【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，具体而言涉及一种减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂及其制备方法和应用。
技术介绍
1、烟田杂草阻碍烟草正常成长，增加烟田生产管理的成本，降低烟草的产量和质量。南方烟区以轮作为主，田间除草主要采用化学防除，省时省力且成本低。然而烟草对除草剂较为敏感，除草剂的不科学使用极易带来药害隐患。
2、烟田除草剂药害包括除草剂不当使用造成的当季药害、前茬作物化学防除造成的残留药害，以及周围田块液体除草剂喷施过程中形成的雾滴漂移药害。除草剂药害导致烟草植株矮化、发育迟缓、生长畸形、老叶黄化等，且药害逐年加重。除草剂药害问题严重制约烟草的健康生长，威胁烟草产业的生产安全与质量安全。
3、除草剂土壤残留修复技术主要有物理、化学、生物三类，包括土壤翻耕、灌水-排水、酸碱中和、动物植物修复、使用土壤改良剂、喷施生长调节素、施用除草剂安全剂、采用微生物防治手段等。其中，物理方法耗时、耗力、耗资，化学方法处理不当易造成二次污染。
4、微生物方法因其经济、安全、高效、不易造成二次污染等特点，是当下较为流行的修复措施。自然界微生物数量巨大、种类繁多、繁殖迅速、对环境适应性强，研究人员筛选特定的降解微生物，降解除草剂，消除除草剂残留药害。然而除草剂种类繁多，土壤中转化过程复杂，部分中间产物和除草剂残留物一样，对作物具有抑制作用；筛选特定除草剂降解菌株因为需要针对靶标除草剂及其中间产物进行专门的筛选，过程耗时长，效率差。
5、因此，如何提供一种新型、高效、绿色环保的减缓烟草除草剂药害的生物防治手段，
6、本专利技术公开一种减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂及其使用方法，可不差别应对各种除草剂药害，且不需要特别手段针对靶标除草剂及其中间产物进行专门的筛选，且使用方便、成本低。本专利技术的特点在于优选对烟草根系和植株发育具有促进作用的有益微生物菌株；通过特殊的载体配方，应用常规的微生物菌剂生产手段-挤压造粒技术制备成微生物菌剂；菌剂在烟苗移栽前使用，通过将菌剂颗粒施用在种植穴和种植行里，烟草幼苗移栽在菌剂上面，菌剂及其载体，在烟苗根系和土壤之间营造了物理隔离屏障，避免和极大的减少了根系与含除草剂残留土壤的直接接触，从而直接减少了除草剂对烟苗根系的毒害作用，同时通过载体的优良吸附能力将复合微生物菌液有效吸附于烟苗根系周围，有效提高了功能微生物的载量、生物活性好、稳定不易流失且作用时间长；通过功能微生物的促生作用，刺激植物体内生长调节素的生成，促进根系发育，增强根系活力，改善烟株抗性，提升烟草产量与质量。温室盆栽与田间试验结果表明，应用本专利技术可有效提高烟株在除草剂残留田块的长势，早生快发，应用前景广阔。
技术实现思路
1、解决的技术问题：由于除草剂降解菌剂筛选时间长、效率低，且不同种类的除草剂需要针对靶标除草剂及其中间产物进行专门筛选，因此除草剂降解菌剂的应用受限。本专利技术提供一种减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂及其制备方法和应用，且其技术切入点和途径完全不同于目前消除除草剂药害的研究方向和途径。
2、技术方案：一种减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂，所述菌剂由植物促生菌菌液复合于载体上而得，所述植物促生菌包括石蜡节杆菌(arthrobacter paraffineus)、蜡状芽孢杆菌(bacillus cereus)和地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)。
3、上述石蜡节杆菌(arthrobacter paraffineus)的保藏编号为cgmcc no.1.1464，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心。
4、上述蜡状芽孢杆菌(bacillus cereus)的保藏编号为accc 10611，购于中国农业微生物菌种保藏管理中心。
5、上述地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)的保藏编号为cfcc 1222，购于中国林业微生物菌种保藏管理中心。
6、上述载体原料为琼脂粉、活性炭和蛭石。
7、上述菌剂的制备方法，包括以下步骤：1)复合微生物菌液的制备；2)微生物菌剂载体的制备；3)复合微生物菌液、琼脂粉、活性炭和蛭石按液固比1l:5g:25kg:1kg进行组合。
