【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药，具体涉及免疫学领域，更具体涉及一种佐剂组合物及其制备方法与应用。
技术介绍
1、现代疫苗越来越离不开佐剂的作用，尤其是以基因工程产物为特征的抗原必须辅以佐剂才能达到良好的免疫效果。可以说疫苗是抗原+佐剂总称。而佐剂是什么？最早佐剂英文名adjuvant来源于拉丁语“adjuvare”一词，意为“帮助”，所以免疫佐剂是指与抗原同时或预先注射，能够增强机体针对抗原的免疫应答，延长疫苗保护时间，降低抗原使用剂量，或诱导特定免疫反应类型的制剂。佐剂在疫苗应用中的作用主要有：增强抗原的免疫源性，使无或免疫源性差的抗原性物质变为有效免疫原；增强机体对抗原刺激的反应性，提高免疫应答产生抗体的滴度，减少抗原用量，延长免疫反应的记忆性；改变抗体类型，使产生igm转变为产生igg；诱导特定免疫类型的免疫应答，如铝佐剂可以诱导th2型免疫应答。
2、随着对疫苗和人体免疫系统的深入理解，研究者们充分认识到疫苗的开发往往离不开佐剂的研究。不仅在于佐剂是提升疫苗效果和快速激发宿主免疫反应最为直接和易行的方法，同时也是改变免疫反应类型，避免病理性免疫损伤的重要策略。在过去几十年内，佐剂研究和应用已经从经验试错模式提升到了理论设计的高度。这些前期的研究为今后的疫苗开发，尤其针对应急性疫苗的开发提供了重要的科学数据和理论基础。佐剂激活免疫反应的路径总体可以归纳为细胞内外受体如，tlr、clr、nlr、rlr及信号感受器，如，nlrp3、sting、marvs和ranks，以及这些物质所连接的下游信号通路和放大回路。由于有这些物质基
3、对于一款新佐剂的开发往往需要一个非常长的研发历程，不仅需要对新佐剂成分有深入的了解，同时也要对其在与抗原分子配伍中的理化性质、稳定性、免疫原性、毒副反应等方面影响都要有较为深入和系统的分析和研究，同时还需有不同专业知识背景的人员参与研发，为新佐剂提供较为全面和系统研究，才有可能开发出一款创新佐剂用于疫苗的临床应用。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
1、本专利技术目的在于，通过研究提出一种优良的疫苗用佐剂。
2、具体地，本专利技术提供一种用于疫苗的佐剂组合物，其特征在于，其包括角鲨烯、吐温80、泊洛沙姆188和寡核苷酸cpg1018。
3、优选地，角鲨烯的含量为0.2-4％(v/v)、吐温80的含量为0.02-0.4％(v/v)、泊洛沙姆188的含量为0.1-2％(w/v)、寡核苷酸cpg1018的含量为200-6000μg/ml(w/v)。
4、更优选地，角鲨烯的含量为0.8-4％(v/v)、吐温80的含量为0.064-0.32％(v/v)、泊洛沙姆188的含量为0.2-1％(w/v)、寡核苷酸cpg1018的含量为300-5000μg/ml(w/v)；优选地，所述寡核苷酸cpg1018的含量为400-4000μg/ml(w/v)。
5、通过实验验证佐剂组合物用于小鼠的使用剂量，基于小鼠使用剂量结合体表面积等效原则换算成将来用于人的临床的使用剂量(换算依据fda draft guidelines)，即寡核苷酸cpg1018的含量为200-6000μg/ml(w/v)。其中人体体表面积约为1.67m^2,小鼠为0.007m^2；前者约为后者230倍。
6、在具体实施方式中，泊洛沙姆188采用药用级或注射级辅料。
7、本专利技术由此也提供所述的佐剂组合物的制备方法，其包括如下步骤：
8、s1取角鲨烯制备成油相；取泊洛沙姆188和吐温80于缓冲液中，搅拌制备成水相；
9、s2将制备的水相缓慢加入至制备的油相中，用缓冲液定容后室温条件下，高速搅拌制得初乳溶液；
10、s3初乳溶液倒入微射流均质机中制得精乳溶液；
11、s4吸取寡核苷酸cpg 1018至上述精乳溶液中，混匀即得。
12、优选地，所述缓冲液选自但不限于柠檬酸盐或磷酸盐缓冲液。
13、优选地，s1步中，取泊洛沙姆188和吐温80于缓冲液中，18-55℃搅拌制备成水相；
