【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于环境微生物，特别涉及一株耐盐反硝化细菌及其应用。
技术介绍
1、
2、对于高盐硝态氮废水目前工业上常采用离子交换、蒸发结晶、反渗透和催化还原等工艺进行处理，但这些方法存在污染转移和二次污染等问题，不能实现污染物的最终处置。生物脱氮与上述方法相比，具有运行成本低、高效稳定、不会造成二次污染等优势。
3、传统反硝化菌可以将废水中的no3--n还原为nxo和n2从废水中去除，在废水生物脱氮方面发挥着重要作用，但高盐环境的出现会导致其细胞渗透压急剧增加，影响细胞的正常结构，甚至导致微生物死亡，抑制其代谢能力及酶的活性，造成中间副产物的大量积累，生物脱氮效率大大降低，难以满足排放要求。因此，筛选耐盐的高效反硝化菌种是解决高盐废水反硝化脱氮的有效途径之一。
4、耐盐菌依靠吸k+排na+，胞内积累相容性溶质等耐盐调节机制平衡细胞内外渗透压，保持酶的活性，从而能够在高盐环境下完成生长代谢。研究表明利用耐盐反硝化菌进行生物脱氮，能够实现高盐环境中氮素的高效脱除。因此，对于高盐环境生物脱氮亟需开发具有优良的盐度耐受性的反硝化菌源。
5、以往的耐盐反硝化菌通常需要较高的生物量才能实现较好的硝酸盐去除效果。研究表明，对于150mg/l的硝酸盐，其生物量范围一般在0.51.5(od600)，这不仅增加了生物反应器的体积和运行成本，还会导致污泥产量增加，增加后续处理处置的负担。为此，需要开发新的反硝化菌源，以降低脱氮的生物量需求，减少生物反应器的体积，节省空间和建设成本，减少微生物的培养和维持成
技术实现思路
1、针对上述现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于提供了一株耐盐反硝化菌及其应用。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：
3、本专利技术的第一方面提供了一株耐盐反硝化菌，所述耐盐反硝化菌为stutzerimonas degradans，命名为stutzerimonas degradans bp，保藏编号为gdmcc no:64297，于2024年1月19日保藏于广东省微生物菌种保藏中心。
4、所述stutzerimonas degradans bp测定的16s rdna基因序列如seq id no.1所示。
5、本专利技术的第二方面提供了上述耐盐反硝化菌的培养方法，包括如下步骤：
6、s1、将耐盐菌纯菌单菌落接种于种子培养基中，好氧条件下进行扩培，控制培养温度30℃～35℃，130～150rpm震荡培养20～24h，以实现大量增殖，培养到对数期后期，将菌液离心后用pbs重悬，制备od600为1.8～2.2的菌悬液；
7、s2、采用反硝化培养基筛选反硝化菌，接种4.5％～5.5％菌悬液，控制初始od600为0.095～0.105，于30～38℃条件下进行厌氧静置培养2～4天。
8、优选地，所述种子液培养基组成：10g·l-1酵母浸粉、7.5g·l-1蛋白胨、20g·l-1mgso4·7h2o、3.42g·l-1c6h5na3o7·2h2o、2g·l-1kcl、0.05g·l-1feso4·7h2o、40g·l-1nacl。
9、优选地，所述反硝化培养基组成：1.08g·l-1kno3、4.1g·l-1ch3coona、6.26g·l-1k2hpo4·3h2o、1.24g·l-1kh2po4、0.2g·l-1mgso4、40g·l-1nacl。
10、本专利技术的第三方面提供了上述耐盐反硝化菌在盐度胁迫下反硝化脱氮的应用。
11、优选地，所述盐度的范围为0～6％，进一步优选为0～4％。
12、优选地，所述耐盐反硝化菌在盐度胁迫下反硝化脱氮的生物量od600为0.15～0.25。
13、本专利技术筛选得到的stutzerimonas degradans bp，其形态学特征是：固体培养48h时菌落为浅褐色，呈圆形，微隆起，表面光滑，边缘完整；革兰氏染色阴性；菌体呈杆状，两端钝圆,大小为(3μm～4μm)×(8μm～14μm)。其生理生化特征是：兼性厌氧，适宜盐度为0～6％。
14、与现有技术相比，本专利技术具备以下有益效果：
15、(1)本专利技术提供的stutzerimonas degradans bp具有较强的耐盐反硝化能力，可以高效去除高盐水体中的no3--n，且无副产物no2--n和nh4+-n的积累，不会造成二次污染；较小生物量(od600＝0.15～0.25)即可实现高效的耐盐反硝化脱氮，从而降低了工艺运行成本，提高了生物利用率，因此在高盐废水生物脱氮方面应用前景广阔。
16、(2)本专利技术提供的stutzerimonas degradans bp为兼性厌氧菌，在好氧条件下也能大量繁殖，为后续反硝化提供大量的生物储备，环境适应性强，适用于厌氧或缺氧环境下的生物脱氮。
17、(3)与传统的活性污泥法相比，利用本专利技术提供的stutzerimonas degradans bp进行生物脱氮处理还可以减少污泥的产生，有助于降低后续污泥处理和处置的成本。
18、保藏信息
19、保藏时间：2024年01月19日；
20、保藏单位：广东省微生物菌种保藏中心；
21、保藏编号：gdmcc no:64297；
22、保藏单位地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼 广东省科学院微生物研究所；
23、邮政编码：510070；
24、分类命名：pseudomonas phenolilytica。
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1.一株耐盐反硝化菌，其特征在于，所述耐盐反硝化菌为Stutzerimonas degradans，命名为Stutzerimonas degradans BP，保藏编号为GDMCC No.64297，于2024年1月19日保藏于广东省微生物菌种保藏中心。
2.一种如权利要求1所述的耐盐反硝化菌的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的耐盐反硝化菌的培养方法，其特征在于，所述种子液培养基组成：10g·L-1酵母浸粉、7.5g·L-1蛋白胨、20g·L-1MgSO4·7H2O、3.42g·L-1C6H5Na3O7·2H2O、2g·L-1KCl、0.05g·L-1FeSO4·7H2O、40g·L-1NaCl。
4.根据权利要求2所述的耐盐反硝化菌的培养方法，其特征在于，所述反硝化培养基组成：1.08g·L-1KNO3、4.1g·L-1CH3COONa、6.26g·L-1K2HPO4·3H2O、1.24g·L-1KH2PO4、0.2g·L-1MgSO4、40g·L-1NaCl。
5.如权利要求1所述的耐盐反硝化菌在盐度
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述盐度的范围为0～6％。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述耐盐反硝化菌在盐度胁迫下反硝化脱氮的生物量OD600为0.15～0.25。
...【技术特征摘要】
1.一株耐盐反硝化菌，其特征在于，所述耐盐反硝化菌为stutzerimonas degradans，命名为stutzerimonas degradans bp，保藏编号为gdmcc no.64297，于2024年1月19日保藏于广东省微生物菌种保藏中心。
2.一种如权利要求1所述的耐盐反硝化菌的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的耐盐反硝化菌的培养方法，其特征在于，所述种子液培养基组成：10g·l-1酵母浸粉、7.5g·l-1蛋白胨、20g·l-1mgso4·7h2o、3.42g·l-1c6h5na3o7·2h2o、2g·l-1kcl、0.05g·l-1feso...
【专利技术属性】
技术研发人员：王进，别绮雯，岳正波，牛彦杰，娄静雅，
申请(专利权)人：合肥工业大学，
类型：发明
国别省市：
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