System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种靶向IGFL3基因的sgRNA序列及其在提高胶质母细胞瘤放射敏感性中的应用制造技术_技高网

一种靶向IGFL3基因的sgRNA序列及其在提高胶质母细胞瘤放射敏感性中的应用制造技术

技术编号:44609283 阅读:3 留言:0更新日期:2025-03-14 13:01
本发明专利技术涉及一种靶向敲除IGFL3基因的sgRNA序列及其在提高胶质母细胞瘤放射敏感性中的应用,属于生物技术领域。所述sgRNA序列为IGFL3‑sgRNA‑1或IGFL3‑sgRNA‑3,利用该sgRNA构建了靶向敲除IGFL3基因的CRISPR/Cas9载体。将上述载体转染至人胶质母细胞瘤细胞U251中,经鉴定可在该细胞中高效敲除IGFL3基因,筛选获得2株IGFL3基因敲除的U251细胞系。通过靶向敲除IGFL3基因,可有效提高人胶质母细胞瘤细胞U251的放射敏感性,本发明专利技术为研究IGFL3基因在胶质母细胞瘤放射敏感性中的作用奠定了基础,也为开发该基因作为提高胶质母细胞瘤放射敏感性的潜在分子靶点提供了强有力的工具。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,具体涉及一种靶向igfl3基因的sgrna序列及其在提高胶质母细胞瘤放射敏感性中的应用。


技术介绍

1、胶质母细胞瘤是中枢神经系统中最为常见且恶性程度最高的原发性脑肿瘤,依据who分类被归为iv级胶质瘤。其特征在于生长迅速、侵袭性强、易于复发,并对现有治疗手段表现出高度耐受性。

2、放射治疗是胶质母细胞瘤标准治疗的重要组成部分,通常与手术切除和化疗联合应用,其主要目的是清除术后残余病灶或无法完全切除的肿瘤组织,从而延长患者的生存时间并改善预后。然而,胶质母细胞瘤对放射治疗表现出显著的耐受性(即放射抵抗),这一特性严重限制了放疗的效果,不仅成为治疗失败的主要原因之一,还导致肿瘤的高复发率,对患者的长期生存带来极大挑战。因此,寻找提升放射敏感性的潜在靶点、阐明放射抵抗的机制,具有现实重要性及紧迫性。

3、胰岛素样生长因子3( igf like family member 3,igfl3)属于胰岛素样生长因子家族,该家族在细胞能量代谢以及生长和发育(尤其在胎儿期)中起着关键作用。有研究显示,igfl3可能会响应tgf-β信号,在其刺激下表达可上调;在人牙龈愈合时,igfl3基因显著下调;而在pparg基因敲除小鼠皮肤中,igfl3基因显著上调;另外,igfl3在子宫平滑肌瘤中表达上调,参与免疫系统、血管生成、侵袭、代谢改变、细胞外基质沉积,可能与tgf-β3和wnt/β-catenin通路失调有关。截至目前,国内外对于igfl3基因的研究甚少,其在肿瘤发生发展中的作用机制尚不清楚,也未见有igfl3基因在肿瘤放射敏感性中的相关研究。


技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种靶向igfl3基因的sgrna序列及其在提高胶质母细胞瘤放射敏感性中的应用。通过高效靶向敲除igfl3基因,阐明该基因在胶质母细胞瘤放射敏感性中的作用,为明确该基因是否可成为提高放射敏感性的潜在靶点奠定基础。

2、为了实现上述目的,本专利技术采用如下技术方案:

3、一种靶向敲除igfl3基因的sgrna序列,所述sgrna序列为igfl3-sgrna-1或igfl3-sgrna-3,其核苷酸序列如下所示:

4、igfl3-sgrna-1: gccagccgacacccaggtgt;

5、igfl3-sgrna-3: gcaggtggagccacagcggc。

6、一种靶向敲除igfl3基因的细胞,利用crispr/cas9系统敲除人胶质母细胞瘤细胞u251的igfl3基因。

7、一种提高人胶质母细胞瘤细胞u251放射敏感性的方法,具体步骤为将人胶质母细胞瘤细胞u251的igfl3基因敲除。

8、进一步地,上述方法是利用crispr/cas9系统将igfl3基因敲除。

9、上述的sgrna序列在提高人胶质母细胞瘤细胞u251放射敏感性中的应用。

10、与现有技术相比,本专利技术的有益效果是:

11、(1)本专利技术针对igfl3基因设计了2条高效敲除的sgrna序列,本专利技术经基因敲除效率检测,可在人胶质母细胞瘤细胞u251上实现igfl3基因的高效敲除,这为进一步研究该基因功能奠定了基础。

12、(2)通过本专利技术靶向敲除igfl3基因,可有效提高人胶质母细胞瘤细胞u251的放射敏感性,为进一步开发igfl3基因作为提高放射敏感性的潜在靶点提供了坚实的基础。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种靶向敲除IGFL3基因的sgRNA序列,其特征在于:所述sgRNA序列为IGFL3-sgRNA-1或IGFL3-sgRNA-3,其核苷酸序列如下所示:

2.一种靶向敲除IGFL3基因的细胞,其特征在于:利用CRISPR/Cas9系统敲除人胶质母细胞瘤细胞U251的IGFL3基因。

3.一种提高人胶质母细胞瘤细胞U251放射敏感性的方法,其特征在于:将人胶质母细胞瘤细胞U251的IGFL3基因敲除。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:利用CRISPR/Cas9系统将IGFL3基因敲除。

5.如权利要求1所述的sgRNA序列在提高人胶质母细胞瘤细胞U251放射敏感性中的应用。

【技术特征摘要】

1.一种靶向敲除igfl3基因的sgrna序列,其特征在于:所述sgrna序列为igfl3-sgrna-1或igfl3-sgrna-3,其核苷酸序列如下所示:

2.一种靶向敲除igfl3基因的细胞,其特征在于:利用crispr/cas9系统敲除人胶质母细胞瘤细胞u251的igfl3基因。

3.一种...

【专利技术属性】
技术研发人员:蓝瑞隆许艳芳
申请(专利权)人:福建医科大学附属第一医院
类型:发明
国别省市:

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