【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学，尤其是指pdpn阳性巨噬细胞在制备脓毒症治疗药物中的应用。
技术介绍
1、黏附和脱颗粒促进调节蛋白(adap)，也称为fyb(fyn结合蛋白)或slap-120/130，是一种由fyb基因编码的造血细胞特异性免疫接头蛋白。adap最初是在t细胞中被发现和鉴定，被认为是t细胞特异的免疫接头蛋白，主要调控t细胞受体(tcr)信号转导及整合素介导的t细胞免疫黏附。adap与含有sh2结构域的76kda的白细胞蛋白(slp-76)形成相互作用模块，对tcr介导的信号转导、持久微团的形成以及通过调节整合素依赖和非依赖的黏附稳定t细胞接触具有重要作用。adap与src激酶相关磷酸化蛋白1(skap1)相互作用，通过由内向外和由外向内的途径增强整合素淋巴细胞功能相关抗原1(lfa-1)的激活，并介导t细胞的黏附。此外，adap还通过与含caspase募集结构域的膜相关鸟苷酸激酶蛋白1(carma1)相互作用，调节tcr诱导的核因子κb(nf-κb)的活化。最近的研究表明，adap-泛素结合酶9(ubc9)模块通过调节ras相关蛋白1(rap1)-富集于淋巴组织的细胞黏附和极化调节因子(rapl)的膜募集和ras相关c3肉毒菌毒素底物1(rac1)的活化，在整合素介导的t细胞黏附中发挥重要作用。除了在t细胞中表达外，adap还广泛表达于血小板及一些先天性免疫细胞，包括巨噬细胞、自然杀伤细胞和树突状细胞，并在这些细胞中发挥重要的免疫调控功能。adap通过与src激酶相关磷酸化蛋白2(skap2)和信号调节蛋白α(sirpα
2、目前越来越多的证据表明，adap参与调节多种疾病中特定细胞表面分子的表达。在抗肿瘤免疫过程中，adap通过转录因子活化t细胞核因子c1(nfatc1)促进细胞毒性t淋巴细胞程序性死亡受体1(pd-1)分子的表达。在免疫性血小板减少症患者中，adap表达降低与血小板减少相关，巨噬细胞中的adap通过抑制信号转导和转录激活因子1(stat1)的入核作用，减少细胞表面fcγr i/iv的表达，从而减弱巨噬细胞吞噬血小板的能力。另外，有报道称adap缺失的自然杀伤细胞在李斯特菌感染过程中表现出细胞表面cd107a分子表达的降低。因此，adap具有调控特定细胞表面分子表达的能力。
3、平足蛋白(pdpn)，又称pa2.26抗原、gp38、m2a、t1和d2-40，是一种在脊椎动物中高度保守小分子i型跨膜黏蛋白样糖蛋白。pdpn具有一个高度o-糖基化的细胞外结构域、一个疏水跨膜结构域和一个短的包含九个氨基酸的胞质段。pdpn被认为是淋巴管内皮细胞的主要标志物之一，同时在其他多种组织和细胞类型中广泛表达，包括肾小球足细胞、i型肺泡细胞、骨细胞、间皮细胞、脉络膜丛、神经胶质细胞、某些类型的神经和不同类型的成纤维细胞。在未受刺激的情况下，骨髓来源的巨噬细胞、正常组织来源的巨噬细胞和组织驻留巨噬细胞几乎不表达pdpn。然而，炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α或促炎症刺激物脂多糖(lps)能刺激小鼠脾脏和腹腔中巨噬细胞表面pdpn的表达，高表达pdpn的f4/80阳性巨噬细胞表现出高度的促炎和吞噬活性。pdpn敲除的巨噬细胞具有正常的吞噬和杀菌活性，但其丝状伪足形成减弱且表现出迁移受损。pdpn是唯一已知的血小板c型凝集素样受体2(clec-2)的内源性受体，可与血小板表面的clec-2相互作用，在调控脓毒症的发病机制方面受到广泛关注。lps或盲肠结扎穿孔诱导的脓毒症小鼠模型的研究显示，巨噬细胞pdpn与血小板clec-2的相互作用能促进巨噬细胞募集到感染部位从而加速对细菌的清除。造血细胞pdpn特异性敲除后，向腹膜感染部位募集的巨噬细胞数量及其比例有所降低，但中性粒细胞的数量则无明显变化。血小板通过clec-2参与调节相关急性炎症反应，clec-2与肺泡f4/80阳性巨噬细胞表面的pdpn相互作用，使lps诱导的急性呼吸窘迫综合征小鼠的肺炎组织损伤得以减弱。血小板clec-2和重组clec-2-fc蛋白均能增加巨噬细胞pdpn和cd44的表达，促进与胞内erm(ezrin-radixin-moesin)蛋白的相互作用，并加速了炎症巨噬细胞从腹膜部位迁移至肠系膜淋巴结以激活t细胞反应，从而减轻腹膜炎症。尽管如此，目前对于pdpn阳性巨噬细胞亚群的生物学特性、功能及其在脓毒症病理过程中的具体作用仍不清楚。
