【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗体制备，特别涉及抗人ceacam5蛋白的抗体、抗体对和试剂盒及应用。
技术介绍
1、癌胚抗原细胞黏附分子5(carcinoembryonicantigen-related cell adhesionmolecule-5，ceacam5)，又名癌胚蛋白(cea)、胎粪抗原100、cd抗原cd66e，属于免疫球蛋白超家族和cea家族。ceacam5是一种细胞表面糖蛋白，通过糖基磷脂酰肌醇(gpi)与膜结合，胞外共有7个免疫球蛋白样结构域，包括一个可变lgv样结构域和六个lgc样结构域(a1-b1-a2-b2-a3-b3)。igv样结构域是其与其他cea家族成员相互作用的主要区域。
2、ceacam5蛋白的表达受到严密的调控。在正常生理情况下，ceacam5在肠道、呼吸道和泌尿生殖道等上皮细胞中高表达，也存在于胃、舌、食道、宫颈、汗腺和前列腺中。ceacam5主要作为细胞粘附分子，介导同质和异质性黏附，还参与了细胞信号转导和免疫调节等生物学过程；在信号转导方面，ceacam5可以作为一种信号受体，参与调节细胞内的信号转导通路，影响细胞的生长、增殖和分化；在免疫调节方面，可以影响免疫细胞的活化和功能，参与免疫应答的调节。在炎症或肿瘤状态下，ceacam5的表达水平会发生变化，例如，ceacam5在上皮肿瘤细胞表面高表达，包括结直肠癌、胃癌、胰腺癌、胆囊癌、肺腺癌、小细胞肺癌、乳腺癌、膀胱癌、卵巢癌等，并且与肿瘤的侵袭性和转移有关。因此，ceacam5被认为是一种广谱肿瘤标志物，可用于辅助多种肿瘤的判断，并有助
3、免疫学分析检测技术已被广泛应用于ceacam5表达异常的癌症诊断和治疗中。在正常成年人血清中只有微量的癌胚抗原，浓度一般在5.9ng/ml以下，良性肿瘤、炎症和退行性疾病患者的ceacam5也会升高，但远远低于恶性肿瘤，一般小于20ng/ml。临床上一般将cea指标定在3.5-5.0ng/ml之间作为正常指标。如果低于3.5-5.0ng/ml，判定为正常，如果超出前述范围，认定为异常指标。然而，目前用于免疫学分析检测的市售抗人ceacam5抗体均采用鼠源抗体，存在亲和力差和/或特异性低等问题，导致检测灵敏度不高，对于ng/ml等极低浓度级别的蛋白含量检测结果的可信度不高。此外，即使存在抗原亲和力优异的抗体，但在抗原检测的实际操作中仍然存在很大的问题，例如，在双抗夹心酶联免疫吸附检测法中的一抗和二抗之间的抗原结合位点的重叠度问题等导致检测特异性和灵敏度降低。因此，开发新型的适用于免疫学分析检测尤其是适用于双抗夹心酶联免疫吸附检测法的抗ceacam5的高性能抗体具有重要意义。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的上述问题，本专利技术提供了2株抗人ceacam5蛋白的抗体及其组成的抗体对，以及含有前述抗体或抗体对的试剂盒及其应用。本专利技术的抗体具有高特异性、亲和力和热稳定好的优点，利用其开发的双抗夹心酶联免疫检测体系可高效、特异、准确、灵敏、可靠地检测出ng级别的ceacam5蛋白。
2、为实现上述目的，本专利技术具体通过以下技术方案实现：
3、本专利技术第一方面提供了一种抗人ceacam5蛋白的抗体，为第一抗体或第二抗体，其中：所述第一抗体轻链可变区上互补决定区cdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no.3-5所示，重链可变区上互补决定区cdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no.8-10所示；所述第二抗体轻链可变区上互补决定区cdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no.13-15所示，重链可变区上互补决定区cdr1-3的氨基酸序列分别如seq id no.18-20所示。
4、进一步地，所述第一抗体轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.2所示，重链可变区的氨基酸序列如seq id no.7所示；所述第二抗体轻链可变区的氨基酸序列如seq idno.12所示，重链可变区的氨基酸序列如seq id no.17所示。
5、进一步地，所述第一抗体轻链的氨基酸序列如seq id no.1所示，重链的氨基酸序列如seq id no.6所示；所述第二抗体轻链的氨基酸序列如seq id no.11所示，重链的氨基酸序列如seq id no.16所示。
6、进一步地，所述第一抗体或所述第二抗体为全长抗体或为所述全长抗体的抗原结合区域；所述抗原结合区域选自fab片段、f(ab)2片段、fv片段、(fv)2片段、scfv片段和sc(fv)2片段中的至少一种。
7、本专利技术第二方面提供了一种核酸分子，所述核酸分子编码如上所述的第一抗体或第二抗体。