8、上述复合微生物菌液的制备步骤为1)将石蜡节杆菌(arthrobacterparaffineus)活化后，接种到营养肉汁培养基中，在30-35℃150-200rpm条件下震荡培养至对数生长期，获得石蜡节杆菌种子液；将上述种子液进行扩大培养，按体积比10％的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃150-200rpm条件下培养45-50h，获得发酵液，发酵液中石蜡节杆菌的含量大于1.0×109cfu/ml；2)将蜡状芽孢杆菌(bacillus cereus)活化后，接种到营养肉汁培养基中，在30-35℃150-200rpm条件下震荡培养至对数生长期，获得蜡状芽孢杆菌种子液；将上述种子液按体积比10％的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃150-200rpm条件下培养45-50h，获得发酵液，发酵液中蜡状芽孢杆菌的含量大于1.0×109cfu/ml；3)将地衣芽孢杆菌活化后，接种到营养肉汁培养基中，在30-35℃150-200rpm条件下震荡培养至对数生长期，获得地衣芽孢杆菌种子液；将上述种子液按体积比10％的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃150-200rpm条件下培养45-50h，获得发酵液，发酵液中地衣芽孢杆菌的含量大于1.0×109cfu/ml；4)将上述三种菌液调整至相同浓度后，按液体体积比1:1:1混合，得到复合微生物菌液。
9、上述营养肉汁培养基的组成为：蛋白胨10.0g，牛肉浸取物3.0g，蒸馏水1.0l，ph调至7.0，蒸汽高温121℃灭菌30min。
10、上述步骤(3)操作步骤为：将复合微生物菌液、琼脂粉、活性炭和蛭石倒入搅拌器混合均匀，而后用挤压造粒机挤压成菌剂颗粒。
11、上述菌剂的应用，按照每亩10kg的用量，菌剂颗粒放在烟草种植穴或者种植行里，随后在菌剂颗粒上面放入烟草幼苗，田间栽培管理按当地生产规范化要求进行。
12、有益效果：(1)本专利技术筛选石蜡节杆菌、蜡状芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌等比例混合组成复合微生物菌液，三者存在协同作用，对烟草具有显著促生作用；同时可有效改善烟株抗性，提升烟草产量与质量；三种功能微生物菌株均为细菌，培养方法和培养流程简单、繁殖速度快，对复杂环境耐受能力强，在实际土壤根际环境中适应性好。
13、(2)本专利技术微生物菌剂载体原料为琼脂粉、活性炭和蛭石。活性炭的发达孔隙结构与较大表面积使其具有良好的吸附性能；琼脂粉是一种环境友好的多糖类物质，能吸收相当本身体积20倍的水；蛭石是一种天然、无机，无毒的矿物质，具有良好的离子交换能力；三者复合不仅造粒效果好，而且可为微生物在菌剂颗粒中存活和在土壤中的定殖提供有效的保障。菌剂施用于土壤后，一方面形成物理隔离屏障，避免和极大的减少根系本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂，其特征在于，所述菌剂由植物促生菌菌液复合于载体上而得，所述植物促生菌包括石蜡节杆菌（Arthrobacter paraffineus）、蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）和地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）。
2.根据权利要求1所述减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂，其特征在于，所述石蜡节杆菌（Arthrobacter paraffineus）的保藏编号为CGMCC No.1.1464，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心。
3.根据权利要求1所述减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂，其特征在于，所述蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）的保藏编号为ACCC 10611，购于中国农业微生物菌种保藏管理中心。
4.根据权利要求1所述减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂，其特征在于，所述地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）的保藏编号为CFCC 1222，购于中国林业微生物菌种保藏管理中心。
5.根据权利要求1所述减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂，其
6.权利要求1-5任一项所述菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）复合微生物菌液的制备；2）微生物菌剂载体的制备；3）复合微生物菌液、琼脂粉、活性炭和蛭石按液固比1L:5g:25kg:1kg进行组合 。
