【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种用于产生微粒或纳米颗粒的连续方法。更具体地，本专利技术涉及一种用于产生微粒或纳米颗粒，尤其是脂质纳米颗粒(lnp)的连续方法。
技术介绍
1、微粒和纳米颗粒在生物医学、药学、医学、化妆品、化学工业、农业、兽医科学等领域具有重要的应用。
2、许多技术可用于制造微粒和纳米颗粒。此类技术包括从水性或非水性溶液中沉淀或共沉淀微溶产物、溶胶-凝胶处理以及使用微乳液。
3、国际专利申请号wo 2022/018441描述了利用膜乳化技术来制备脂质囊泡、脂质体或脂质纳米颗粒(lnp)的方法。
4、膜乳化技术通常在脂质囊泡和微粒以及纳米颗粒的制备中提供优势。
5、然而，用于制备微粒和纳米颗粒的大多数可商购获得的技术利用分批方法。分批方法是在操作期间没有材料进入或离开系统的方法。通常，材料留在系统中，材料积聚，并且反应容器必须在每批次之间清洁。
6、使用分批方法的示例包括在以下领域中使用；饮料加工、乳制品、药物制剂和肥皂制造。
7、分批方法的使用往往会限制制造的规模，并且是劳动密集型的。另外，由于批次的改变和批次之间的清洁，工厂通常将是闲置的。还可能难以保持产品的质量，因为从一个批次到另一个批次可能存在变化。
8、在生物技术中经常使用的补料分批方法的情况下，颗粒在过程中的停留时间也可能存在显著差异，从而导致质量差异。例如，切向流过滤经常在补料分批方法中操作。将产物逐渐引入循环回路并浓缩，然后进一步再循环，同时逐渐将渗滤缓冲液引入。显然，在开始时引入
9、因此，需要用于制造微粒和纳米颗粒的连续工艺技术。
技术实现思路
1、我们现在已经发现了通过使用膜乳化设备和技术制造微观颗粒例如微粒和纳米颗粒的新型连续方法。
2、因此，根据本专利技术的第一方面，提供了一种用于制备微观颗粒例如纳米颗粒或微粒的连续方法，所述方法包括以下步骤：
3、(i)控制向第一膜提供第一液相，该第一膜限定第一多个开孔；
4、(ii)控制经由该第一多个开孔向该第一膜提供第二液相以形成混合物；
5、(iii)控制向第二膜提供该混合物，该第二膜限定第二多个开孔；
6、(iv)控制经由该第二多个开孔向该第二膜提供ph缓冲液相以形成稳定化颗粒悬浮液；
7、任选地：
8、(v)浓缩该颗粒悬浮液并控制向第三膜提供该ph缓冲的混合物，该第三膜限定第三多个开孔；
9、(vi)控制经由该第三多个开孔向第三膜提供浓缩悬浮相以去除溶剂，并将颗粒交换到赋形剂缓冲液中；以及
10、(vii)控制向第四膜提供该稳定化混合物进行微滤，以分离该微观颗粒。
11、本领域技术人员将理解，步骤(v)和(vi)中的一者或多者可以是任选的。
12、本领域技术人员还将理解，可使用非缓冲溶液，因为大部分稳定化被认为来自乙醇稀释。
13、在步骤(v)中，颗粒悬浮液的浓缩可使用单程切向流过滤盒来实现，该过滤盒配备有尺寸适于保留颗粒的超滤或微滤膜。对于较大的微粒，可使用配备有包括开槽孔的膜的横向流设备(可获自micropore technologies limited(微孔技术有限公司))。在美国专利申请号us2009/211991中描述了此类开槽孔膜，该专利申请以引用方式并入本文。
14、通常，在本专利技术的连续方法中，可认为步骤的顺序包括：
15、·形成微观颗粒
16、·稀释/调节微观颗粒
17、·浓缩微观颗粒
18、·用渗滤缓冲液稀释微观颗粒
19、·浓缩
20、·用渗滤缓冲液稀释
21、可进一步重复这些步骤以获得期望的组合物，在浓缩或稀释后停止。
22、当本专利技术的连续方法涉及脂质囊泡，例如脂质或lnp时，混合物可包含脂质囊泡悬浮液。当本专利技术的连续方法涉及常规微粒时，混合物可包含乳液，例如固体在液体中的乳液或液体/液体乳液。
23、对于纳米颗粒，本专利技术的连续方法可包括任选的最终步骤，其包括在线无菌过滤以去除生物负荷。
24、在本专利技术的连续方法中，可包括任何数量的浓缩-稀释步骤。典型地，将存在至少2个浓缩-稀释步骤以便实现足够低的溶剂浓度，但这可以是3个或更多个。
25、对于连续方法，步骤(i)至(vii)可优选地在有或没有中间分离或纯化步骤的情况下顺序进行。此外，可使用中间保持容器、停留盘管、泵等。例如，如果溶剂扩散缓慢(例如通过低孔隙率的大颗粒)，则可能需要额外的停留时间。将工序分开还可允许使用更便宜的低压泵。
26、为避免疑义，术语“微观颗粒”应包括纳米颗粒、微粒、微球、微胶囊等。
27、膜中的每一者，例如第一膜、第二膜、第三膜和第四膜，可以相同或不同。通常，每个膜限定多个孔，并且可以是基本上管状或圆柱形的形状，并且可具有限定第一入口开孔和第二出口开孔的第一端部。因此，可相同或不同的每个膜可包括实验室分散池(laboratory dispersion cell，ldc)，其使用精密工程化的圆形膜，其中搅拌器用于生成液滴形成所需的剪切；或横向流设备
