【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医疗器械领域，具体涉及一种促进糖尿病伤口修复的海带脱细胞支架及其制备方法和应用。
技术介绍
1、糖尿病伤口难以愈合是糖尿病最严重的并发症，给患者和医疗保健系统带来了沉重的负担。伤口愈合涉及止血、炎症、细胞增殖和组织重塑，是一个由生长因子、细胞外基质（ecm）、不同组织和细胞谱系协同作用的高度组织化的生物学过程。当伤口形成时，免疫细胞被募集到该部位以对抗刺激，尤其是巨噬细胞，这是伤口愈合的先决条件。巨噬细胞可以被激活并切换到不同的表型以适应伤口愈合的微环境。m1巨噬细胞（促炎表型）在炎症早期被脂多糖（lps）等促炎因子激活，然后通过分泌促炎因子如肿瘤坏死因子-α（tnf-α）和白细胞介素-1β（il-1β）来对抗伤口部位的感染和炎症；随着伤口愈合由炎症阶段向增殖阶段过渡，巨噬细胞极化为m2（促愈合）表型，该表型可分泌抗炎因子（白细胞介素-4、il-4）和生长因子，如转化生长因子-β（tgf-β）和血管内皮生长因子（vegf），以刺激成纤维细胞的生长和迁移以及血管再生。然而，在糖尿病伤口中，高血糖微环境会产生ros和促炎因子，破坏m2巨噬细胞表型转换，导致细胞氧化应激损伤和长期慢性炎症。此外，未能切换到m2表型导致无法与其他细胞（如成纤维细胞和内皮细胞）交流，阻碍细胞增殖和迁移等细胞活动，损害血管生成、再上皮化，并最终延长愈合过程。因此，减少ros产生、诱导巨噬细胞极化、激活huvec反应和促进血管生成的策略是加速糖尿病慢性伤口愈合的前景。
2、近年来，包括水凝胶、支架和薄膜在内的生物活性敷料主要依赖于细胞
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种促进糖尿病伤口修复的海带脱细胞支架及其制备方法和应用。所述海带脱细胞支架具有内源性抗氧化、抗炎和免疫调节活性，且制备方法简单，温和有效，能够加速糖尿病伤口愈合。
2、为实现上述专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：
3、本专利技术提供了一种促进糖尿病伤口修复的海带脱细胞支架的制备方法，包括以下步骤：
4、（1）将氢键供体和氢键受体在高温下混合均匀至呈现澄清透明的液体状态，冷却后无晶体析出，得到脱细胞试剂；
5、（2）将海带处理后清洗，使用正己烷浸泡以去除表面的蜡；
6、（3）使用所述步骤（1）的脱细胞试剂对去蜡后的海带进行脱细胞处理，然后经过清洗、冷冻干燥得到海带脱细胞支架。
7、进一步的，所述氢键供体为甘油、乙二醇中的至少一种，所述氢键受体为咪唑、氯化胆碱中的至少一种。
8、进一步的，所述氢键供体和氢键受体的摩尔比为1-7:2-7。
9、优选的，所述氢键供体为甘油，所述氢键受体为咪唑；所述咪唑和甘油的摩尔比为7:7。
10、进一步的，所述步骤（2）中，正己烷的浸泡时间为15-20分钟，浸泡次数为2-3次。
11、进一步的，所述步骤（3）中，脱细胞处理的时间为5-7天，温度为37-40℃，转速为180-200 r/min。
12、进一步的，所述步骤（1）中，高温为80℃。
13、本专利技术还提供了所述的制备方法制备得到的海带脱细胞支架，其中的岩藻多糖含量为1.5-9μg/g、多酚含量为200-740μg/g和黄酮含量为10-40μg/g。
14、本专利技术还提供了所述的海带脱细胞支架在制备促进伤口愈合和修复的敷料中的应用。
15、进一步的，所述伤口是由糖尿病所引起的。
16、进一步的，所述敷料的用法为将敷料覆盖于伤口处10天以上。
17、进一步的，所述海带脱细胞支架能够通过减少糖尿病伤口部位的氧化应激、避免慢性炎症形成、调节巨噬细胞向m2表型极化和促进血管再生促进糖尿病伤口的愈合和修复。
18、本专利技术与现有技术相比，具有以下优点和有益效果：
19、（1）本专利技术的脱细胞试剂制备简单、安全可降解、毒性低；
20、（2）本专利技术的脱细胞试剂不仅可以有效脱细胞而且处理过程温和不会破坏decm的生物活性成分、结构和机械性能；
21、（3）本专利技术制备的decm具有稳定的三维结构和合适的机械性能，在不添加任何交联剂的情况下可以为细胞生长提供支持空间并且可以保证在体外应用中的完整性；
22、（4）本专利技术制备的decm中保留的生物活性成分使其具有内源性抗氧化、抗炎和免疫调节活性；
23、（5）本专利技术制备的decm可以通过清除活性氧、缓解伤口部位炎症反应，通过免疫调节改变巨噬细胞旁分泌促进血管再生、促进伤口收缩、肉芽组织再生、胶原沉积和再上皮化提高糖尿病伤口愈合的速度和质量。
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1.一种促进糖尿病伤口修复的海带脱细胞支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述氢键供体为甘油、乙二醇中的至少一种，所述氢键受体为咪唑、氯化胆碱中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述氢键供体和氢键受体的摩尔比为1-7：2-7。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中，正己烷的浸泡时间为15分钟-20分钟，浸泡次数为2次-3次。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中，脱细胞处理的时间为5天-7天，温度为37℃-40℃。
6.权利要求1-5任一项所述的制备方法制备得到的海带脱细胞支架，其特征在于，所述海带脱细胞支架中的岩藻多糖含量为1.5μg/g -9μg/g、多酚含量为200μg/g -740μg/g和黄酮含量为10μg/g -40μg/g。
7.权利要求6所述的海带脱细胞支架在制备促进伤口愈合和修复的敷料中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述伤口是由
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述敷料的用法为将敷料覆盖于伤口处10天以上。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述海带脱细胞支架能够通过减少糖尿病伤口部位的氧化应激、避免慢性炎症形成、调节巨噬细胞向M2表型极化和促进血管再生促进糖尿病伤口的愈合和修复。
...【技术特征摘要】
1.一种促进糖尿病伤口修复的海带脱细胞支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述氢键供体为甘油、乙二醇中的至少一种，所述氢键受体为咪唑、氯化胆碱中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述氢键供体和氢键受体的摩尔比为1-7：2-7。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中，正己烷的浸泡时间为15分钟-20分钟，浸泡次数为2次-3次。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中，脱细胞处理的时间为5天-7天，温度为37℃-40℃。
6.权利要求1-5任一项所述的制备方法制备得...
【专利技术属性】
技术研发人员：于钰，李生慧，贾琼琳，李兆霞，任汝仪，刘晨光，
申请(专利权)人：江苏优度生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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