【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品安全检测，特别是涉及一种比色/sers双模生物传感器的制备方法及应用。
技术介绍
1、氯霉素(cap)是委内瑞拉链霉菌培养物衍生的水产品中常见的一类广谱抗菌抗生素，它通过与核糖体的50s亚基结合并阻止蛋白质合成来抑制细菌生长。虽然cap可以在水产养殖中提供保护，但过度使用它可能会导致鱼类体内残留物的积累，并对人类卫生系统构成潜在风险。cap对人体的主要有害作用在于抑制骨髓的造血功能，这也会影响其他药物的代谢率，从而加剧其对身体的毒性作用，这进一步增加了消费者在食用受污染海产品时面临的健康风险。
2、目前现有的检测cap的方法有高效液相色谱(hplc)、酶联免疫吸附法(elisa)、小鼠生物测定(mba)和高效液相色谱/质谱联用(hplc-ms/ms)。尽管他们大多能满足针对食品安全和环境保护的相关检测标准，但仍然存在一定的局限性。例如，小鼠生物测定(mba)具有耗时长，重复性差的缺点。高效液相色谱/质谱联用法(hplc-ms/ms)前处理复杂并且需要经验丰富的检测人员。因此，在cap检测领域开发新的快速、灵敏且低成本的方法是非常重要的。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种比色/sers(表面增强拉曼散射)双模生物传感器的制备方法及应用，以解决现有技术中检测cap存在的问题，例如：检测时间长，检测步骤繁琐，检测需要借助大型仪器，现场化受限。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
3、本专利技术的技术方案之一：一
4、对mil-101纳米粒子进行氨基改性，得到胺化mil-101；以所述胺化mil-101和au-nrs(金纳米粒子)为原料，反应制备mil-101/au nrs纳米复合材料；
5、将所述mil-101/aunrs纳米复合材料与醋酸钠缓冲液、tmb(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)溶液以及h2o2溶液混合，在40-70℃的温度下反应0.2-2h，反应结束后得到的混合溶液即为所述比色/sers双模生物传感器。
6、本专利技术合成的mil-101/au-nrs纳米复合材料不仅具有类过氧化物酶活性，也具有sers活性，可用于信号的放大。本专利技术将tmb作为信号来源，合成的mil-101/au-nrs纳米复合材料作为类过氧化物酶，构建了基于sers活性-过氧化物酶样mil-101/au-nrs的比色/sers双模生物传感器，实现了cap的快速、灵敏检测。具体设计的mil-101/au-nrs，具有较强的类过氧化物酶活性，提高了检测的灵敏度，并且在h2o2存在下，可以催化tmb氧化成为oxtmb，oxtmb会引起sers和比色两种信号的产生及变化，可以在同一传感器中同时实现对cap的多种分析和检测(检测原理如图1所示)，从而最大程度地满足cap的快速分析和检测，应对检测中复杂多变的情况且降低检测成本。
7、进一步地，所述mil-101纳米粒子的制备方法包括：将铁源、镍源、有机酸、钛源和溶剂混合，进行溶剂热反应，得到所述mil-101纳米粒子；
8、所述铁源为氯化铁；所述镍源为氯化镍；所述有机酸为对苯二甲酸(h2bdc)；所述钛源为钛酸四异丙酯(ttip)；所述溶剂为dmf；所述铁源、镍源、有机酸、钛源和溶剂的用量比为3g:3g:4g:125μl:200ml；所述溶剂热反应的温度为25-200℃；时间为10-50h。mil-101纳米粒子的参与可以使得sers增强效果更好。
9、进一步地，优选在50℃的温度下反应0.5-2h。
10、进一步地，所述溶剂热反应在氮气保护下进行。
11、进一步地，所述氯化铁具体为fecl3·6h2o；所述氯化镍具体为nicl2·6h2o。
12、进一步地，所述将铁源、镍源、有机酸、钛源和溶剂混合后，还包括超声处理的操作；所述溶剂热反应结束后，还包括将反应产物依次用无水乙醇和超纯水超声洗涤并干燥的操作。
13、进一步地，所述对mil-101纳米粒子进行氨基改性，得到胺化mil-101具体包括：将mil-101纳米粒子、氨基改性剂和无水乙醇混合，搅拌反应0.1-10h，反应结束后洗涤、过滤，得到所述胺化mil-101；
14、所述氨基改性剂为3-氨丙基三甲氧基硅烷(aptes)；所述mil-101纳米粒子、氨基改性剂和无水乙醇的用量比为3mg:1.5ml:1ml。
15、进一步地，所述搅拌反应0.1-10h在室温下进行。
16、进一步地，所述以胺化mil-101和au-nrs为原料，反应制备mil-101/au nrs纳米复合材料具体包括：将胺化mil-101分散在水中，得到胺化mil-101溶液；将所述胺化溶液与au-nrs溶液混合，搅拌反应1-10h，得到所述mil-101/au nrs纳米复合材料。
17、进一步地，所述搅拌反应1-10h在室温下进行。
18、进一步地，所述胺化mil-101溶液的浓度为1g/l；所述胺化mil-101溶液和au-nrs溶液的体积比为1:1；
