【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及生物标志物big1在制备诊断或监测脓毒症免疫抑制的试剂中的应用。
技术介绍
1、脓毒症是一种由宿主对感染的免疫失调引起的危及生命的多器官功能障碍性疾病，长期以来一直是重症监护病房患者死亡的主要原因之一。自2017年世界卫生组织将其列为“全球健康优先事项”以来，脓毒症的诊疗已经成为医学界亟需攻克的重大挑战。研究表明，脓毒症患者最初的急性炎症很快就会转变为低免疫反应(免疫抑制)，对体内多个器官的功能造成持续的影响，导致器官损伤和系统的多器官功能障碍综合症(mods)等严重疾病。目前，除了液体复苏、抗感染治疗和对症支持疗法等传统方法外，尚缺乏有效的针对性治疗方法。当前，脓毒症治疗的难点在于脓毒症患者的免疫状态难以及时确定，部分患者在首次感染时即入院，此时患者基本处于急性炎症期，应当给予抗炎治疗；而大多数患者则是在经历二次、甚至多次感染后才入院，此时患者机体往往处于严重的免疫抑制阶段，应当增强患者的免疫功能。然而对于患者的免疫状态难以迅速确定，常常导致治疗方案选择不当，这不仅无法改善病情，反而可能加重病情甚至导致患者死亡。因此，在患者入院诊疗初期对其免疫状态做出迅速而准确的判断，是脓毒症治疗的与死亡率降低的关键，也是当前研究的热点问题。
2、现有技术可通过对单核细胞hla-dr及血清细胞因子表达水平进行检测，反映单核细胞的抗原提呈能力，可对脓毒症患者免疫抑制的状态进行诊断；但是整个检测过程需要流式细胞仪等设备的参与，操作相对复杂，且结果解读需要专业知识。其他的如：基因组学和转录组学检测或流式细胞术
3、而淋巴细胞计数或生物标志物检测，虽然成本较低且快速便捷，但是一般特异性和灵敏度有限，在单独用于诊断时，可能存在准确率不高的问题。因此，寻找新的标志物以识别或诊断脓毒症患者的免疫状态，是当前亟待解决的问题。
4、现有的与脓毒症免疫状态有关的标志物主要有白介素10(il-10)、可溶性白细胞分化抗原14亚型(scd14-st)、il-3、单核细胞表面的共刺激分子hla-dr、肿瘤坏死因子(tnf-α)等。其中il-10是一种抗炎细胞因子，可以抑制t淋巴细胞的增殖。其升高的水平与单核细胞hla-dr分子受抑制的水平相关，可以预测脓毒症的病死率。然而，由于临床研究有限，评价cars时期的生物学标志物是否可用于临床并无定论。scd14-st受患者的年龄、肾功能、g+菌或g-菌感染影响较大。il-3的脓毒症免疫状态检测特异度与敏感度均较低，其阳性预测值不够理想。hla-dr可以作为损伤相关免疫抑制的整体生物标志物，但在脓毒症初期，其与免疫系统的过度激活的关系并不十分明确，且其动态变化与脓毒症的发生与预后的相关性仍需进一步的证据支持。tnf-α在高龄、急性冠脉综合征、肾功能不全等等多种临床情境中都可能升高，特异性较差，并且受其他炎性因子的影响较大，不足以全面反映脓毒症的复杂免疫状态。
5、因此，本专利技术的目的是找到能够在脓毒症各个阶段均能稳定、普适、准确且高灵敏度地反映患者免疫状态的生物标志物。
技术实现思路
1、adp核糖基化因子鸟嘌呤核苷酸交换因子1(big1)是一种在细胞内囊泡运输中起重要作用的蛋白质。它参与激活adp-核糖基化因子(arfs)，通过加速将结合的gdp替换为gtp的过程。arfgef1包含一个sec7结构域，这个结构域可能负责鸟嘌呤核苷酸交换活性以及对brefeldina的抑制，在高尔基体的完整性、成熟的整合素β1糖基化以及神经突起的发展等方面起重要作用。big1在单核/巨噬细胞等免疫细胞中广泛表达，在免疫应答的调控中起到至关重要的作用。但此前尚未有关于big1与脓毒症或脓毒症免疫抑制存在相关性的报道。
2、本专利技术研究表明，脓毒症患者单核细胞的big1 mrna水平与能反映脓毒症免疫状态的hla-dr、tnf-α和il-6等的表达成负相关。这说明单核细胞big1可能是反映脓毒症患者免疫状态的一个标志物。在急性炎性刺激时，骨髓巨噬细胞和人源单核细胞(thp-1)big1表达量显著降低；相反在内毒素耐受时，big1表达量显著升高。这提示，巨噬细胞big1表达变化可能反映巨噬细胞免疫能力的状态的改变，有可能是监测脓毒症免疫抑制发生的新型标志物。
3、为解决现有技术的不足，本专利技术提供了生物标志物big1在制备诊断或监测脓毒症免疫抑制的试剂中的应用。
4、本专利技术第一个方面公开了检测待测样本中标志物的物质在制备诊断或监测脓毒症免疫状态产品中的应用，其中所述标志物包括big1标志物；
5、所述样本包括血液样本、尿液样本、穿刺液样本、呼吸道样本、脑脊液或组织样本。
6、优选地，所述血液样本包括血液、血浆、血清；
7、所述穿刺液样本包括胸腔积液、腹水；
8、所述呼吸道样本包括痰液、支气管肺泡灌洗液。
9、本专利技术第二个方面公开了一种产品，所述产品包括检测big1标志物的物质；
10、所述产品包括诊断或辅助诊断待测样本脓毒症免疫状态的产品、诊断或辅助诊断待测者脓毒症免疫状态的产品；
11、所述产品包括监测或辅助监测待测样本脓毒症免疫状态的产品、监测或辅助监测待测者脓毒症免疫状态的产品。
