外存活及体内进展。由此认为阻断icam-1与fgg的相互作用是诱导肿瘤凋亡、控制肿瘤生长的有效途径之一。
3、为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案之一为：一种抗icam-1的抗体，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3，所述轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3；其中：所述lcdr1的氨基酸序列如seq id no:6所示，所述lcdr2的氨基酸序列为ras，所述lcdr3的氨基酸序列如seq id no:7所示，所述hcdr1的氨基酸序列如seq id no:8所示，所述hcdr2的氨基酸序列如seq id no:9所示，且所述hcdr3的氨基酸序列如seq id no:10所示。
4、在本专利技术的具体实施方案中，所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:11所示；和/或，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no:12所示。
5、在本专利技术的具体实施方案中，所述抗体为全长抗体、fab、fab’、f(ab’)2或fv。
6、在本专利技术的较佳实施方案中，所述fv为scfv。
7、在本专利技术的具体实施方案中，所述抗体为全长抗体，其重链恒定区和/或轻链恒定区源自人源抗体。
8、在本专利技术的较佳实施方案中，所述重链恒定区和/或轻链恒定区源自人源igg1抗体。
9、在本专利技术的更佳实施方案中，所述抗体的轻链的氨基酸序列如seq id no:13所示；和/或，所述抗体的重链的氨基酸序列如seq id no:14所示。
10、为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案之二为：一种分离的核酸，所述核酸编码如本专利技术技术方案之一所述的抗体。
11、为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案之三为：一种重组表达载体，所述重组表达载体包含如本专利技术技术方案之二所述的分离的核酸。
12、为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案之四为：一种转化体，所述转化体包含如本专利技术技术方案之二所述的核酸或如本专利技术技术方案之三所述的重组表达载体，所述转化体的宿主细胞为真核细胞或原核细胞。
13、为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案之五为：一种抗icam-1的抗体的制备方法，所述方法包含培养如本专利技术技术方案之四所述的转化体。
14、为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案之六为：一种药物组合物，所述药物组合物包含如本专利技术技术方案之一所述的抗体，以及药学上可接受的载体。
15、为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案之七为：一种嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体包含如本专利技术技术方案之一所述的抗体。
16、为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案之八为：一种基因修饰的细胞，所述基因修饰的细胞包含如本专利技术技术方案之七所述的嵌合抗原受体。
17、在本专利技术的较佳实施方案中，所述基因修饰的细胞为真核细胞，优选分离的人细胞；更优选免疫细胞如t细胞或nk细胞。
18、为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案之九为：一种抗体药物偶联物，所述抗体药物偶联物包含细胞毒性剂或标签，以及如本专利技术技术方案之一所述的抗体。
19、为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案之十为：一种试剂盒，所述试剂盒包括如本专利技术技术方案之一所述的抗体、如本专利技术技术方案之六所述的药物组合物、如本专利技术技术方案之七所述的嵌合抗原受体、如本专利技术技术方案之八所述的基因修饰的细胞和/或如本专利技术技术方案之九所述的抗体药物偶联物。
20、为解决本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗ICAM-1的抗体，其特征在于，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2和LCDR3；其中：
2.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示；和/或，所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示。
3.如权利要求1或2所述的抗体，其特征在于，所述抗体为全长抗体、Fab、Fab’、F(ab’)2或Fv；
