【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药，尤其是一种深共晶溶剂及其制备方法与应用。
技术介绍
1、砂仁是姜科植物砂仁的干燥成熟果实，原产于东南亚地区。凭借其独特而诱人的香气，被广泛应用于食品中，它不仅能显著提升菜肴的香气，还具有卓越的食疗功效。作为一种传统的药用食材，砂仁还具有显著的抗炎、抗氧化和抗菌活性，广泛用于治疗各种胃肠道疾病。
2、砂仁的品种众多，其中以阳春砂和绿壳砂在市场上最为流行，而尤以广东省阳春市种植的阳春砂最为著名。然而，无论是新鲜砂仁还是加工后的砂仁，在外观上都极为相似，这在一定程度上造成了市场上砂仁品种混杂、质量等级不一的现象。
3、现阶段，为了区分砂仁品种，多数研究主要着眼于分析其挥发性萜类化合物，尤其是乙酸龙脑酯和樟脑的含量。然而，砂仁不仅含有丰富的挥发油，还包括其他重要化合物，如槲皮素和表儿茶素。药理学研究进一步表明，砂仁中的总黄酮对mfc胃癌细胞的增殖具有显著的抑制作用。因此，若单凭挥发性成分来区分砂仁的品种和质量，可能会忽略其他有价值的活性成分，导致砂仁资源的浪费。
4、近年来，传统有机溶剂对环境的危害日益凸显，促使人们广泛关注环保化学溶剂的发展。天然深共晶溶剂(nades)是传统试剂的替代品，于2011年首次作为深共晶溶液的衍生物提出。nades是羧酸、多元醇、糖、胆碱盐和氨基酸等天然代谢物的混合物，具有低毒性、可降解性和生物相容性。这些组分充当氢键供体(hbd)和受体(hba)。nades的不同组成导致其物理化学性质(极性、密度和ph值)存在差异，使其适用于提取具有不同性质的溶质。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种深共晶溶剂。
2、本专利技术所要解决的另一技术问题在于提供上述深共晶溶剂的制备方法。
3、本专利技术所要解决的另一技术问题在于提供上述深共晶溶剂的应用。
4、本专利技术采用的技术方案是：
5、一种深共晶溶剂，有效成分由氯化胆碱与乙二醇组成，所述氯化胆碱与乙二醇的摩尔比为1∶4，有效成分含水量30％(v/v)。
6、上述深共晶溶剂的制备方法，具体步骤如下：氯化胆碱与甘油按照摩尔比1∶4加入样品瓶，使用玻璃棒搅匀，设置水浴温度为80℃，磁力搅拌直至形成均匀透明液体后，加入30％(v/v)超纯水，混匀后得到。
7、上述深共晶溶剂在提取砂仁总黄酮中的应用。
8、优选的，上述深共晶溶剂的应用，具体提取方法如下：
9、(1)将砂仁药材粉末按照料液比为1∶20、在60℃的水浴中提取30分钟得到混合溶液；
10、(2)将混合溶液在14000rpm下离心10分钟，收集上清液。
11、上清液用于砂仁总黄酮含量测定。
12、优选的，上述深共晶溶剂的应用，上清液中成分为砂仁总黄酮。
13、优选的，上述深共晶溶剂的应用，所述砂仁总黄酮的鉴别步骤如下：使用uhplc-orbitrap exploris ms(thermo fisher scientific股份有限公、司，waltham，ma，usa)，对砂仁中的黄酮类化合物进行了鉴定；色谱分离在thermohypersil gold柱(2.1×100mm，1.9um，thermo fisher，美国)上以0.3ml/min的流速和35℃的温度进行；流动相a为0.1％甲酸水溶液，流动相b为乙腈，溶剂梯度如下：0-3min，3-12％b；3-14min，12％-13％b；14-17min，13-20％b；17-25min，20-35％b；25-30min，35-75％b；30-38min，75-80％b；38-40min，80-95％b；40-45min，95％b；所有样品的进样体积为3ul；分别进行全ms/dd-ms2扫描，质量范围为100-1500m/z，负离子模式下的通用参数设置如下：喷雾电压3.0kv，毛细管温度320℃，气体加热器温度350℃，归一化碰撞能量为20v、40v和60v。
14、优选的，上述深共晶溶剂的应用，对上述鉴别出的砂仁黄酮类化合物通过定量实验确定可以区分砂仁品种的化学成分作为辨别砂仁品种(阳春砂与绿壳砂)的差异标志物，具体步骤如下：
15、(1)对砂仁黄酮类成分定性完成后，区分砂仁品种的差异标志物，为了定量主要黄酮类化合物，使用uhplc-qqq-ms分析样品，色谱分离在thermohypersil gold柱(2.1×100mm，1.9μm，thermo fisher，美国)上以0.3ml/min的流速和35℃的温度进行；流动相a为0.1％甲酸水溶液，流动相b为乙腈，溶剂梯度如下：0-1min，3-9％b；1-8min，9-9％b；8-12min，9-20％b；12-16min，20-22％b；16-18min，22-50％b；18-19min，50-95％b；19-22min，95％b；22-23min，95-3％b，22-23min，3-3％b；所有样品的注射体积为3μl；采用多反应监测(mrm)优化锥电压和碰撞能量的参数，而负离子模式下的通用参数设置如下：毛细管电压2.0kv，去溶剂化气体温度350℃，雾化气体流量3.0l/min，干燥气体流量4.0l/min；