14、优选地，s2步中，使用高速搅拌器，转速8000-20000rpm搅拌15-30分钟制得初乳溶液；s3步中制备的初乳溶液倒入微射流均质机中，调节压力至15000～20000psi，调节制冷机温度，控制乳化液出口温度20～30℃，高压均质循环3-10次，制得精乳溶液。
15、优选地，s3步中，通过马尔文粒度检测仪测得精乳溶液粒径为100nm-200nm之间，检测精乳溶液ph值在6.3-6.7或7.0-7.4之间；另外优选地，还包括除菌过滤，具体采用0.22μm除菌滤器进行过滤后得清液为精乳液。
16、本专利技术提供所述的佐剂组合物在制备免疫制中的应用。
17、进而本专利技术提供一种抗原佐剂组合物，其包括如权利要求1至4任一项所述的佐剂组合物和能引起免疫应答的抗原；所述抗原包括蛋白质类、多肽类或核酸类物质中一种或多种。
18、经实验表明，本专利技术的佐剂明显优于现有技术的佐剂，具体来说本专利技术的佐剂可以增强机体对抗原刺激的反应性，提高免疫应答产生抗体的滴度，减少抗原用量，延长免疫反应的记忆性，实现高效率地增强抗原的免疫应答水平，同时毒副反应极低，具有制备简单、稳定性好、应用范围广等特点，因而具有应用前景。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种用于疫苗的佐剂组合物，其特征在于，其包括角鲨烯、吐温80、泊洛沙姆188和寡核苷酸CpG1018。
2.如权利要求1所述的佐剂组合物，其特征在于，角鲨烯的含量为0.2-4%（v/v）、吐温80的含量为0.02-0.4%（v/v）、泊洛沙姆188的含量为0.1-2%（w/v）、寡核苷酸CpG1018的含量为200-6000μg/ml（w/v）。
3.如权利要求1或2所述的佐剂组合物，其特征在于，角鲨烯的含量为0.8-4%（v/v）、吐温80的含量为0.064-0.32%（v/v）、泊洛沙姆188的含量为0.2-1%（w/v）、寡核苷酸CpG1018的含量为300-5000μg/ml（w/v）；优选地，所述寡核苷酸CpG1018的含量为400-4000μg/ml（w/v）。
4.如权利要求1或2所述的佐剂组合物，其特征在于，泊洛沙姆188采用药用级或注射级。
5.如权利要求1至4任一项所述的佐剂组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述缓冲液选自但不限于磷酸盐或柠檬酸盐
7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，
8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，S3步中，通过马尔文粒度检测仪测得精乳溶液粒径为100nm-200nm之间，检测精乳溶液pH值在6.3-6.7或7.0-7.4之间；另外优选地，还包括除菌过滤，具体采用0.22μm除菌滤器进行过滤后得清液为精乳液。
9.如权利要求1至4任一项所述的佐剂组合物在制备免疫制中的应用。
10.一种抗原佐剂组合物，其特征在于，其包括如权利要求1至4任一项所述的佐剂组合物和能引起免疫应答的抗原；所述抗原包括蛋白质类、多肽类或核酸类物质中一种或多种。
...【技术特征摘要】
1.一种用于疫苗的佐剂组合物，其特征在于，其包括角鲨烯、吐温80、泊洛沙姆188和寡核苷酸cpg1018。
2.如权利要求1所述的佐剂组合物，其特征在于，角鲨烯的含量为0.2-4%（v/v）、吐温80的含量为0.02-0.4%（v/v）、泊洛沙姆188的含量为0.1-2%（w/v）、寡核苷酸cpg1018的含量为200-6000μg/ml（w/v）。
3.如权利要求1或2所述的佐剂组合物，其特征在于，角鲨烯的含量为0.8-4%（v/v）、吐温80的含量为0.064-0.32%（v/v）、泊洛沙姆188的含量为0.2-1%（w/v）、寡核苷酸cpg1018的含量为300-5000μg/ml（w/v）；优选地，所述寡核苷酸cpg1018的含量为400-4000μg/ml（w/v）。
4.如权利要求1或2所述的佐剂组合物，其特征在于，泊洛沙姆188...
【专利技术属性】
技术研发人员：何忠淮，任苏林，赵干，
申请(专利权)人：艾棣维欣苏州生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。