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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物组培,具体涉及一种用于培养银缕梅的组培快繁培养基和组培快繁方法。
技术介绍
1、银缕梅( parrotia subaequalis(h.t.cheng)r.m.hao et h_t.wei)是金缕梅科(parrotia)银缕梅属落叶小乔木,是第一批《国家重点保护野生植物名录》中重点保护野生植物、《中国植物红色名录》列为ⅰ级濒危种,被国际自然保护联盟(iucn)列为极度濒危(critically endangered,cr)物种,被称为被子植物中的活化石。银缕梅作为第三纪孑遗植物,对物种演变和地球环境变化有着重要的科研价值。银缕梅生境分布狭窄,在我国的江苏宜兴,浙江安吉、临安,安徽的舒城、金寨和绩溪等部分地区分布,规模最大的种群也只有91棵。银缕梅花朵、叶形及颜色、树形都极具观赏价值,是应用于园林绿化景观和园艺盆景的宝贵资源;其木质细密、坚硬、比重大,是优良的木材树种,因此,对银缕梅资源保护与繁育技术研究具有重要的意义。
2、在自然条件下,银缕梅在种群中竞争能力比较弱,野生银缕梅大多生长于低海拔区的河道溪流边,高海拔区域分布在乱石丛中,保育工作难度非常大,光照不足的地方,银缕梅成活率非常低;其次,通常1~3年开花一次,银缕梅雌雄花花期不育,自然授粉率非常低,野生种子极难获得。目前关于银缕梅繁育技术研究报道只有少数几篇,多数集中在种子萌发条件、扦插环境因素等研究方面。郑学峰等对银缕梅老树采用扦插繁殖方法,春季硬枝扦插成活率只有30%~35%,秋冬季当年生
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种用于培养银缕梅的组培快繁培养基和组培快繁方法,芽诱导率高,侧芽增殖系数高。
2、为了解决以上技术问题,本专利技术提出了以下技术方案:
3、本专利技术提供了一种用于培养银缕梅的组培快繁培养基,所述组培快繁培养基包括诱导培养基、增殖培养基和生根培养基;
4、所述诱导培养基以wpm为基本培养基,还包括1.0~1.5mg/l kt、28~30g/l蔗糖和6~8g/l琼脂;
5、所述增殖培养基以wpm为基本培养基,还包括1.0~1.5mg/l 6-ba、0.003~0.005mg/l tdz、28~30g/l蔗糖和6~8g/l琼脂;
6、所述生根培养基以1/2ms为基本培养基,还包括28~30g/l蔗糖和6~8g/l琼脂。
7、优选的,所述生根培养基还包括0.11~0.4mg/l naa。
8、本专利技术提供了一种银缕梅的组培快繁方法,采用上述技术方案所述的组培快繁培养基,包括以下步骤:
9、将银缕梅的带隐芽茎段接种至诱导培养基中进行诱导培养,得到带侧芽的茎段;
10、将所述带侧芽的茎段转接于增殖培养基中进行增殖培养,得到丛生芽;
11、将所述丛生芽切割成单芽转接于生根培养基上进行生根培养,得到生根苗。
12、优选的,所述茎段在接种前还包括消毒,所述消毒包括先用体积浓度75%乙醇浸泡30~40s,无菌水冲洗3~4次,再用有效氯含量0.26%~0.52%的次氯酸钠溶液浸泡5~10min,无菌水冲洗5~6次。
13、优选的,所述诱导培养、增殖培养和生根培养的温度分别为23~27℃。
14、优选的,所述诱导培养为先进行暗培养再进行光照培养;所述增殖培养和生根培养分别为光照培养。
15、优选的,所述光照培养中的光照时间分别为12~16h/d;光照的强度分别为2200~2500lx;所述光照培养中的黑暗时间分别为8~12h/d。
16、优选的,所述诱导培养的时间为28~32d,诱导培养中的暗培养的时间为2~4d,光照培养的时间为26~28d。
17、优选的,所述增殖培养的时间为28~35d;所述生根培养的时间为28~33d。
18、优选的,所述带侧芽的茎段进行增殖培养前,还包括:将所述带侧芽的茎段进行短期继代培养。