28、本领域技术人员将理解，在连续方法中使用的膜的数量可变化，尤其取决于被加工材料的性质等。通常，在本专利技术的连续方法中使用的膜的数量为约1至约4。为了最小化用于缓冲液交换/洗涤的溶液体积，可使用更多级，每个级具有更小体积的新鲜缓冲液。资本成本增加，但解决方案成本降低。例如，对于微粒，如果使用3级渗滤，每个级具有一个稀释膜和一个过滤膜，这将给出包括液滴生成膜的7个级。
29、对于管状或圆柱形膜中的每一者，膜的内径可变化。通常，膜的内径将相当小。
30、另选地，这些膜中的一者或多者，例如第一膜、第二膜、第三膜和第四膜中的一者或多者，可包括横向流膜设备根据本专利技术的一个方面，这些膜中的至少一者包括横向流设备根据本专利技术的另一方面，所有的膜均包括横向流设备横向流膜设备使用例如连续相的流动来清扫并均匀混合例如通过膜孔的分散相的流动。
31、应当理解，所使用的膜中的一些或全部可包括横向流膜。本专利技术的连续方法可使用混合式常规管状膜诸如实验室分散池(ldc)和横向流膜。在一个优选的实施方案中，在本专利技术的连续方法中使用的所有膜都包括横向流膜。
32、在本专利技术的一个方面，连续方法可包括制备微观脂质囊泡，例如脂质体或脂质颗粒，更具体地，脂质体或脂质纳米颗粒(lnp)。
33、脂质囊泡，例如lnp，特别适用于作为药物递送载体以及包封多种核酸(rna和dna)；因此，它们是最流行的非病毒基因递送系统，例如用于疫苗递送。
34、使用膜乳化技术制备脂质囊泡的方法描述于国际专利申请号wo 2022/018441中，该专利申请以引用方式并入本文。
35本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于制备微观颗粒例如纳米颗粒或微粒的连续方法，所述方法包括以下步骤
2.根据权利要求1所述的连续方法，其中所述微观颗粒是纳米颗粒。
3.根据权利要求1所述的连续方法，其中所述微观颗粒是微粒。
4.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中步骤(i)至(vii)在有或没有中间分离或纯化步骤的情况下顺序进行。
5.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中所述膜中的每一者能够相同或不同。
6.根据权利要求5所述的连续方法，其中能够相同或不同的所述膜中的每一者包括实验室分散池(LDC)或横向流设备
7.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中在所述连续方法中使用的膜的数量为约1至约4。
8.根据权利要求6所述的连续方法，其中所述膜中的至少一者包括横向流设备
9.根据权利要求8所述的连续方法，其中所述膜包括混合式常规管状膜和横向流膜。
10.根据权利要求8所述的连续方法，其中所有的所述膜均包括横向流设备
11.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中
12.根据权利要求1所述的连续方法，其中使用配备有包括开槽孔的膜的横向流设备(可获自微孔技术有限公司)。
13.根据权利要求1所述的连续方法，其中所述方法包括制备微观脂质囊泡。
14.根据权利要求13所述的连续方法，其中所述脂质囊泡包括脂质体。
15.根据权利要求13所述的连续方法，其中所述脂质囊泡包括脂质纳米颗粒(LNP)。
16.根据权利要求13所述的连续方法，其中所述方法包括制备微观脂质囊泡，所述微观脂质囊泡包含包封水性核的脂质双层。
17.根据权利要求15所述的连续方法，其中所述方法包括制备包含水性溶剂相核的LNP。
18.根据权利要求15所述的连续方法，其中所述方法包括制备包含非水性溶剂相核的LNP。
19.根据权利要求16所述的连续方法，其中所述水性核包含一种或多种活性剂。
20.根据权利要求13所述的连续方法，其中所述脂质囊泡在未负载的情况下产生并且之后负载(主动负载)。
21.根据权利要求13所述的连续方法，其中所述脂质囊泡在负载的情况下产生(被动负载)。
22.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中步骤(iv)包括通过控制向第二膜提供所述混合物并控制提供pH调节缓冲液以形成稳定化混合物来形成pH缓冲的混合物。
23.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中所述微观颗粒是包含化学或生物活性物质的微粒或纳米颗粒。
24.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中所述微观颗粒是固化颗粒，例如结晶颗粒。
25.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中包括一个或多个分析表征点。
26.根据权利要求25所述的连续方法，其中在所述连续方法的每个步骤或所述连续方法的每对步骤结束时或接近结束时包括分析表征点。
27.根据权利要求26所述的连续方法，其中在步骤(ii)、(iv)和(vi)中的一者或多者结束时或接近结束时包括分析表征点。
