【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及天然产物提取领域，具体涉及一种制备高品质青钱柳总三萜皂苷的方法。
技术介绍
1、青钱柳，胡桃科青钱柳属，是一种高大速生乔木，为我国特产。广泛分布于江西、浙江、江苏、安徽、福建、湖南、湖北、四川、贵州、云南等地。据《中国中药资源志要》记载，其树叶、树皮、树根可入药，性温，味辛微苦，具有清热消肿、解毒止痛的功能。长期以来，民间有传统取其叶制茶做饮料，有清热降暑、降血压、治疗高血压和糖尿病，以致延年益寿等功效，故又称其为甜茶树、神茶树、摇钱树。
2、青钱柳中最重要的天然活性成分是三萜类化合物，青钱柳中的三萜类化合物的种类繁多，包括三萜皂苷以及三萜酸类。
3、青钱柳中的三萜皂苷，如青钱柳苷i(cyclocarioside i)、青钱柳苷ii(cyclocarioside ii)、青钱柳苷iii(cyclocarioside iii)等，属于新型的天然甜味剂，能够满足高血糖患者对甜味的需求，而不加重病情，同时在降糖、降脂、降压方面具有很好的作用。
4、cn102432660a公开了一种青钱柳苷i的提取分离方法，方法是将青钱柳干燥叶粉碎，加生物酶酶解1-3天，酶解原料加8-12倍量60-90％乙醇溶液，在50-90℃的温度下浸泡提取1-3次，提取液浓缩至浸膏，加适量水分散后，加入水饱和正丁醇萃取2-4次，合并萃取液加丙酮沉淀，过滤，滤液浓缩干燥得到粗提物，加入适量乙酸乙酯和甲醇体系的有机溶剂回流提取，提取液浓缩，冷却，结晶，无水甲醇重结晶，得到青钱柳苷i。该方法涉及丙酮、正丁醇、乙酸乙酯易燃
5、cn109364119a公开了从青钱柳叶中制备具有降血糖作用的总三萜的方法及应用，是以青钱柳叶为原料，经乙醇水混合溶剂提取、有机溶剂液液萃取后、聚酰胺柱色谱有机溶剂洗脱、大孔树脂柱色谱乙醇水洗脱等步骤，得到青钱柳总三萜。该方法得到青钱柳总三萜的含量偏低，且大量使用了易燃易爆的有机溶剂，不适合工业化生产。
6、cn110917240a公开了一种从青钱柳中分离多种有效成分的连续化方法，步骤如下：以青钱柳干叶为原料，经碱水渗漉、离心、非极性大孔树脂吸附、洗脱、脱色等步骤得到含量为88％以上的青钱柳三萜皂苷；非极性大孔树脂柱流出液调节ph值至中性、中极性或极性大孔树脂吸附、洗脱、等步骤得到青钱柳黄酮；中极性或极性大孔树脂柱流出液经纳滤、脱色、减压浓缩等步骤，得到青钱柳多糖。该方法碱和酸的用量比较大，对青钱柳活性成分的破坏也比较强，造成不必要的损失。
7、cn112870254a公开了一种连续法从青钱柳中分离黄酮、皂苷和多糖的方法，步骤如下：以青钱柳干叶为原料，经酶解，高浓度低碳醇渗漉提取，陶瓷膜过滤，阴、阳离子交换树脂柱脱色、脱盐、聚酯酰胺树脂吸附黄酮，流出液浓缩干燥得到青钱柳皂苷含量达90％产品。该方法采用大量的高浓度低碳醇，不能进行溶剂的二次利用，生产成本高，且经聚酯酰胺树脂柱分离黄酮，得到的青钱柳皂苷产品塑化剂残留、溶剂残留不能保证。
8、目前市面上青钱柳提取物，往往带有一种令人不愉快的苦味和涩味，此外，为了彻底出去产品中农残、重金属痕量成分，往往使用脱农残专用树脂，或者金属螯合剂进行这些有害杂质的彻底去除，但是会导致青钱柳总三萜皂苷收率下降。需要因此开发一种制备青钱柳总三萜皂苷的方法，滋味好，甜味纯正，无农药、重金属、有机溶剂及塑化剂残留，且收率高的制备方法。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题在于提供一种制备高品质青钱柳总三萜皂苷的方法，滋味好的同时，将农药残留、重金属、有机溶剂及塑化除去，本专利技术方法工艺简单，产业化能力强，对于提高青钱柳总三萜皂苷产品质量、确保产品安全，青钱柳天然甜味剂资源的研究和应用具有极为重要的意义。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案如下：
2、一种制备青钱柳总三萜皂苷的方法，包括以下步骤：
3、(1)预处理：青钱柳干叶原料粉碎，过筛。
4、(2)青钱柳粗提物制备：向步骤(1)所得青钱柳原料中加入乙醇水溶液连续超声逆流提取，得到青钱柳提取液，提取液浓缩、干燥、粉碎、过筛，得到青钱柳粗提物。
5、(3)氧化铝拌样：将步骤(2)所得青钱柳粗提物采用乙醇分散、溶解成浸膏状，加入活化氧化铝颗粒，干燥，得拌样氧化铝。
6、(4)装柱：往层析柱筒体中先装入活化氧化铝颗粒，再装入步骤(3)所得拌样氧化铝，得活化氧化铝层析柱；
7、(5)氧化铝柱洗脱：用洗脱剂对氧化铝层析柱进行洗脱，收集目标洗脱流出液，浓缩、干燥，得到青钱柳总三萜皂苷纯化物。
8、(6)活性炭脱色：将步骤(5)中所得青钱柳总皂苷纯化物采用70％浓度的乙醇溶解成10％固形物浓度溶液，再加入活性炭，保温搅拌，趁热过滤，得滤液。
9、(7)结晶：步骤(6)中，所得滤液减压浓缩，于冷藏静置析晶，分离出结晶晶体，干燥后，得到纯度为80％以上的青钱柳总三萜皂苷。
10、优选地，在步骤(1)中，所述筛网目数为10-20目。
11、优选地，在步骤(2)中，所述在提取温度为30～60℃，超声功率为200-300w，频率为25-60khz下连续逆流超声提取1.5～4h，乙醇水溶液中醇浓度为50-80wt％。
12、优选地，在步骤(3)，步骤(4)中，所述活化氧化铝颗粒粒径为5-10μm；活化氧化铝颗粒是通过包括以下步骤的制备方法得到：
13、(s1)将有机铝(以al计)、正丁醇、乙醇、水、乙酰乙酸乙酯、聚多元醇按照摩尔比1：3-5：7-11：3-5：1-2：1-3混合，50-70℃搅拌，得到铝溶胶；
