【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于柑橘，具体涉及柑橘过氧化氢酶基因cat植物表达载体及其应用。
技术介绍
1、柑橘，又名番橘、橘子、扁柑和陈皮等，为芸香科柑橘属小乔木，其果实富含丰富的维生素c和多种矿物质，有助于增强免疫力和预防感冒，同时能够制作果汁、果酱、果酒和果醋等多种受欢迎的加工品。
2、目前柑橘的主产区主要集中在浙江、四川、湖南、湖北、江西、广西、广东和云南等地，其中，湖南、湖北和云南等省的土壤一般为酸性土壤，四川等省市的土壤一般为石灰性碱性土壤，浙江等省市的土壤一般为盐碱地，研究表明，酸性土壤容易造成柑橘缺钙，石灰性碱性土壤和盐碱地容易造成柑橘缺铁，微量元素的缺乏导致柑橘树体的抗逆性减弱，再加上柑橘在花期、幼果期、果实膨大期和成熟期等生长时期常常会由于阴雨、干旱、低温和病虫害等不良外界环境，导致柑橘发育不正常，两者结合容易影响柑橘果实的产量和品质，因此，柑橘的抗逆性研究已成为当前研究热点之一。
3、目前由于缺乏柑橘相关抗逆功能的基因资源，导致柑橘的抗逆性研究受到限制。
4、鉴于此，设计柑橘过氧化氢酶基因cat植物表达载体及其应用，以解决上述问题。
技术实现思路
1、为解决上述
技术介绍
中提出的问题。本专利技术提供了柑橘过氧化氢酶基因cat植物表达载体及其应用，具有为柑橘抗逆分子育种提供理论依据和部分候选基因资源，对柑橘的耐逆性研究具有参考意义的特点。
2、本专利技术的另一目的是提供柑橘过氧化氢酶基因cat植物表达载体的应用。
3、为实
4、进一步的，所述柑橘过氧化氢酶cat基因的获取包括以下步骤：
5、s101：从ncbi数据库获取柑橘过氧化氢酶cat基因相关的蛋白序列；
6、s102：根据获取的柑橘过氧化氢酶cat基因相关的蛋白序列，设计具有特异性的pcr引物；
7、s103：通过trizol法提取克里曼丁红橘叶片中的总rna；
8、s104：以提取的总rna为模板，通过逆转录酶作用，合成cdna；
9、s105：通过pcr引物和合成的cdna进行扩增；
10、s106：回收dna片段；
11、s107：基因测序，无误即为柑橘过氧化氢酶cat基因。
12、进一步的，所述植物表达载体的构建包括以下步骤：
13、s201：通过限制性内切酶对柑橘过氧化氢酶cat基因和载体进行酶切，产生互补的连接末端；
14、s202：通过dna连接酶连接酶切后的柑橘过氧化氢酶cat基因和载体，形成重组质粒；
15、s203：将重组质粒导入大肠杆菌，培养大肠杆菌，筛选出含有重组质粒的阳性克隆；
16、s204：通过引物对阳性克隆中的重组质粒进行pcr扩增，验证柑橘过氧化氢酶cat基因正确插入载体；
17、s205：对pcr扩增产物测序，验证无误，即为植物表达载体。
18、所述的柑橘过氧化氢酶基因cat植物表达载体在柑橘抗逆分子育种中的应用
19、与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
20、本专利技术从克里曼丁红橘中克隆柑橘cat基因，并进行亚细胞定位和表达分析及转基因功能鉴定，为明确其生理功能和作用机理奠定基础，为柑橘抗逆分子育种提供理论依据和部分候选基因资源，对柑橘的耐逆性研究具有参考意义。
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1.柑橘过氧化氢酶基因CAT植物表达载体，其特征在于，包括：柑橘过氧化氢酶CAT基因和植物表达载体，所述柑橘过氧化氢酶CAT基因为ESR48603。
2.根据权利要求1所述的柑橘过氧化氢酶基因CAT植物表达载体，其特征在于：所述柑橘过氧化氢酶CAT基因的获取包括以下步骤：
3.根据权利要求1所述的柑橘过氧化氢酶基因CAT植物表达载体，其特征在于：所述植物表达载体的构建包括以下步骤：
4.根据权利要求1-3任一项所述的柑橘过氧化氢酶基因CAT植物表达载体在柑橘抗逆分子育种中的应用。
【技术特征摘要】
1.柑橘过氧化氢酶基因cat植物表达载体，其特征在于，包括：柑橘过氧化氢酶cat基因和植物表达载体，所述柑橘过氧化氢酶cat基因为esr48603。
2.根据权利要求1所述的柑橘过氧化氢酶基因cat植物表达载体，其特征在于：所述柑橘过氧化氢酶cat...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗赛男，张文，谭炎宁，胡其军，程小梅，王威武，唐加龙，萧楚楚，
申请(专利权)人：湖南省园艺研究所，
类型：发明
国别省市：
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