28.根据权利要求8所述的连续方法，所述连续方法包括至少一个横向流膜设备其中所述横向流乳化设备包括：
29.根据权利要求28所述的连续方法，其中所述横向流设备包括插入物，并且所述第一入口是连续相第一入口，并且所述第二入口是分散相入口；使得所述分散相从所述管状膜外部行进到内部。
30.根据权利要求28所述的连续方法，其中所述横向流设备不包括插入物，并且所述第一入口是分散相第一入口，并且所述第二入口是连续相入口；使得所述分散相从所述管状膜内部行进到外部。
31.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中所述分散相是脂质相，并且所述连续相是溶剂相。
32.根据权利要求1至30中任一项所述的连续方法，其中所述分散相是溶剂相，并且所述连续相是脂质相。
33.根据权利要求31或32所述的连续方法，其中所述溶剂相包含一种或多种活性剂。
34.根据权利要求28所述的连续方法，其中所述横向流设备包括插入物，并且其中所述插入物是锥形的，使得所述插入物与所述管状膜之间的间距能够沿所述膜的长度发散。
35.根据权利要求28所述的连续方法，其中所述横向流设备包括位于所述外部管状套筒内部的多于一个管状膜。
3...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于制备微观颗粒例如纳米颗粒或微粒的连续方法，所述方法包括以下步骤
2.根据权利要求1所述的连续方法，其中所述微观颗粒是纳米颗粒。
3.根据权利要求1所述的连续方法，其中所述微观颗粒是微粒。
4.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中步骤(i)至(vii)在有或没有中间分离或纯化步骤的情况下顺序进行。
5.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中所述膜中的每一者能够相同或不同。
6.根据权利要求5所述的连续方法，其中能够相同或不同的所述膜中的每一者包括实验室分散池(ldc)或横向流设备
7.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中在所述连续方法中使用的膜的数量为约1至约4。
8.根据权利要求6所述的连续方法，其中所述膜中的至少一者包括横向流设备
9.根据权利要求8所述的连续方法，其中所述膜包括混合式常规管状膜和横向流膜。
10.根据权利要求8所述的连续方法，其中所有的所述膜均包括横向流设备
11.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中在步骤(v)中，所述颗粒悬浮液的所述浓缩是使用单程切向流过滤盒来实现的，所述过滤盒配备有大小适于保留所述颗粒的超滤或微滤膜。
12.根据权利要求1所述的连续方法，其中使用配备有包括开槽孔的膜的横向流设备(可获自微孔技术有限公司)。
13.根据权利要求1所述的连续方法，其中所述方法包括制备微观脂质囊泡。
14.根据权利要求13所述的连续方法，其中所述脂质囊泡包括脂质体。
15.根据权利要求13所述的连续方法，其中所述脂质囊泡包括脂质纳米颗粒(lnp)。
16.根据权利要求13所述的连续方法，其中所述方法包括制备微观脂质囊泡，所述微观脂质囊泡包含包封水性核的脂质双层。
17.根据权利要求15所述的连续方法，其中所述方法包括制备包含水性溶剂相核的lnp。
18.根据权利要求15所述的连续方法，其中所述方法包括制备包含非水性溶剂相核的lnp。
19.根据权利要求16所述的连续方法，其中所述水性核包含一种或多种活性剂。
20.根据权利要求13所述的连续方法，其中所述脂质囊泡在未负载的情况下产生并且之后负载(主动负载)。
21.根据权利要求13所述的连续方法，其中所述脂质囊泡在负载的情况下产生(被动负载)。
22.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中步骤(iv)包括通过控制向第二膜提供所述混合物并控制提供ph调节缓冲液以形成稳定化混合物来形成ph缓冲的混合物。
23.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中所述微观颗粒是包含化学或生物活性物质的微粒或纳米颗粒。
24.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中所述微观颗粒是固化颗粒，例如结晶颗粒。
25.根据前述权利要求中任一项所述的连续方法，其中包括一个或多个分析表征点。
26.根据权利要求25所述的连续方法，其中在所述连续方法的每个步骤或所述连续方法的每对步骤结束时或接近结束时包括分析表征点。
27....
【专利技术属性】
技术研发人员：布鲁斯·威廉，大卫·海沃德，
申请(专利权)人：微孔技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。