【技术实现步骤摘要】
本公开提供了用于制备和鉴定烟草植物的组合物和方法，该烟草植物包含通过育种、转基因途径和顺化基因方法提高的氮利用效率。
技术介绍
1、肥料是烟草种植者的主要成本，并且增加的肥料与植物组织中较高水平的生物碱和烟草特异性亚硝胺(tsna)相关。不同的烟草品种需要不同水平的氮肥输入，以使每个品种实现最大产量。例如，与白肋烟烟草品种相比，马里兰烟草品种典型地需要少输入约25％的氮以实现最大产量。
2、提高烟草中的氮利用效率(nue)将增加每单位输入氮肥的烟草可收获产量。氮利用效率的提高还允许降低农场投入成本，减少对氮肥生产所需的不可再生能源的使用和依赖，并减少氮肥生产和农业使用对环境的影响。
3、本文提供了用于提高烟草的氮利用效率的方法和组合物。
技术实现思路
0、专利技术概述
1、一方面，本公开提供并且包括一种测定烟草品系的nue的方法，包括从烟草品系的烟草植物获得至少一种代谢物，测定所获得的代谢物的量，并基于所鉴定的代谢物的量测定烟草品系的nue。
2、一方面，本说明书提供并且包括一种使用代谢物特征测定烟草品系的nue的方法，包括从烟草品系的烟草植物分离代谢物特征，测定包含代谢物特征的每种代谢物的量，并且通过将所述代谢物特征与来自包含已知nue的对照烟草品系的对照代谢物特征比较来测定烟草品系的nue。
3、一方面，本说明书提供并且包括一种育种包含与增强的nue相关的代谢物特征的烟草品系的方法，包括测定来自第一烟草品系的第一烟草植
4、一方面，本说明书提供并且包括一种选择烟草植物的方法，包括获得烟草植物群体，从来自所述烟草植物群体的至少一种烟草植物分离与增强的nue相关的至少一种代谢物，并选择与对照烟草植物相比包含较高量的至少一种代谢物的至少一种烟草植物。在该方法的进一步的方面，与对照烟草植物相比，选择的烟草植物包含增强的nue。
5、一方面，本说明书提供并且包括一种选择烟草植物的方法，包括获得烟草植物群体，从来自所述烟草植物群体的至少一种烟草植物分离与增强的nue相关的至少一种代谢物，并选择与对照烟草植物相比包含较低量的至少一种代谢物的至少一种烟草植物。
6、一方面，本说明书提供并且包括一种筛选烟草植物中与增强的nue相关的第一代谢物特征的方法，包括从烟草植物分离与增强的nue相关的第一代谢物特征，测定包含所述第一代谢物特征的至少一种代谢物的量，将所述第一代谢物特征与包含已知nue的对照烟草植物的第二代谢物特征比较，并确定所述第一代谢物特征是否与增强的nue相关。
7、一方面，本说明书提供并且包括改性烟草种子或由其生长的烟草植物，其包含含有与编码区可操作地连接的异源启动子的顺化基因多核苷酸，其中与在相同条件下生长时缺乏顺化基因多核苷酸的未改性对照烟草植物相比，所述改性烟草植物包含增强的氮利用效率。
8、一方面，本说明书提供并且包括重组dna构建体，其包含与编码多肽的多核苷酸可操作地连接的异源启动子，所述多肽与选自下组的多肽至少70％一致或相似：seq id nos:1-8。
9、一方面，本说明书提供并且包括熟化的烟草材料或包含所述熟化的烟草材料的烟草制品，其中所述熟化的烟草材料由包含含有与编码区可操作地连接的异源启动子的顺化基因多核苷酸的烟草植物制成，其中与在相同条件下生长时缺乏顺化基因多核苷酸的未改性对照烟草植物相比，所述改性烟草植物包含增强的氮利用效率。
10、一方面，本说明书提供并且包括包含本文公开的改性烟草种子或植物的温室、生长室或田间。
11、一方面，本说明书提供并且包括改性烟草种子或由其生长的烟草植物，其在编码选自下组的多肽的内源基因座中包含至少一个突变：seq id nos:25-40，其中与在相同条件下生长时至少缺乏一个突变的未改性对照烟草植物相比，改性烟草种子或烟草植物具有增强的氮利用效率。
12、一方面，本说明书提供并且包括重组dna构建体，其包含与向导rna可操作地连接的异源启动子，该向导rna包含与编码选自下组的多肽的多核苷酸一致或互补的至少18个连续核苷酸：seq id nos:25-40。
13、一方面，本说明书提供并且包括熟化的烟草材料或包含所述熟化的烟草材料的烟草制品，其中所述熟化的烟草材料由在编码选自下组的多肽的内源基因座中包含至少一个突变的烟草植物制成：seq id nos:25-40，其中与在相同条件下生长时缺乏所述至少一个突变的未改性对照烟草植物相比，所述改性烟草种子或烟草植物包含增强的nue。
