【技术实现步骤摘要】
本公开属于用于治疗各种癌症的纳米颗粒领域，其中所述纳米颗粒包含聚合物核心，进一步包含一种或多种导向分子(即靶向分子)和/或一种或多种治疗分子。本文提供了用于合成此类纳米颗粒的改进方法。
技术介绍
1、治疗许多脑部疾病(例如脑癌和脑转移)需要将治疗分子递送到脑部。直接向大脑递送治疗剂对受试者构成严重风险(例如，破坏颅骨)，并且不能像大多数化疗治疗所要求的那样持续进行。然而，由于血脑屏障(bbb，这是一层排列在大脑血管内的紧密连接的内皮细胞)的存在，全身递送(例如，通过血液)不能有效地将分子递送到大脑。在某些实体瘤中存在类似的渗透屏障，称为血肿瘤屏障(btb)。
2、乳腺癌经常转移到脑部，如果治疗剂可以以足够的浓度递送至脑部，则这些脑转移瘤可以用用于治疗乳腺癌的化疗分子进行治疗。一种这样的化学治疗剂是喜树碱(抑制dna拓扑异构酶i的生物碱)，从而阻止细胞分裂。由于喜树碱在水性环境如细胞质中的溶解度问题，已开发出具有更大溶解度的喜树碱衍生物。一种这样的衍生物是7-乙基-10-羟基-喜树碱(sn38)，它最初是作为喜树碱类似物伊立替康的代谢物被发现的。
3、为了解决跨bbb和btb递送治疗剂的问题，已经开发了含有化学治疗分子和导向(即靶向)分子的纳米颗粒，其中导向分子与存在于脑内皮细胞(和肿瘤脉管系统的内皮细胞)表面上的转铁蛋白受体结合，这使得纳米颗粒能够通过胞吞作用穿过内皮细胞。参见例如美国专利号9,468,681；10,166,291和10,182,986。出于所有目的，或者至少出于它们对纳米颗粒的性质、它们
4、合成此类纳米颗粒的某些步骤是(1)将粘酸转化为能够聚合的反应性衍生物(即“粘酸单体”或mam)，(2)将粘酸单体聚合形成粘酸聚合物(map)，(3)将治疗分子转化为选择性反应性衍生物，和(4)将一种或多种衍生的治疗分子与map相连。
5、已经描述了能够穿过血脑屏障和血肿瘤屏障的含有喜树碱(cpt)的纳米颗粒。参见例如美国专利号9,446,149；9,468,681；10,166,291和美国专利申请公开号2019/0381188(2019年12月19日)；出于所有目的或至少出于纳米颗粒的描述，这些专利中的每一个都通过引用并入本文。然而，用于制备此类纳米颗粒的现有方法是试剂和时间密集型的，需要升高的温度，并且产率低。此外，如上所述，在水性条件下溶解度更高的cpt衍生物将是优选的。因此，需要用于合成含有化学治疗剂如cpt及其衍生物如sn38的纳米颗粒的改进方法，其中所述方法是快速的，就反应物而言经济，并且提供高产率。
6、此外，非中枢神经系统恶性肿瘤(如非中枢神经系统肿瘤和血液系统恶性肿瘤)的治疗将受益于改进的化疗药物递送载体。
技术实现思路
1、本文提供了用于合成治疗性纳米颗粒的改进方法，该治疗性纳米颗粒包含粘酸-聚乙二醇(peg)聚合物和化疗药物，例如喜树碱(cpt)及其衍生物和代谢物，例如7-乙基-10-羟基-喜树碱(sn38)。这些改进尤其包括新的中间体、更稳定的反应物的使用、更稳定的中间体的形成、更快速的反应时间、更高的中间体和产物产率，以及用于将靶向(导向)分子和治疗分子(例如，大分子治疗剂；例如，抗体)与纳米颗粒偶联的新连接基。还提供了用于本文所述方法的衍生的纳米颗粒(例如，含有偶联的cpt或sn38分子)；用于组装治疗性纳米颗粒的粘酸聚合物(map)缀合物(例如，与cpt、sn38、转铁蛋白和/或曲妥珠单抗偶联的map)也是如此。
2、因此，本文特别提供以下实施方案：
3、1.由粘酸二氨基氯化物合成粘酸二(天冬氨酰胺)二-三氟乙酸盐的方法，该方法包括：
4、(a)将具有以下结构的粘酸二氨基氯化物：
5、
6、转化为具有以下结构的粘酸二(天冬氨酰(o-叔丁基)-boc)：
7、和
8、(b)将粘酸二(天冬氨酰(o-叔丁基)-boc)转化为具有以下结构的粘酸二(天冬氨酰胺)二-三氟乙酸盐：
9、
10、2.实施方案1的方法，其中，在步骤(b)中：
11、(a)将粘酸二(天冬氨酰(o-叔丁基)-boc)转化为具有以下结构的粘酸二(天冬氨酰胺)中性物质：
12、和
13、(b)将粘酸二(天冬氨酰胺)中性物质转化为粘酸二(天冬氨酰胺)二-三氟乙酸盐。
14、3.合成粘酸二(天冬氨酰胺)二-三氟乙酸盐的方法，该方法包括将具有以下结构的粘酸二(天冬氨酰胺)中性物质：
15、
16、转化为具有以下结构的粘酸二(天冬氨酰胺)二-三氟乙酸盐：
17、
18、4.具有以下结构的粘酸二(天冬氨酰胺)中性物质：
19、
20、5.合成sn38的10-tbdps衍生物的方法，该方法包括在碱(例如胺碱，例如三烷基胺，例如三乙胺)和溶剂(例如二氯甲烷(dcm))中加热sn38和叔丁基二苯基氯硅烷(tbdpscl)的混合物，其中该产物具有以下结构：
