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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物,具体涉及一种假单胞菌ch-1及其应用和应用方法。
技术介绍
1、辛烯是无色液体,具有类似于石油的气味,其不溶于水,溶于乙醇、乙醚、丙酮、石油醚等多数有机溶剂,根据这一特点可以用作溶剂,也可用于增塑剂、表面活性剂的制备。辛烯不小心的吸入或口服会对人体造成一定的伤害,比如对呼吸道粘膜和眼结膜有轻度刺激作用;中毒表现有烧灼感、咳嗽、喘息、喉炎、气短、头痛、恶心和呕吐。除此以外,辛烯还对环境造成很大的伤害,例如污染水体。
2、因此,研究环境中辛烯的高效降解对人类健康很有必要。但现有技术中未发现有关假单胞菌以辛烯为唯一碳源来实现辛烯高效降解的报道和研发,目前急需解决生物净化工程中对有机物的污染的降解方法,尤其是有机物辛烯的污染。
技术实现思路
1、针对上述现有技术中存在的问题,研发团队经过研究,提供了一种假单胞菌ch-1及其应用和应用方法。本专利技术的假单胞菌ch-1能够有效降解辛烯、正己烷、邻二甲苯、壬烷、乙酸乙酯或邻二氯苯等有害有机物,尤其是对高浓度的以辛烯为碳源的降解效率极其优异,特别是对高浓度的以辛烯为唯一碳源的降解效率更为优异,为处理含该类污染物的生物净化工程提供了有力支持。
2、一方面,本专利技术提供了一种假单胞菌ch-1,所述假单胞菌ch-1为假单胞菌(pseudomonas sp.)ch-1,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2024年5月30日,保藏编号:cctcc m 20241107,地址:中国,武汉,武汉大学,邮编4
3、进一步,本专利技术所述的假单胞菌ch-1的菌体呈杆状、无芽孢、无鞭毛、易挑起,所述假单胞菌ch-1的菌苔沿划线生长,所述假单胞菌ch-1为好氧菌且革兰氏染色阴性。
4、进一步,本专利技术所述的假单胞菌ch-1的菌落呈点状、白色、不透明、形态饱满、光滑湿润。
5、另一方面,本专利技术提供了一种上述任一项所述的假单胞菌ch-1的应用,所述假单胞菌ch-1应用于降解有机物,所述有机物包括:辛烯、正己烷、邻二甲苯、壬烷、乙酸乙酯或邻二氯苯。
6、进一步,本专利技术所述的假单胞菌ch-1的应用中,所述有机物为辛烯。
7、再一方面,本专利技术提供了一种上述任一项所述的假单胞菌ch-1的应用方法,所述方法包括:
8、扩大培养所述假单胞菌ch-1获得菌液作为酶源;再以含辛烯的有机物为底物,以无机盐培养基为介质,在ph=4~9、转数100~300 r/min、温度20℃~40℃的条件下,加入所述酶源对所述底物进行降解反应。
9、进一步,本专利技术所述的方法中,所述辛烯在所述无机盐培养基中的初始浓度为≤200mg/l。
10、进一步,本专利技术所述的应用方法中,在初始菌体浓度为od600=0.02、ph=5~8、温度为25℃~35℃、降解时间24h~48h的条件下,对所述初始浓度为72~200 mg/l的辛烯的降解率≥85%。
11、进一步,本专利技术所述的应用方法中,所述酶源的具体制备方法包括:
12、步骤1)斜面培养:将所述假单胞菌ch-1接种于斜面lb固体培养基上,在温度为30℃下培养24~36h,获得斜面菌体;
13、所述斜面lb固体培养基的组成为:10g/l的nacl,10g/l的胰蛋白胨,5g/l的酵母粉,18~20g/l的琼脂,溶剂为去离子水;
14、步骤2)扩大培养:用接种环从所述斜面菌体中挑取菌体接种至lb液体培养基中,在温度为30℃的条件下培养24~36h,获得od600=0.1~0.2的菌液;
15、所述lb液体培养基的组成为:10g/l的nacl,胰蛋白胨的10g/l,5g/l的酵母粉,溶剂为去离子水。
16、进一步,本专利技术所述的应用方法中,所述无机盐培养基的组成为:4.5g /l的na2hpo4·12h2o,1.0g/l的kh2po4,2.5g/l的(nh4)2so4,0.2g/l的mgso4·7h2o,0.023g/l的无水cacl2,1ml/l的微量元素母液,溶剂为去离子水;
17、所述微量元素母液的组成为:1.0g/l的feso4·7h2o,0.02g/l的cuso4·5h2o,0.014g/l的h3bo3 ,0.10g/l的mnso4·4h2o,0.10g/l的znso4·7h2o,0.02g/l的na2moo4·2h2o,0.02g/l的cocl2·6h2o,溶剂为去离子水。