8、进一步地，所述第一抗体轻链可变区的核酸序列如seq id no.22所示或是与之互补的序列，重链可变区的核酸序列如seq id no.24所示或是与之互补的序列。所述第二抗体轻链可变区的核酸序列如seq id no.26所示或是与之互补的序列，重链可变区的核酸序列如seq id no.28所示或是与之互补的序列。
9、进一步地，所述第一抗体轻链的核酸序列如seq id no.21所示或是与之互补的序列，重链的核酸序列如seq id no.23所示或是与之互补的序列。所述第二抗体轻链的核酸序列如seq id no.25所示或是与之互补的序列，重链的核酸序列如seq id no.27所示或是与之互补的序列。
10、本专利技术第三方面提供了一种抗人ceacam5蛋白的抗体对，由如上所述的第一抗体和第二抗体组成。
11、本专利技术第四方面提供了一种用于检测人ceacam5蛋白的试剂盒，所述试剂盒包括如上所述的抗人ceacam5蛋白的抗体或抗体对。
12、进一步地，所述试剂盒为双抗夹心酶联免疫吸附试剂盒，包括第一抗体和第二抗体，所述第一抗体作为捕获抗体，所述第二抗体作为检测抗体且所述第二抗体偶联有检测标记。
13、本专利技术的优点及积极效果为：本专利技术提供了2株特异性识别和结合ceacam5蛋白的抗体，具有高特异性、亲和力和热稳定好的优点，且2株抗体结合于人eacam5蛋白的不同抗原表位，利用其开发双抗夹心酶联免疫检测体系用于检测人ceacam5蛋白时，其标准曲线线性良好且检测浓度宽，以在血液、尿液或其他体液以及细胞/组织中高效、特异、准确、灵敏、可靠地检测出ng级别的ceacam5蛋白，在ceacam5表达异常疾病的临床诊断、长期监控和预后评估以及科学研究中具有良好的应用前景。
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1.一种抗人CEACAM5蛋白的抗体，其特征在于，选自第一抗体或第二抗体，其中：
2.根据权利要求1所述的抗人CEACAM5蛋白的抗体，其特征在于，所述第一抗体轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；
3.根据权利要求2所述的抗人CEACAM5蛋白的抗体，其特征在于，所述第一抗体轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；
4.根据权利要求1所述的抗人CEACAM5蛋白的抗体，其特征在于，所述第一抗体或所述第二抗体为全长抗体或为所述全长抗体的抗原结合区域；
5.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码如权利要求1-4任一项中所述的第一抗体或第二抗体。
6.根据权利要求5所述的核酸分子，其特征在于，所述第一抗体轻链可变区的核酸序列如SEQ ID NO.22所示或是与之互补的序列，重链可变区的核酸序列如SEQ ID NO.24所示或是与之互补的序列；
7.根据权利要求6所述的核酸分子，其特征在于，所述
8.一种抗人CEACAM5蛋白的抗体对，其特征在于，由如权利要求1-4任一项中所述的第一抗体和第二抗体组成。
9.一种用于检测人CEACAM5蛋白的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1-4任一项所述的抗人CEACAM5蛋白的抗体或如权利要求8所述的抗人CEACAM5蛋白的抗体对。
10.根据权利要求9所述的用于检测人CEACAM5蛋白的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒为双抗夹心酶联免疫吸附试剂盒，包括第一抗体和第二抗体，所述第一抗体为捕获抗体，所述第二抗体为检测抗体且所述第二抗体偶联有检测标记。
...【技术特征摘要】
1.一种抗人ceacam5蛋白的抗体，其特征在于，选自第一抗体或第二抗体，其中：
2.根据权利要求1所述的抗人ceacam5蛋白的抗体，其特征在于，所述第一抗体轻链可变区的氨基酸序列如seq id no.2所示，重链可变区的氨基酸序列如seq id no.7所示；
3.根据权利要求2所述的抗人ceacam5蛋白的抗体，其特征在于，所述第一抗体轻链的氨基酸序列如seq id no.1所示，重链的氨基酸序列如seq id no.6所示；
4.根据权利要求1所述的抗人ceacam5蛋白的抗体，其特征在于，所述第一抗体或所述第二抗体为全长抗体或为所述全长抗体的抗原结合区域；
5.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码如权利要求1-4任一项中所述的第一抗体或第二抗体。
6.根据权利要求5所述的核酸分子，其特征在于，所述第一抗体轻链可变区的核酸序列如seq id no.22所...
【专利技术属性】
技术研发人员：冯旭征，吴海，吴萌，王静，邓陈玲，程朝霞，
申请(专利权)人：武汉爱博泰克生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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