21、
22、在某些实施方案中，将该混合物加热到15℃至90℃范围内的温度，持续5分钟至48小时范围内的时间。在另外的实施方案中，在反应结束时，将该反应混合物依次用稀酸(例如，0.2n hcl)、弱碱(例如，饱和的nahco3)和盐水洗涤。在进一步的实施方案中，将中和的溶液干燥(例如，用mgso4)。在另外的实施方案中，在真空下蒸发该干燥的溶液，得到固体。在进一步的实施方案中，将该固体重结晶；例如，通过溶解残余物(例如，在dcm中)和沉淀产物(例如，用己烷)。
23、在另外的实施方案中，将具有20-oh基团和/或10-oh基团的sn38或cpt的衍生物或类似物代替sn38用作起始物料。
24、上述实施方案的组合也被认为是本文公开的本专利技术的附加实施方案。
25、6.合成sn38的20-boc-氨基酰基-10-tbdps衍生物的方法，该方法包括在溶剂、碱和偶联剂的存在下将10-tbdps-sn38与boc-氨基酸-oh混合。在某些实施方案中，将反应物在溶剂(例如，dcm)和/或偶联剂(例如，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edc.hcl))和/或碱(例如，4-二甲基氨基吡啶(dmap))中混合。在某些实施方案中，将该反应在0℃至20℃或其间的任何整数或小数值的温度下进行。
26、7.实施方案6的方法，其中该氨基酸选自甘氨酸(gly)、缬氨酸(val)、γ-氨基丁酸(gaba)和己酸(hex)。
27、8.具有以下结构的20-(boc-gly)-10-tbdps-sn38：
28、
29、9.具有以下结构的20-(boc-gaba)-10-tbdps-sn38：
30、
31本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.具有以下结构的7-乙基-10-羟基-喜树碱(SN38)的20-(Boc-氨基酰基)、10-TBDPS衍生物(20-(Boc-氨基酰基)-10-TBDPS-SN38)：
2.权利要求1的SN38的20-(Boc-氨基酰基)-10-TBDPS衍生物，其中该氨基酸官能团为选自甘氨酸、缬氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)和己酸的官能团。
3.具有以下结构的SN38的20-(Boc-氨基酰基)-10-OBoc衍生物(20-(Boc-氨基酰基)-10-OBoc-SN38)：
4.权利要求3的SN38的20-(Boc-氨基酰基)-10-OBoc衍生物，其中该氨基酸官能团为选自甘氨酸、丙氨酸、β-丙氨酸、缬氨酸和亮氨酸的官能团。
5.具有以下结构的SN38的20-氨基酰基衍生物的HCl盐(20-(HCl.氨基酰基)-SN38)：
6.权利要求5的HCl盐，其中该氨基酸官能团为选自甘氨酸和缬氨酸的官能团。
7.具有以下结构的SN38的20-氨基酰基衍生物的三氟乙酸(TFA)盐(20-(TFA.氨基酰基)-SN38)：
<...【技术特征摘要】
1.具有以下结构的7-乙基-10-羟基-喜树碱(sn38)的20-(boc-氨基酰基)、10-tbdps衍生物(20-(boc-氨基酰基)-10-tbdps-sn38)：
2.权利要求1的sn38的20-(boc-氨基酰基)-10-tbdps衍生物，其中该氨基酸官能团为选自甘氨酸、缬氨酸、γ-氨基丁酸(gaba)和己酸的官能团。
3.具有以下结构的sn38的20-(boc-氨基酰基)-10-oboc衍生物(20-(boc-氨基酰基)-10-oboc-sn38)：
4.权利要求3的sn38的20-(boc-氨基酰基)-10-oboc衍生物，其中该氨基酸官能团为选自甘氨酸、丙氨酸、β-丙氨酸、缬氨酸和亮氨酸的官能团。
5.具有以下结构的sn38的20-氨基酰基衍生物的hcl盐(20-(hcl.氨基酰基)-sn38)：
6.权利要求5的hcl盐，其中该氨基酸官能团为选自甘氨酸和缬氨酸的官能团。
7.具有以下结构的sn38的20-氨基酰基衍生物的三氟乙酸(tfa)盐(20-(tfa.氨基酰基)-sn38)：
8.权利要求7的tfa盐，其中该氨基酸官能团为选自甘氨酸、丙氨酸、β-丙氨酸、缬氨酸、gaba、己...
【专利技术属性】
技术研发人员：E·A·怀亚特，C·M·布鲁门尼尔德，R·J·拉姆，
申请(专利权)人：艾达奈特公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。