14、一方面，本说明书提供并且包括改性烟草种子或由其生长的烟草植物，其包含含有与编码小rna(srna)的多核苷酸可操作连接的异源启动子的顺化基因多核苷酸，所述多核苷酸与选自下组的多核苷酸至少85％一致或互补：seq id nos:41-56，其中与在相同条件下生长时缺乏顺化基因多核苷酸的未改性对照烟草植物相比，所述改性烟草种子或烟草植物包含增强的nue。
15、一方面，本说明书提供并且包括一种重组dna构建体，其包含与编码小rna(srna)的多核苷酸可操作地连接的异源启动子，所述多核苷酸与选自下组的多核苷酸至少85％一致或互补：seq id nos:41-56。
16、一方面，本说明书提供并且包括熟化的烟草材料或包含所述熟化的烟草材料的烟草制品，其中所述熟化的烟草材料由包含顺化基因多核苷酸的烟草植物制成，所述顺化基因多核苷酸包含与编码srna的多核苷酸可操作地连接的异源启动子，所述srna与选自下组的多核苷酸至少85％一致或互补：seq id nos:41-56，并且其中与在相同条件下生长时缺乏所述顺化基因多核苷酸的未改性对照烟草植物相比，所述改性烟草种子或烟草植物包含增强的nue。
17、一方面，本说明书提供并且包括一种增强烟草植物的nue的方法，包括将顺化基因核酸分子引入烟草细胞中，并从所述烟草细胞再生改性烟草植物，其中与缺乏顺化基因核酸分子的烟草植物相比，所述改性烟草植物包含增强的nue。
18、一方面，本说明书提供并且包括一种增强烟草植物的nue的方法，包括将引入改性的编码具有选自下组的序列的基因的核酸分子引入烟草细胞中：seq id nos:41-56，并从所述烟草细胞再生改性烟草植物，其中与缺乏改性的烟草植物相比，所述改性烟草植物包含增强的nue。
19、一方面，本说明书提供并且包括一种增强烟草植物的nue的方法，包括将编码小rna(srna)的核酸引入烟草细胞中，所述核酸与编码具有选自下组的序列的基因的核酸分子的至少18个连续核酸本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种生产包含增强的氮利用效率(NUE)性状的烟草植物的方法，包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中与在相同条件下生长的缺乏所述增强的NUE性状的烟草植物相比，所述增强的NUE性状选自下组：增加的偏要素生产率(PFP)、增加的农学效率(AE)、增加的回收效率(RE)、增加的生理效率(PE)和增加的内部效率(IE)。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一烟草植物群体选自下组：MD609、MD601、Banket A1、K326、K346、K358、K394、K399、K730、NC196、NC37NF、NC471、NC55、NC92、NC2326、NC95和NC925。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二烟草植物是白肋烟烟草品种。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二烟草植物选自下组：TN86、TN86LC、TN90、TN90LC、TN97和TN97LC。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述一个或多个分子标志物在所述基因座的3cM内。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述一个或多
...【技术特征摘要】
1.一种生产包含增强的氮利用效率(nue)性状的烟草植物的方法，包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中与在相同条件下生长的缺乏所述增强的nue性状的烟草植物相比，所述增强的nue性状选自下组：增加的偏要素生产率(pfp)、增加的农学效率(ae)、增加的回收效率(re)、增加的生理效率(pe)和增加的内部效率(ie)。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一烟草植物群体选自下组：md609、md601、banket a1、k326、k346、k358、k394、k399、k730、...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·弗雷德里克，C·库迪西普迪，许冬梅，
申请(专利权)人：奥驰亚客户服务有限公司，
类型：发明
国别省市：
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