19、优选的,所述带隐芽茎段的长度为1.5~2.0cm。
20、本专利技术的有益效果:本专利技术提供了一种用于培养银缕梅的组培快繁培养基,该组培快繁培养基中,kt为kinetin,即激动素,kt能够促进芽的生成和不定芽的生长。6-ba为6-苄氨基嘌呤,促进芽的生长;tdz为噻苯唑,促进芽的生长和发育。在kt、6-ba和tdz的共同作用下提高带芽茎段的芽诱导率和芽的增殖系数。
21、本专利技术还提供了一种银缕梅的组培快繁方法,以带隐芽茎段为外植体进行组织培养,本专利技术首次建立了完整的珍稀濒危植物银缕梅离体再生繁育技术体系,即以野外播种1~3年的实生苗新生枝条上带隐芽茎段为外植体,本专利技术通过诱导侧芽萌发、侧芽增殖、生根培养四个阶段的培养技术及培养基配方的筛选,建立了一套银缕梅茎段再生技术体系,诱导培养的茎段污染率低,茎段成活率高达到78%~83%,茎段褐化率低只有7%~16%;茎段的侧芽诱导率即萌芽率最高达到91%,侧芽增殖系数高达4.17,生根率达到60%;将生根良好的试管苗进行移栽,移栽成活率达95%以上。
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1.一种用于培养银缕梅的组培快繁培养基,其特征在于,所述组培快繁培养基包括诱导培养基、增殖培养基和生根培养基;
2.根据权利要求1所述的组培快繁培养基,其特征在于,所述生根培养基还包括0.11~0.4mg/L NAA。
3.一种银缕梅的组培快繁方法,其特征在于,采用权利要求1或2所述的组培快繁培养基,包括以下步骤:
4.根据权利要求3所述的组培快繁方法,其特征在于,所述茎段在接种前还包括消毒,所述消毒包括先用体积浓度75%乙醇浸泡30~40s,无菌水冲洗3~4次,再用有效氯含量0.26%~0.52%的次氯酸钠溶液浸泡5~10min,无菌水冲洗5~6次。
5.根据权利要求3所述的组培快繁方法,其特征在于,所述诱导培养、增殖培养和生根培养的温度分别为23~27℃。
6.根据权利要求3所述的组培快繁方法,其特征在于,所述诱导培养为先进行暗培养再进行光照培养;所述增殖培养和生根培养分别为光照培养。
7.根据权利要求6所述的组培快繁方法,其特征在于,所述光照培养中的光照时间分别为12~16h/d;光照的强度分别为220
8.根据权利要求3或6所述的组培快繁方法,其特征在于,所述诱导培养的时间为28~32d,诱导培养中的暗培养的时间为2~4d,光照培养的时间为26~28d;所述增殖培养的时间为28~35d;所述生根培养的时间为28~33d。
9.根据权利要求3或6所述的组培快繁方法,其特征在于,所述带侧芽的茎段进行增殖培养前,还包括:将所述带侧芽的茎段进行短期继代培养。
10.根据权利要求3所述的组培快繁方法,其特征在于,所述带隐芽茎段的长度为1.5~2.0cm。
...【技术特征摘要】
1.一种用于培养银缕梅的组培快繁培养基,其特征在于,所述组培快繁培养基包括诱导培养基、增殖培养基和生根培养基;
2.根据权利要求1所述的组培快繁培养基,其特征在于,所述生根培养基还包括0.11~0.4mg/l naa。
3.一种银缕梅的组培快繁方法,其特征在于,采用权利要求1或2所述的组培快繁培养基,包括以下步骤:
4.根据权利要求3所述的组培快繁方法,其特征在于,所述茎段在接种前还包括消毒,所述消毒包括先用体积浓度75%乙醇浸泡30~40s,无菌水冲洗3~4次,再用有效氯含量0.26%~0.52%的次氯酸钠溶液浸泡5~10min,无菌水冲洗5~6次。
5.根据权利要求3所述的组培快繁方法,其特征在于,所述诱导培养、增殖培养和生根培养的温度分别为23~27℃。
6.根据权利要求3所述的组培快繁方法,其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员:张靓靓,汪贤挺,杨海芸,郎泽东,孙露露,茹文龙,
申请(专利权)人:浙江农林大学,
类型:发明
国别省市:
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