【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及敲低或抑制ant1的试剂在制备预防和/或治疗异位骨化的药物中的应用。
技术介绍
1、异位骨化（heterotopic ossification, ho）是指在非骨骼组织（包括肌肉、肌腱或其他软组织）中形成病理性骨组织，主要继发于创伤、烧伤、神经损伤以及关节置换术后，是临床上严重的并发症。其基本病理改变是在纤维结缔组织中形成成熟的板层骨、松质骨、骨髓腔、滋养血管，具有少量的造血功能和肌纤维薄膜等类似正常骨的结构。其临床症状主要是软组织周围的炎症表现，即肿胀、疼痛、发热、皮肤红斑，和发病部位的活动范围减少。由于异位骨化的高发病率以及其发病机制的复杂性，其预防及治疗一直受到人们的重视，且治疗的关键在于患者疼痛的缓解以及运动功能的改善。但目前异位骨化的发病机制仍不清楚，最有效的预防方案，手术时机的选择，物理治疗的必要性以及基因靶向治疗的临床应用等问题尚不明确。
2、目前对异位骨化的治疗主要依赖于外科手术切除异位骨组织，但这不可避免地会造成额外的创伤，从而容易导致异位骨化的复发。目前预防异位骨化形成公认的最有效的药物是非甾体类抗炎药物，它通过抑制环氧化酶减少炎性介质前列腺素的合成，抑制异位骨化中的祖细胞向成骨细胞的分化，可以缓解疼痛并阻止异位骨化的进展。但是它存在一定的副作用，比如引起胃肠道损伤和出现神经系统、泌尿系统、心血管系统的症状。此外，放射治疗、物理疗法、分子生物学机制干预也对异位骨化有一定的治疗效果，但是这些手段效果各异，且存在一定的副作用。目前尚缺少一种有效地靶向预防和治疗异位骨
3、腺嘌呤核苷酸转位酶1（adenine nucleotide translocase 1, ant1）由slc25a4基因编码，位于线粒体内膜，负责线粒体内adp/atp的交换和线粒体功能的调节。在ncbi中的gene id为11739，又称为slc25a4。ant1在异位骨化形成中是否发挥作用尚未见报道。近年来，腺相关病毒（adeno-associated virus, aav）由于其低免疫原性、高安全性、强组织特异性亲和能力和高效的基因递送能力，已成为基因治疗的首选递送载体。不同血清型的aav识别和结合的细胞表面受体不同，可以实现组织特异性的基因递送，并在体内持续稳定表达，广泛应用于心脏、肝脏、眼、神经系统、运动系统等组织。然而目前在针对异位骨化的研究领域，aav携带相关基因的治疗应用的相关研究鲜有报道。
4、鉴于此，本专利技术提供一种敲低或抑制ant1的试剂在制备预防和/或治疗异位骨化的药物中的应用，提供ant1新的医药用途，解决现有技术不清楚ant1在异位骨化中的确切作用、缺乏相应的药物治疗异位骨化的问题，为异位骨化的基因治疗研究开辟了新道路。
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题，本专利技术首次提出了通过敲低或敲除ant1达到治疗异位骨化的方案，具体包括以下方面。
2、本专利技术第一方面的目的，在于提供ant1抑制剂在制备治疗异位骨化药物中的应用。
3、本专利技术第二方面的目的，在于提供一种抑制ant1表达的shrna。
4、本专利技术第三方面的目的，在于提供一种抑制ant1表达的重组载体。
5、本专利技术第四方面的目的，在于提供一种抑制ant1表达的病毒。
6、本专利技术第五方面的目的，在于提供一种药物。
7、为了实现本专利技术上述的目的，本专利技术采取的技术方案是：
8、本专利技术的第一个方面，提供一种ant1抑制剂在制备治疗异位骨化药物中的应用。
9、所述ant1抑制剂包括1）、2）中的至少一种：
10、1）在基因水平上抑制ant1基因的物质；
11、2）在蛋白水平上抑制ant1蛋白的物质。
12、在本专利技术的一些实施方式中，具体地，所述ant1抑制剂包括降低ant1基因或蛋白的含量或表达水平的物质、降低ant1基因或蛋白活性的物质、促进ant1基因或蛋白降解的物质中的至少一种。
13、在本专利技术的一些实施方式中，所述ant1蛋白的氨基酸序列如a1）~a4）所示：
14、a1）氨基酸序列如seq id no：5所示的蛋白质；
15、a2）将序列如seq id no：5所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；
16、a3）与如seq id no：5所示的氨基酸序列具有至少以上85％的一致性的氨基酸序列；
17、a4）与a1）、a2）、a3）任一种所述的蛋白质相关的衍生物。
18、优选地，a2）中具有相同功能的蛋白质通常置换视为保守置换，例如在脂肪族氨基酸ala、val、leu和ile中的彼此置换、羟基残基ser和thr的互换、酸性残基asp和glu的交换、酰胺残基asn和gln之间的置换、碱性残基lys和arg的交换以及芳香残基phe、tyr间的置换。
19、优选地，所述a3）意指给定氨基酸序列与参比序列共有至少85％的同一性，例如，86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%。或者，意指给定氨基酸序列与参比序列具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10个氨基酸的区别，对于多肽，这种区别优选为氨基酸的置换或者缺失。这里同一性的差别可以来自于氨基酸的保守置换，也可以来自于标签蛋白的引入，或入核序列的引入，或信号肽序列的引入、修改。例如在seq id no：4的c端添加his、gfp、ha等标签，从而导致同一性的改变，或者在seq id no：4的n端添加信号肽，或者在n端添加常规入核序列，从而导致同一性的改变。
20、优选地，a4）中所述蛋白相关的衍生物，包括与标签蛋白连接的ant1融合蛋白、ant1蛋白的药学上可接受的盐、ant1蛋白的药学上可接受的化学修饰。
21、优选地，所述标签蛋白包括但不限于his、flag、myc、gst、gfp、ha中的至少一种。
22、在本专利技术的一些实施方式中，编码所述ant1蛋白的核酸序列包括：
23、如seq id no：4所示的核苷酸序列；或
24、将如seq id no：4所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或添加一个或几个核苷酸，编码相同活性蛋白质的核苷酸序列。
25、在本专利技术的一些实施方式中，所述降低ant1基因或蛋白的含量或表达水平的物质包括靶向ant1蛋白的小分子抑制剂、或降低ant1蛋白含量或表达水平的核苷酸。
26、在本专利技术的一些实施方式中，所述降低ant1蛋白含量或表达水平的核苷酸包括抑制ant1表达的小向导rna(small guide rna，sgrna)、抑制ant1表达的短发夹rna(shorthairpin rna，shrna)、敲除基因的knock out系统、抑制ant1表达的dsrna、抑制ant1表达本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.ANT1抑制剂在制备治疗异位骨化药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：
6.一种抑制ANT1表达的shRNA，其特征在于：
7.一种抑制ANT1表达的重组载体，其特征在于：
8.一种抑制ANT1表达的病毒，其特征在于：
9.一种药物，包括权利要求6所述的shRNA、权利要求7所述的重组载体、或权利要求8所述的病毒。
10.根据权利要求9所述的药物，其特征在于：
【技术特征摘要】
1.ant1抑制剂在制备治疗异位骨化药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：
6.一种抑制ant1表达的...
【专利技术属性】
技术研发人员：余斌，李冠志，
申请(专利权)人：南方医科大学南方医院，
类型：发明
国别省市：
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