【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，具体涉及线粒体自噬蛋白nix、pink1在制备肝癌对索拉菲尼疗效评估试剂盒中的应用。
技术介绍
1、肝细胞癌(hepatocellular carcinoma，hcc)是一种常见恶性肿瘤，全世界每年大约有80万肝癌新增病例，我国最新癌症报告显示，肝癌的死亡率已经由原来的第三位升至第二位，每年约有33.6万人死于肝癌。临床大多数肝癌患者确诊时已为中晚期，失去了手术治疗的时机，只能选择非手术治疗。在药物治疗中，索拉菲尼是目前世界范围内首个被证实针对肝癌有效的分子靶向药物。
2、然而，全球多中心、随机、双盲ⅲ期临床试验证据表明，虽然索拉非尼的确可使晚期肝癌患者受益、生存期延长，但延长时间极为有限，平均仅2.8个月。因而如何提高其抗癌疗效是临床学家和药理学家面对的突出问题。研究显示，肝癌细胞对索拉非尼体外作用的敏感性普遍较低，杀伤率仅为20％-30％。可能与药物诱导肝癌细胞自噬(autophagy)有关，而类似细胞自噬现象也发现于其它传统的抗肿瘤药物，甚至制约着多种抗肝癌新药的研发进程。
3、广义自噬通常为非选择性。当细胞自噬定向性清除受损伤细胞器时，表现为相应的选择性自噬，如线粒体自噬(mitophagy)、过氧化物酶体自噬(pexophagy)、内质网自噬(reticulophagy)等。报道发现多种类型选择性自噬与肿瘤的发生发展过程密切相关。考虑到线粒体作为细胞凋亡和细胞生命活动控制中心，对清除肿瘤细胞而言更举足轻重，提示探索目光应从线粒体自噬研究切入。
4、在哺乳动物细胞中
5、近年，线粒体自噬与肿瘤关系初见端倪。有报道指出，parkin是细胞的“分子开关”，决定着细胞应对不同胁迫因素时的命运。编码parkin的papk2基因位于6号染色体脆性位点，其基因突变与人结肠癌、神经胶质瘤、肺癌、肝细胞癌等发病有关。fujiwara等发现parkin基因敲除小鼠肝细胞增殖能力增强且可出现肝细胞癌，提示papk2基因可能为抑肿基因。此外，研究发现索拉非尼抑制线粒体电子传递链，促进parkin向受损线粒体募集，从而诱导线粒体自噬引起肿瘤细胞死亡。由此推测pink1/parkin介导线粒体自噬可能有抑制肿瘤生长作用。而bnip3及nix(又称bnip3l)在缺氧条件下促进线粒体自噬。研究发现，多柔比星作用下，结直肠癌干细胞线粒体自噬蛋白nix表达增加，抑制nix明显增强癌细胞对多柔比星的敏感性，提示nix表达对肿瘤细胞可能具有保护作用。
6、目前，不同索拉菲尼敏感状态下肝癌临床转归与线粒体自噬发生、发展的关系仍不清楚，过程中nix和pink1信号途径交互对话点尚不明确。目前还未见线粒体自噬蛋白nix、pink1在制备肝癌对索拉菲尼疗效评估试剂盒中的应用的相关报道。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为了解决现有技术存在的上述问题，提供线粒体自噬蛋白nix、pink1在制备肝癌对索拉菲尼疗效评估试剂盒中的应用。本专利技术通过线粒体自噬这一全新视角，通过nix和pink1依赖性线粒体自噬在索拉非尼治疗肝癌中的作用机制，以考证nix和pink1对以索拉非尼为基础的肝癌药物治疗方案的影响；从而为肝癌索拉菲尼临床治疗及疗效评估寻求新思路和新靶点。
2、为了达到上述目的，本专利技术的技术方案如下：
3、第一个方面，本专利技术提供线粒体自噬蛋白nix、pink1在制备肝癌索拉菲尼疗效评估试剂或试剂盒中的应用。