4.如权利要求3所述的抗体，其特征在于，所述抗体为全长抗体，其重链恒定区和/或轻链恒定区源自人源抗体；
5.一种分离的核酸，其特征在于，所述核酸编码如权利要求1～4任一项所述的抗体。
6.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包含如权利要求5所述的分离的核酸。
7.一种转化体，其特征在于，所述转化体包含如权利要求5所述的核酸或如权利要求6所述的重组表达载体，所述转化体的宿主细胞为真核细胞或原核细胞。
8.一种抗ICAM-1的抗体的制
9.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含如权利要求1～4任一项所述的抗体，以及药学上可接受的载体。
10.一种嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包含如权利要求1～4任一项所述的抗体。
11.一种基因修饰的细胞，其特征在于，所述基因修饰的细胞包含如权利要求10所述的嵌合抗原受体；
12.一种抗体药物偶联物，其特征在于，所述抗体药物偶联物包含细胞毒性剂或标签，以及如权利要求1～4任一项所述的抗体。
13.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1～4任一项所述的抗体、如权利要求9所述的药物组合物、如权利要求10所述的嵌合抗原受体、如权利要求11所述的基因修饰的细胞和/或如权利要求12所述的抗体药物偶联物。
14.一种套装药盒，其特征在于，所述套装药盒包含药盒A和药盒B，其中：
15.一种给药装置，其特征在于，所述给药装置包括如权利要求1～4任一项所述的抗体、如权利要求9所述的药物组合物、如权利要求10所述的嵌合抗原受体、如权利要求11所述的基因修饰的细胞和/或如权利要求12所述的抗体药物偶联物；
16.一种免疫检测或者测定包含ICAM-1 8-22抗原多肽的蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括使用如权利要求1～4任一项所述的抗体、如权利要求9所述的药物组合物、如权利要求10所述的嵌合抗原受体、如权利要求11所述的基因修饰的细胞和/或如权利要求12所述的抗体药物偶联物；所述方法为非诊断目的的；
17.如权利要求1～4任一项所述的抗体、如权利要求9所述的药物组合物、如权利要求10所述的嵌合抗原受体、如权利要求11所述的基因修饰的细胞和/或如权利要求12所述的抗体药物偶联物在制备抑制包含ICAM-1 8-22抗原多肽的蛋白与包含纤维蛋白原γ链的蛋白的结合的制剂中的应用；
18.一种使癌细胞凋亡的方法，其特征在于，所述方法包括使用抑制ICAM-1–FGG相互作用的阻断剂处理癌细胞并诱导癌细胞凋亡，所述癌细胞依赖ICAM-1–FGG相互作用维持存活；所述方法为非治疗目的的；
19.抑制ICAM-1–FGG相互作用的阻断剂在制备诊断、预防和/或治疗癌症的药物中的应用；所述癌症中癌细胞依赖ICAM-1–FGG相互作用维持存活；
...【技术特征摘要】
1.一种抗icam-1的抗体，其特征在于，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含hcdr1、hcdr2和hcdr3，所述轻链可变区包含lcdr1、lcdr2和lcdr3；其中：
2.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:11所示；和/或，所述重链可变区的氨基酸序列如seq id no:12所示。
3.如权利要求1或2所述的抗体，其特征在于，所述抗体为全长抗体、fab、fab’、f(ab’)2或fv；
4.如权利要求3所述的抗体，其特征在于，所述抗体为全长抗体，其重链恒定区和/或轻链恒定区源自人源抗体；
5.一种分离的核酸，其特征在于，所述核酸编码如权利要求1～4任一项所述的抗体。
6.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包含如权利要求5所述的分离的核酸。
7.一种转化体，其特征在于，所述转化体包含如权利要求5所述的核酸或如权利要求6所述的重组表达载体，所述转化体的宿主细胞为真核细胞或原核细胞。
8.一种抗icam-1的抗体的制备方法，其特征在于，所述方法包含培养如权利要求7所述的转化体。
9.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含如权利要求1～4任一项所述的抗体，以及药学上可接受的载体。
10.一种嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包含如权利要求1～4任一项所述的抗体。
11.一种基因修饰的细胞，其特征在于，所述基因修饰的细胞包含如权利要求10所述的嵌合抗原受体；
12.一种抗体药物偶联物，其特征在于，所述抗体药物偶联物包含细胞毒性剂或标签，以及如权利要求1～4任一项所述的抗体。
...【专利技术属性】
技术研发人员：陈剑峰，王诗慧，
申请(专利权)人：中国科学院分子细胞科学卓越创新中心，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。