【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及草本纤维原料处理，更具体地，涉及一种微生物液态菌剂及其制备方法和应用。
技术介绍
1、草本纤维是指从麻类、禾本科秸秆等草本植物体中提取纤维为原料制成的材料，具轻质、环保、可降解、生物相容性好等特点，在纺织、医疗、航空航天、汽车、建筑、包装等领域的应用潜力巨大。草本纤维材料具备的必要前提是获取优质的草本植物纤维。通常，草本植物纤维表面包裹着果胶、半纤维素、木质素等物质，草本植物纤维的提取即为果胶、半纤维素、木质素等物质选择性剥离的过程。工业上多采用化学提取法，成本高、能耗大、严重污染环境，且纤维制成率低、品质较差。生物提取法克节省大量化工原料和能源，极大减轻环境污染，且能获得更优质的纤维。
2、dickeya dadantii dce-01菌株(保藏编号：cgmcc5522，以下简称dce-01菌株)是一株可用于多种草本植物纤维提取的高效菌株，可以实现苎麻、亚麻、工业大麻、红麻等纤维的提取。
3、目前，除却规模化工厂化生产可以配备完整的微生物发酵车间为草本植物纤维的提取源源不断地dce-01菌株发酵液外，工业大麻和亚麻等的大田绿色脱胶、红麻等的大田水沤麻、苎麻的农户作坊式脱胶等多种复杂纤维提取场景并不能进行微生物的大规模发酵，从而极大地限制了dce-01菌株在草本植物纤维提取中的应用范围。
技术实现思路
1、基于现有技术中存在的上述技术问题，本专利技术提供一种微生物液态菌剂的制备方法，该方法得到的微生物液态菌剂在储存两个月后仍保持较高的活力并对草
2、为了实现上述目的，本专利技术的技术方案如下：
3、一种微生物液态菌剂的制备方法，包括以下步骤：
4、将dce-01菌株发酵液接种至含保护剂的葡萄糖肉汤培养基中培养，得到微生物液态菌剂；
5、其中，所述保护剂包括甘油、d-山梨醇、甘露醇、果糖和蔗糖；所述葡萄糖肉汤培养基中，甘油体积为含量为8-15％，d-山梨醇的摩尔浓度为0.3-0.6m，d-甘露醇的摩尔浓度为0.2-0.7m，果糖的质量浓度为0.15-0.4％，蔗糖的质量浓度为0.2-0.4％。
6、在一些实施方式中，所述葡萄糖肉汤培养基中，甘油体积为含量为10％，d-山梨醇的摩尔浓度为0.4m，d-甘露醇的摩尔浓度为0.6m，果糖的质量浓度为0.2％，蔗糖的质量浓度为0.3％。
7、在一些实施方式中，将dce-01菌株发酵液接种至所述葡萄糖肉汤培养基中后，在33-36℃下静置培养12-16h。
8、在一些实施方式中，将dce-01菌株发酵培养液以5-15％的接种量接入含保护剂的葡萄糖肉汤培养基中。
9、在一些实施方式中，所述葡萄糖肉汤培养基的基础配方包括：蛋白胨5-15g/l、牛肉膏2-10g/l、氯化钠2-10g/l、葡萄糖5-15g/l，ph7.2-7.4。
10、在一些实施方式中，所述dce-01菌株发酵液的制备包括以下步骤：
11、s1、将dce-01菌保斜面上取一环菌苔置于液体葡萄糖肉汤培养基中，活化过夜，得到种子液；
12、s2、将活化后的种子液梯度稀释于固体葡萄糖肉汤培养基平板培养；
13、s3、从平板上挑取单菌落置于液体葡萄糖肉汤培养基中扩培，然后接种至液体肉汤培养基中，得到dec-01菌株发酵液。
14、在一些实施方式中，步骤s1中，在33-37℃、160-180rpm活化过夜。
15、在一些实施方式中，步骤s2中，33-37℃倒置培养18-22h。
16、在一些实施方式中，步骤s3中，在34-37℃、160-180rpm扩培12-16h；接种后在34-37℃、160-180rpm条件培养6-8h。
17、在一些实施方式中，步骤s3中，以1-10％的接种量将培养液置于葡萄糖肉汤培养基中。
18、本专利技术还提供了上述任一实施方式的制备方法得到的微生物液态菌剂。
19、本专利技术还提供了上述的微生物液态菌剂在草本纤维脱胶中的应用。
20、相较于现有技术，本专利技术的有益效果如下：
21、本专利技术通过在葡萄糖肉汤培养基中加入特定的保护剂并将火化后的dce-01菌株发酵液接种至含有保护剂的肉汤培养基中，可以在常温条件下延长菌剂的储存时间，使微生物液态菌剂常温下储存两个月后仍保持较高的活力，对草本纤维仍具有较好的提取效率。
22、本专利技术的微生物液态菌剂存储时间长、易于运输，相较于固态菌剂，该液态菌剂具有高均匀性、易于控制、便于规模化和高效率的优点。
23、本专利技术的微生物液态菌剂制备方法简单，所得液态菌剂易于储存和运输，可大力促进dec-01菌株在工业大麻和亚麻等草本植物得大田绿色脱胶、红麻等的大田温水沤麻、苎麻的农户作坊式脱胶等多种不能进行微生物大规模发酵的复杂场景的应用。
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1.一种微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，所述葡萄糖肉汤培养基中，甘油体积为含量为10％，D-山梨醇的摩尔浓度为0.4M，D-甘露醇的摩尔浓度为0.6M，果糖的质量浓度为0.2％，蔗糖的质量浓度为0.3％。
3.根据权利要求1所述的微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，将DCE-01菌株发酵液接种至所述葡萄糖肉汤培养基中后，在33-36℃下静置培养12-16h。
4.根据权利要求1所述的微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，将DCE-01菌株发酵培养液以5-15％的接种量接入含保护剂的葡萄糖肉汤培养基中。
5.根据权利要求1所述的微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，所述葡萄糖肉汤培养基的基础配方为：蛋白胨5-15g/L、牛肉膏2-10g/L、氯化钠2-10g/L、葡萄糖5-15g/L，pH7.2-7.4。
6.根据权利要求1所述的微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，所述DCE-01菌株发酵液的制备包括以下步骤：
7.根据权利
8.根据权利要求6所述的微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，步骤S3中，以1-10％的接种量将培养液置于葡萄糖肉汤培养基中。
9.权利要求1-8任一项所述的制备方法得到的微生物液态菌剂。
10.权利要求9所述的微生物液态菌剂在草本纤维脱胶中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，所述葡萄糖肉汤培养基中，甘油体积为含量为10％，d-山梨醇的摩尔浓度为0.4m，d-甘露醇的摩尔浓度为0.6m，果糖的质量浓度为0.2％，蔗糖的质量浓度为0.3％。
3.根据权利要求1所述的微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，将dce-01菌株发酵液接种至所述葡萄糖肉汤培养基中后，在33-36℃下静置培养12-16h。
4.根据权利要求1所述的微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，将dce-01菌株发酵培养液以5-15％的接种量接入含保护剂的葡萄糖肉汤培养基中。
5.根据权利要求1所述的微生物液态菌剂的制备方法，其特征在于，所述葡萄糖肉汤培养基的基础配方为：蛋白胨5-15g/l、牛肉膏2-10g/l、氯化钠2...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨琦，段盛文，成莉凤，席果果，彭正红，
申请(专利权)人：中国农业科学院麻类研究所，
类型：发明
国别省市：
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