4、进一步，所述试剂或试剂盒检测线粒体自噬蛋白nix、pink1在肝癌组织或者原发灶穿刺组织中的表达量。
5、进一步，所述试剂或试剂盒采用免疫组化方法检测线粒体自噬蛋白nix、pink1在肝癌组织或者原发灶穿刺组织中的表达量。
6、第二个方面，本专利技术提供线粒体自噬蛋白nix、pink1在制备判断肝癌患者对索拉菲尼敏感性的试剂或试剂盒中的应用。
7、进一步，所述试剂或试剂盒检测线粒体自噬蛋白nix、pink1在肝癌组织或者原发灶穿刺组织中的表达量。
8、第三个方面，本专利技术提供一种判断服用索拉菲尼肝癌患者的预后的方法，所述方法为检测线粒体自噬蛋白nix、pink1在肝癌组织或者原发灶穿刺组织中的表达量。
9、本专利技术的有益效果如下：
10、在现有的关于线粒体自噬与肿瘤关系研究的基础上，本专利技术进一步研究显示，索拉非尼刺激下肝癌hep3b细胞中以线粒体为底物的自噬体增加；免疫印迹检测中，索拉非尼可浓度依赖性诱导细胞线粒体自噬标志分子nix表达显著增加，后者与药物致细胞凋亡信号caspase3剪切变化负相关，提示肝癌nix诱导高表达可能对药物治疗不利。与nix基础高表达不同，肝癌hep3b细胞中pink1基础水平低，单用索拉非尼对细胞pink1和parkin表达影响不大。后者用褪黑素刺激pink1/parkin途径线粒体自噬活动，发现可提高索拉非尼治疗肝癌疗效，为pink1/parkin途径线粒体自噬的抑癌作用提供了新证据。
11、本专利技术探寻了索拉菲尼临床疗效评估分新靶点，可以实现个体化靶向治疗，为广大肝癌患者减少痛苦。此外，本专利技术通过线粒体自噬相关通路这一全新角度诠释了索拉菲尼对于肝癌的疗效、预后，具有重大的临床意义。
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1.线粒体自噬蛋白在制备肝癌对索拉菲尼疗效评估试剂或试剂盒中的应用，其特征在于：所述线粒体自噬蛋白为NIX或PINK1。
2.如权利要求1所述的线粒体自噬蛋白在制备肝癌对索拉菲尼疗效评估试剂或试剂盒中的应用，其特征在于：所述试剂或试剂盒检测所述线粒自噬体蛋白在肝癌组织或者原发灶穿刺组织中的表达量。
3.如权利要2所述的线粒体自噬蛋白在制备肝癌对索拉菲尼疗效评估试剂或试剂盒中的应用，其特征在于：所述试剂或试剂盒采用免疫组化方法检测所述线粒体自噬蛋白在肝癌组织或者原发灶穿刺组织中的表达量。
4.线粒体自噬蛋白在制备判断肝癌患者对索拉菲尼敏感性的试剂或试剂盒中的应用，其特征在于：所述线粒体自噬蛋白为NIX或PINK1。
5.如权利要求4所述的线粒体自噬蛋白在制备判断肝癌患者对索拉菲尼敏感性的试剂或试剂盒中的应用，其特征在于：所述试剂或试剂盒检测所述线粒体自噬蛋白在肝癌组织或者原发灶穿刺组织中的表达量。
【技术特征摘要】
1.线粒体自噬蛋白在制备肝癌对索拉菲尼疗效评估试剂或试剂盒中的应用，其特征在于：所述线粒体自噬蛋白为nix或pink1。
2.如权利要求1所述的线粒体自噬蛋白在制备肝癌对索拉菲尼疗效评估试剂或试剂盒中的应用，其特征在于：所述试剂或试剂盒检测所述线粒自噬体蛋白在肝癌组织或者原发灶穿刺组织中的表达量。
3.如权利要2所述的线粒体自噬蛋白在制备肝癌对索拉菲尼疗效评估试剂或试剂盒中的应用，其特征在于：所述试剂...
【专利技术属性】
技术研发人员：张国，郭先文，陈丽，刘泽峰，曾琼戎，
申请(专利权)人：中山大学附属第一医院广西医院，
类型：发明
国别省市：
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