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种pdpn阳性巨噬细胞在制备脓毒症治疗药物中的应用。本专利技术通过构建脓毒症小鼠模型，从腹腔分离得到表面pdpn蛋白高表达的巨噬细胞，且pdpn蛋白的表达受adap蛋白调控。该类pdpn阳性腹腔巨噬细胞表现出巨噬细胞m2极化表型，通过rna-seq验证了m2型极化相关标志基因表达水平在pdpn阳性巨噬细胞中显著上调，吞噬体信号通路显著富集于pdpn阳性巨噬细胞中。
2、本专利技术的第一个目的是提供pdpn阳性巨噬细胞在制备脓毒症治疗药物中的应用，所述pdpn阳性巨噬细胞在细胞表面表达平足蛋白pdpn。
3、进一步地，所述pdpn阳性巨噬细胞来源于腹腔。
4、进一步地，所述pdpn阳性巨噬细胞的表达由黏附和脱颗粒促进调节蛋白adap调控。
5、本专利技术的第二个目的是提供促进巨噬细胞表面pdpn蛋白表达的制剂在制备脓毒症治疗药物中的应用。
6、本专利技术的第三个目的是提供促进adap蛋白表达的制剂在制备脓毒症治疗药物中的应用。
7、本专利技术的第四个目的是提供促进巨噬细胞表面pdpn蛋白表达的制剂在制备促进巨噬细胞m2表型极化的药物中的应用。
8、进一步地，所述制剂上调趋化因子配体的表达。
9、进一步地，所述趋化因子配体包括趋化因子配体13、趋化因子配体7、趋化因子配体24、趋化因子配体5和趋化因子配体22。
10、本专利技术的第五个目的是提供pdpn阳性巨噬细胞在制备促进细胞吞噬能力药物中的应用。
11、本专利技术的第六个目的是提供促进巨噬细胞表面pdpn蛋白表达的制剂在制备促进细胞吞噬能力药物中的应用。
12、本专利技术的有益效果：
13、本专利技术在野生型脓毒症小鼠腹腔中发现了受adap蛋白调控的pdpn阳性巨噬细胞，该类腹腔巨噬细胞的表面高表达pdpn平足蛋白，表现出m2极化表型且具有高吞噬活性，在宿主抵御脓毒症细菌感染过程中发挥关键作用，具有制备脓毒症治疗药物的潜力。
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1.PDPN阳性巨噬细胞在制备脓毒症治疗药物中的应用，其特征在于：所述PDPN阳性巨噬细胞在细胞表面表达平足蛋白PDPN。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述PDPN阳性巨噬细胞来源于腹腔。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述PDPN阳性巨噬细胞的表达由黏附和脱颗粒促进调节蛋白ADAP调控。
4.促进巨噬细胞表面PDPN蛋白表达的制剂在制备脓毒症治疗药物中的应用。
5.促进ADAP蛋白表达的制剂在制备脓毒症治疗药物中的应用。
6.促进巨噬细胞表面PDPN蛋白表达的制剂在制备促进巨噬细胞M2表型极化的药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述制剂上调趋化因子配体的表达。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述趋化因子配体包括趋化因子配体13、趋化因子配体7、趋化因子配体24、趋化因子配体5和趋化因子配体22。
9.PDPN阳性巨噬细胞在制备促进细胞吞噬能力药物中的应用。
10.促进巨噬细胞表面PDPN蛋白表达的制剂在制备促进
...【技术特征摘要】
1.pdpn阳性巨噬细胞在制备脓毒症治疗药物中的应用，其特征在于：所述pdpn阳性巨噬细胞在细胞表面表达平足蛋白pdpn。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述pdpn阳性巨噬细胞来源于腹腔。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述pdpn阳性巨噬细胞的表达由黏附和脱颗粒促进调节蛋白adap调控。
4.促进巨噬细胞表面pdpn蛋白表达的制剂在制备脓毒症治疗药物中的应用。
5.促进adap蛋白表达的制剂在制备脓毒症治疗药物中的应用。
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