16、(2)定量结束后，将每个砂仁样品中黄酮类化合物的含量数据导入simca14.1软件进行无监督pca分析，鉴定出区分砂仁品种的差异标志物。
17、优选的，上述深共晶溶剂的应用，所述差异标志物为表儿茶素、原花青素b2和原花青素b4。
18、一种通过上述应用方法获得的砂仁总黄酮提取物。
19、上述砂仁总黄酮提取物在制备抗氧化活性产物方面的应用。
20、本专利技术的有益效果是：
21、上述深共晶溶剂为天然深共晶溶剂(nades)，可代替有机溶剂从砂仁中提取总黄酮。所述深共晶溶剂是以总黄酮含量为评价指标，利用响应面优化法，优化出砂仁总黄酮最佳提取条件为：含水量30％，氯化胆碱-乙二醇为溶剂，摩尔比为1∶4，料液比为1∶30g/ml，提取温度为73℃，提取时间为47分钟，提取率为41.38±1.01mg re/g，远高于传统乙醇提取量(17.48±1.23mg re/g)。在此条件下，提取并纯化了18批不同来源的阳春砂(amv)和绿壳砂(amvx)。lc-ms共鉴定出26种黄酮类化合物，黄烷-3-醇是砂仁中的主要黄酮类化合物，其中19种通过uhplc-qqq-ms定量，通过比较分析，表儿茶素、原花青素b2和原花青素b4被确定为amv和amvx差异标志物，通过建立砂仁差异标志物，为进一步辨别砂仁品种、衡量砂仁质量，有选择性的选择砂仁品种，实现砂仁资源的合理应用，规范砂仁市场，提供了理论依据。最后，采用流式细胞荧光技术测定了三种差异标志物的抗氧化活性，结果表明三种差异标志物具有很强的抗氧化活性，它们通过清除细胞内ros和上本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种深共晶溶剂，其特征在于：有效成分由氯化胆碱与乙二醇组成，所述氯化胆碱与乙二醇的摩尔比为1∶4，有效成分含水量30％。
2.权利要求1所述深共晶溶剂的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：氯化胆碱与甘油按照摩尔比1∶4加入样品瓶，使用玻璃棒搅匀，设置水浴温度为80℃，磁力搅拌直至形成均匀透明液体后，加入30％超纯水，混匀后得到。
3.权利要求1所述深共晶溶剂在提取砂仁总黄酮中的应用。
4.根据权利要求3所述的深共晶溶剂的应用，其特征在于：具体提取方法如下：
5.根据权利要求4所述的深共晶溶剂的应用，其特征在于：上清液中成分为砂仁总黄酮。
6.根据权利要求3所述的深共晶溶剂的应用，其特征在于：所述砂仁总黄酮的鉴别步骤如下：使用UHPLC-Orbitrap Exploris MS对砂仁中的黄酮类化合物进行鉴定；色谱分离在ThermoHypersil GOLD柱上以0.3mL/min的流速和35℃的温度进行；流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈，溶剂梯度如下：0-3min，3-12％B；3-14min，12％-13
7.根据权利要求6所述的深共晶溶剂的应用，其特征在于：对鉴别出的砂仁黄酮类化合物通过定量实验确定可以区分砂仁品种的化学成分作为辨别砂仁品种的差异标志物，具体步骤如下：
8.根据权利要求7所述的深共晶溶剂的应用，其特征在于：所述差异标志物为表儿茶素、原花青素B2和原花青素B4。
9.一种通过权利要求3-8之一所述应用方法获得的砂仁总黄酮提取物。
10.权利要求9所述砂仁总黄酮提取物在制备抗氧化活性产物方面的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种深共晶溶剂，其特征在于：有效成分由氯化胆碱与乙二醇组成，所述氯化胆碱与乙二醇的摩尔比为1∶4，有效成分含水量30％。
2.权利要求1所述深共晶溶剂的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：氯化胆碱与甘油按照摩尔比1∶4加入样品瓶，使用玻璃棒搅匀，设置水浴温度为80℃，磁力搅拌直至形成均匀透明液体后，加入30％超纯水，混匀后得到。
3.权利要求1所述深共晶溶剂在提取砂仁总黄酮中的应用。
4.根据权利要求3所述的深共晶溶剂的应用，其特征在于：具体提取方法如下：
5.根据权利要求4所述的深共晶溶剂的应用，其特征在于：上清液中成分为砂仁总黄酮。
6.根据权利要求3所述的深共晶溶剂的应用，其特征在于：所述砂仁总黄酮的鉴别步骤如下：使用uhplc-orbitrap exploris ms对砂仁中的黄酮类化合物进行鉴定；色谱分离在thermohypersil gold柱上以0.3ml/min的流速和35℃的温度进行；流动相a为0.1％甲酸水溶液，流动相b为乙腈，溶剂梯度如下：0-3mi...
【专利技术属性】
技术研发人员：姜苗苗，苏梅，王跃飞，樊官伟，于海洋，任明，
申请(专利权)人：天津中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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