12、优选地，上述产品中，所述检测big1标志物的物质包括检测基因表达水平的物质或检测蛋白水平的物质；
13、所述产品包括试剂、试剂盒、试纸、核酸膜条、芯片、引物、探针；
14、所述待测者包括人或非人哺乳动物；
15、其中，所述试剂包括通过pcr反应、rt-pcr衍生反应、3sr扩增、lcr、sda、nasba、tma、sybr green、taqman探针、分子信标、双杂交探针、复合探针、ish、微阵列、southern印迹、northern印迹、多分析物谱测试、酶联免疫吸附测定法(elisa)、放射免疫测定法、免疫荧光测定法、酶免疫测定法、免疫沉淀测定法、化学发光测定法、免疫组织化学测定法、斑点印迹测定法或狭线印迹测定法检测样本中big1的基因、片段以及蛋白是否存在。
16、优选地，所述试剂盒包括基因检测试剂盒、蛋白检测试剂盒。
17、本专利技术第三个方面公开了标志物big1作为靶标在构建脓毒症免疫抑制模型中的应用，所述模型包括动物模型和细胞模型。
18、本专利技术第四个方面公开了标志物big1在制备调节脓毒症患者免疫状态药物中的应用。
19、优选地，所述药物包含敲除或敲低big1的试剂、抑制big1活性的试剂、或提高big1抑制物的水平或活性的物质。
20、本专利技术第五个方面公开了一种脓毒症免疫状态风险预测模型，所述预测模型包括使用机器学习方法进行模型训练构建的风险预测模型，所述机器学习方法包括使用big1标志物进行机器训练本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.检测待测样本中标志物的物质在制备诊断或监测脓毒症免疫状态产品中的应用，其特征在于，所述标志物包括BIG1标志物；
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述血液样本包括血液、血浆、血清；
3.一种产品，其特征在于，所述产品包括检测BIG1标志物的物质；
4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述检测BIG1标志物的物质包括检测基因表达水平的物质或检测蛋白水平的物质；
5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述试剂包括通过PCR反应、RT-PCR衍生反应、3SR扩增、LCR、SDA、NASBA、TMA、SYBR Green、TaqMan探针、分子信标、双杂交探针、复合探针、ISH、微阵列、Southern印迹、Northern印迹、多分析物谱测试、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、放射免疫测定法、免疫荧光测定法、酶免疫测定法、免疫沉淀测定法、化学发光测定法、免疫组织化学测定法、斑点印迹测定法或狭线印迹测定法检测样本中BIG1的基因、片段以及蛋白是否存在。
6.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述试剂盒包
7.标志物BIG1作为靶标在构建脓毒症免疫抑制模型中的应用，所述模型包括动物模型和细胞模型。
8.标志物BIG1在制备调节脓毒症患者免疫状态药物中的应用。
9.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述药物包含敲除或敲低BIG1的试剂、抑制BIG1活性的试剂、或提高BIG1抑制物的水平或活性的物质。
10.一种脓毒症免疫状态风险预测模型，其特征在于，所述预测模型包括使用机器学习方法进行模型训练构建的风险预测模型，所述机器学习方法包括使用BIG1标志物进行机器训练的过程；
11.一种脓毒症免疫状态监测系统，其特征在于，
...【技术特征摘要】
1.检测待测样本中标志物的物质在制备诊断或监测脓毒症免疫状态产品中的应用，其特征在于，所述标志物包括big1标志物；
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述血液样本包括血液、血浆、血清；
3.一种产品，其特征在于，所述产品包括检测big1标志物的物质；
4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于，所述检测big1标志物的物质包括检测基因表达水平的物质或检测蛋白水平的物质；
5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于，所述试剂包括通过pcr反应、rt-pcr衍生反应、3sr扩增、lcr、sda、nasba、tma、sybr green、taqman探针、分子信标、双杂交探针、复合探针、ish、微阵列、southern印迹、northern印迹、多分析物谱测试、酶联免疫吸附测定法(elisa)、放射免疫测定法、免疫荧光测定法、酶免疫测定法、免疫沉淀测...
【专利技术属性】
技术研发人员：沈晓燕，李海东，孙克玉，吴伏鹏，
申请(专利权)人：上海市闵行区中心医院，
类型：发明
国别省市：
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