7.根据权利要求6所述菌剂的制备方法，其特征在于，所述复合微生物菌液的制备步骤为1）将石蜡节杆菌（Arthrobacter paraffineus）活化后，接种到营养肉汁培养基中，在30-35℃ 150-200rpm条件下震荡培养至对数生长期，获得石蜡节杆菌种子液；将上述种子液进行扩大培养，按体积比10%的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃ 150-200rpm条件下培养45-50h，获得发酵液，发酵液中石蜡节杆菌的含量大于1.0×109 cfu/mL；2）将蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）活化后，接种到营养肉汁培养基中，在30-35℃ 150-200rpm条件下震荡培养至对数生长期，获得蜡状芽孢杆菌种子液；将上述种子液按体积比10%的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃ 150-200rpm条件下培养45-50h，获得发酵液，发酵液中蜡状芽孢杆菌的含量大于1.0×109 cfu/mL；3）将地衣芽孢杆菌活化后，接种到营养肉汁培养基中，在30-35℃ 150-200rpm条件下震荡培养至对数生长期，获得地衣芽孢杆菌种子液；将上述种子液按体积比10%的接种量接种入发酵培养基中，在30-35℃ 150-200rpm条件下培养45-50h，获得发酵液，发酵液中地衣芽孢杆菌的含量大于1.0×109 cfu/mL；4）将上述三种菌液调整至相同浓度后，按液体体积比1:1:1混合，得到复合微生物菌液。
8.根据权利要求7所述菌剂的制备方法，其特征在于，所述营养肉汁培养基的组成为：蛋白胨10.0g，牛肉浸取物3.0g，蒸馏水1.0L，pH调至7 .0，蒸汽高温121℃灭菌30min。
9.根据权利要求6所述菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）操作步骤为：将复合微生物菌液、琼脂粉、活性炭和蛭石倒入搅拌器混合均匀，而后用挤压造粒机挤压成菌剂颗粒。
10.权利要求1-5任一项所述菌剂的应用，其特征在于，按照每亩10kg的用量，菌剂颗粒放在烟草种植穴或者种植行里，随后在菌剂颗粒上面放入烟草幼苗，田间栽培管理按当地生产规范化要求进行。
...【技术特征摘要】
1.一种减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂，其特征在于，所述菌剂由植物促生菌菌液复合于载体上而得，所述植物促生菌包括石蜡节杆菌（arthrobacter paraffineus）、蜡状芽孢杆菌（bacillus cereus）和地衣芽孢杆菌（bacillus licheniformis）。
2.根据权利要求1所述减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂，其特征在于，所述石蜡节杆菌（arthrobacter paraffineus）的保藏编号为cgmcc no.1.1464，购于中国普通微生物菌种保藏管理中心。
3.根据权利要求1所述减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂，其特征在于，所述蜡状芽孢杆菌（bacillus cereus）的保藏编号为accc 10611，购于中国农业微生物菌种保藏管理中心。
4.根据权利要求1所述减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂，其特征在于，所述地衣芽孢杆菌（bacillus licheniformis）的保藏编号为cfcc 1222，购于中国林业微生物菌种保藏管理中心。
5.根据权利要求1所述减缓烟草除草剂药害的微生物菌剂，其特征在于，所述载体原料为琼脂粉、活性炭和蛭石。
6.权利要求1-5任一项所述菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）复合微生物菌液的制备；2）微生物菌剂载体的制备；3）复合微生物菌液、琼脂粉、活性炭和蛭石按液固比1l:5g:25kg:1kg进行组合 。
7.根据权利要求6所述菌剂的制备方法，其特征在于，所述复合微生物菌液的制备步骤为1）将石蜡节杆菌（arthrobacter paraffineus）活化后，接种到营养肉汁培养基中，在30-35℃ 150-200rpm条件下震荡培养至对数生长期，获得石蜡节杆菌种子液...
【专利技术属性】
技术研发人员：王仕海，王忠宇，李长权，陈鹏，汤红印，吴伟，尚德双，朱广兵，刘文通，尚关兴，潘旭，王薇，王一明，
申请(专利权)人：贵州省烟草公司六盘水市公司，
类型：发明
国别省市：
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