18、与现有技术相比,本专利技术具有以下有益的技术效果:
19、本专利技术所述的假单胞菌ch-1,能有效降解辛烯、正己烷、邻二甲苯、壬烷、乙酸乙酯或邻二氯苯等有机物能,尤其是以辛烯为碳源和能源的底物具有高效的降解率。例如:在初始菌体浓度(以od600计)为od600=0.01的情况下,辛烯的初始浓度为72~200 mg/l,ph值为7时,温度为30℃时,降解反应44h时,对辛烯的降解率达到了91%以上;降解反应48h时,对辛烯的降解率可达96%以上。对生物法净化辛烯的工程应用具有重要意义。此外,假单胞菌ch-1菌株的生长温度和ph范围广。
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1.一种假单胞菌CH-1,其特征在于,所述假单胞菌CH-1为假单胞菌(Pseudomonas sp.)CH-1,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2024年5月30日,保藏编号:CCTCC M20241107,地址:中国,武汉,武汉大学,邮编430072。
2.根据权利要求1所述的假单胞菌CH-1,其特征在于,所述假单胞菌CH-1的菌体呈杆状、无芽孢、无鞭毛、易挑起,所述假单胞菌CH-1的菌苔沿划线生长,所述假单胞菌CH-1为好氧菌且革兰氏染色阴性。
3.根据权利要求1所述的假单胞菌CH-1,其特征在于,所述假单胞菌CH-1的菌落呈点状、白色、不透明、形态饱满、光滑湿润。
4.一种如权利要求1~3任一项所述的假单胞菌CH-1的应用,其特征在于,所述假单胞菌CH-1应用于降解有机物,所述有机物包括:辛烯、壬烷、正辛烷、正己烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、二氯乙烯、甲基环己烷、异丙醇、邻二甲苯、或邻二氯苯。
5.根据权利要求4所述的假单胞菌CH-1的应用,其特征在于,所述有机物为辛烯。
6.一种如权利要求1~3任一项所述的假单
7.根据权利要求6所述的应用方法,其特征在于,所述辛烯在所述无机盐培养基中的初始浓度≤200mg/L。
8. 根据权利要求7所述的应用方法,其特征在于,在初始菌体浓度OD600 = 0.02、pH=5~8、温度为25℃~35℃、降解时间24h~48h的条件下,对所述初始浓度为72~200 mg/L的辛烯的降解率≥85%。
9.根据权利要求8所述的应用方法,其特征在于,所述酶源的具体制备方法包括:
10. 根据权利要求9所述的应用方法,其特征在于,所述无机盐培养基的组成为:4.5g/L的Na2HPO4·12H2O,1.0g/L的KH2PO4,2.5g/L的(NH4)2SO4,0.2g/L的MgSO4·7H2O,0.023g/L的无水CaCl2,1mL/L的微量元素母液,溶剂为去离子水;
...【技术特征摘要】
1.一种假单胞菌ch-1,其特征在于,所述假单胞菌ch-1为假单胞菌(pseudomonas sp.)ch-1,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2024年5月30日,保藏编号:cctcc m20241107,地址:中国,武汉,武汉大学,邮编430072。
2.根据权利要求1所述的假单胞菌ch-1,其特征在于,所述假单胞菌ch-1的菌体呈杆状、无芽孢、无鞭毛、易挑起,所述假单胞菌ch-1的菌苔沿划线生长,所述假单胞菌ch-1为好氧菌且革兰氏染色阴性。
3.根据权利要求1所述的假单胞菌ch-1,其特征在于,所述假单胞菌ch-1的菌落呈点状、白色、不透明、形态饱满、光滑湿润。
4.一种如权利要求1~3任一项所述的假单胞菌ch-1的应用,其特征在于,所述假单胞菌ch-1应用于降解有机物,所述有机物包括:辛烯、壬烷、正辛烷、正己烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、二氯乙烯、甲基环己烷、异丙醇、邻二甲苯、或邻二氯苯。
5.根据权利要求4所述的假单胞菌...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈东之,陆李超,孟辰航,欧光权,鞠拓,
申请(专利权)人:浙江海洋大学,
类型:发明
国别省市:
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