14、(s2)将氨水、乙醇、甲酰胺配制为氨浓度5-10wt％，乙醇浓度20-30wt％，甲酰胺浓度1-3wt％的溶液a；
15、(s3)将步骤(s1)所得铝溶胶和步骤(s2)所得溶液a按照体积1-1.5:1通过注射泵推入混合器混合，再将混合物通过针孔喷头挤入油相中形成凝胶小球；
16、(s4)凝胶小球经过老化、超临界流体干燥，煅烧得到活化氧化铝颗粒。
17、本专利技术通过上述制备方法得到的活化氧化铝颗粒，具有丰富的孔道结构，比表面积大。使用超临界干燥技术，避免了颗粒的团聚和孔道塌陷。专利技术人预料不到发现，以上述制备方法所得的活化氧化铝作为层析柱填料制备青钱柳总三萜皂苷，可以充分吸附农残和重金属，不需要阴阳离子交换树脂，或者脱农残专用树脂。所得产品农残，重金属基本除去，而且不影响收率。
18、进一步地，步骤(s1)中，所述有机铝选自异丙醇铝、仲丁醇铝中的至少一种，聚多元醇选自数均分子量500-1000的聚乙二醇，聚丙二醇中的至少一种。
19、进一步地，步骤(s4)中，老化是凝胶小球放置在乙醇中，每隔6-10h更换一次乙醇，持续24-48h；超临界干燥是以乙醇作为介质本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种制备青钱柳总三萜皂苷的方法的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述筛网目数为10-20目。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述在提取温度为30～60℃，超声功率为200-300W，频率为25-60kHz下连续逆流超声提取1.5～4h，乙醇水溶液中醇浓度为50-80wt％。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)，步骤(4)中，所述活化氧化铝颗粒粒径为5-10μm；活化氧化铝颗粒是通过包括以下步骤的制备方法得到：
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(S1)中，所述有机铝选自异丙醇铝、仲丁醇铝中的至少一种，聚多元醇选自数均分子量500-1000的聚乙二醇，聚丙二醇中的至少一种。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(S4)中，老化是凝胶小球放置在乙醇中，每隔6-10h更换一次乙醇，持续24-48h；超临界干燥是以乙醇作为介质，是体系温度为6-8MPa，压力为240-280℃，超临界
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，活化氧化铝颗粒用量为青钱柳粗提物重量1-2倍；步骤(4)中，活化氧化铝颗粒用量为青钱柳粗提物重量的5-8倍，氧化铝层析柱的高径比为8～20:1。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(5)中，所述洗脱剂为所述洗脱液为乙酸乙酯和乙醇的体积比为20/80～50/50的混合溶液，洗脱剂的用量为5～20BV，洗脱的流速为0.5～2BV/小时。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(6)中，所述活性炭用量为青钱柳目标洗脱液固形物重量的5-10％，保温温度为65-75℃，时间为2-4h。
10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(7)中，所述滤液减压浓缩至固形物浓度为15-25％，结晶温度为0-5℃，析晶时间为24-36h。
...【技术特征摘要】
1.一种制备青钱柳总三萜皂苷的方法的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述筛网目数为10-20目。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述在提取温度为30～60℃，超声功率为200-300w，频率为25-60khz下连续逆流超声提取1.5～4h，乙醇水溶液中醇浓度为50-80wt％。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)，步骤(4)中，所述活化氧化铝颗粒粒径为5-10μm；活化氧化铝颗粒是通过包括以下步骤的制备方法得到：
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(s1)中，所述有机铝选自异丙醇铝、仲丁醇铝中的至少一种，聚多元醇选自数均分子量500-1000的聚乙二醇，聚丙二醇中的至少一种。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(s4)中，老化是凝胶小球放置在乙醇中，每隔6-10h更换一次乙醇，持续24-48h；超临界干燥是以乙醇作为介质，是体系温度为6-8mpa...
【专利技术属性】
技术研发人员：唐美玉，李伟，黄华学，黄思睿，
申请(专利权)人：江西海富生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：
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