19、所述au-nrs溶液的制备方法包括：将haucl4溶液、ctab溶液和nabh4溶液混合，搅拌反应0.1-10h，反应结束后静置1-10h，得到金种子溶液；将ctab(十六烷基三甲基溴化铵)、naol和水混合，先升温至40-100℃进行反应0.5-2h再降温至室温，然后加入agno3溶液，搅拌反应1-5h，再加入hcl溶液和抗坏血酸溶液，搅拌反应1-2h，得到au-nrs生长溶液；将所述金种子溶液和所述au-nrs生长溶液混合，搅拌反应10-50h，得到所述au-nrs溶液；
20、所述搅拌反应均在室温下进行。
21、进一步地，所述haucl4溶液、ctab溶液和nabh4溶液的浓度之比为1:400:2，体积之比为1:1:1.2；所述agno3溶液的浓度为1-10mm；所述hcl溶液的浓度为20-50wt％；所述抗坏血酸溶液的浓度为1-200mm；所述ctab、naol、水、agno3溶液、hcl溶液和抗坏血酸溶液的用量比为9g:1.2g:10-500ml:1-50ml:1-50ml:1-100ml；所述金种子溶液和所述au-nrs生长溶液的体积比为100μl:270.8ml。
22、进一步地，所述将mil-101/au nrs纳米复合材料与醋酸钠缓冲液、tmb溶液以及h2o2溶液混合具体包括：将mil-101/au nrs纳米复合材料分散在水中，得到mil-101/au nrs纳米复合材料溶液；然后将所述mil-101/au nrs纳米复合材料溶液与醋酸钠缓冲液、tmb溶液以及h2o2溶液混合；
23、所述mil-101/au nrs纳米复合材料溶液的浓度为0.25g/l；所述醋酸钠缓冲液的ph为3-5，优选为4，浓度为0.2m；所述tmb溶液的浓度为4-30m本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种比色/SERS双模生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的比色/SERS双模生物传感器的制备方法，其特征在于，所述MIL-101纳米粒子的制备方法包括：将铁源、镍源、有机酸、钛源和溶剂混合，进行溶剂热反应，得到所述MIL-101纳米粒子；
3.如权利要求1所述的比色/SERS双模生物传感器的制备方法，其特征在于，所述对MIL-101纳米粒子进行氨基改性，得到胺化MIL-101具体包括：将MIL-101纳米粒子、氨基改性剂和无水乙醇混合，搅拌反应0.1-10h，反应结束后洗涤、过滤，得到所述胺化MIL-101；
4.如权利要求1所述的比色/SERS双模生物传感器的制备方法，其特征在于，所述以胺化MIL-101和Au-NRs为原料，反应制备MIL-101/Au NRs纳米复合材料具体包括：将胺化MIL-101分散在水中，得到胺化MIL-101溶液；将所述胺化溶液与Au-NRs溶液混合，搅拌反应1-10h，得到所述MIL-101/Au NRs纳米复合材料。
5.如权利要求4所述的比色/SERS双模生
6.如权利要求5所述的比色/SERS双模生物传感器的制备方法，其特征在于，所述HAuCl4溶液、CTAB溶液和NaBH4溶液的浓度之比为1:400:2，体积之比为1:1:1.2；所述AgNO3溶液的浓度为1-10mM；所述HCl溶液的浓度为20-50wt％；所述抗坏血酸溶液的浓度为1-200mM；所述CTAB、NaOL、水、AgNO3溶液、HCl溶液和抗坏血酸溶液的用量比为9g:1.2g:10-500mL:1-50mL:1-50mL:1-100mL；所述金种子溶液和所述Au-NRs生长溶液的体积比为100μL:270.8mL。
7.如权利要求1所述的比色/SERS双模生物传感器的制备方法，其特征在于，所述将MIL-101/Au NRs纳米复合材料与醋酸钠缓冲液、TMB溶液以及H2O2溶液混合具体包括：将MIL-101/Au NRs纳米复合材料分散在水中，得到MIL-101/Au NRs纳米复合材料溶液；然后将所述MIL-101/Au NRs纳米复合材料溶液与醋酸钠缓冲液、TMB溶液以及H2O2溶液混合；
8.一种如权利要求1-7任一项所述的制备方法制得的比色/SERS双模生物传感器。
9.如权利要求8所述的比色/SERS双模生物传感器在CAP检测中的应用。
10.一种检测CAP的方法，其特征在于，包括以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种比色/sers双模生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的比色/sers双模生物传感器的制备方法，其特征在于，所述mil-101纳米粒子的制备方法包括：将铁源、镍源、有机酸、钛源和溶剂混合，进行溶剂热反应，得到所述mil-101纳米粒子；
3.如权利要求1所述的比色/sers双模生物传感器的制备方法，其特征在于，所述对mil-101纳米粒子进行氨基改性，得到胺化mil-101具体包括：将mil-101纳米粒子、氨基改性剂和无水乙醇混合，搅拌反应0.1-10h，反应结束后洗涤、过滤，得到所述胺化mil-101；
4.如权利要求1所述的比色/sers双模生物传感器的制备方法，其特征在于，所述以胺化mil-101和au-nrs为原料，反应制备mil-101/au nrs纳米复合材料具体包括：将胺化mil-101分散在水中，得到胺化mil-101溶液；将所述胺化溶液与au-nrs溶液混合，搅拌反应1-10h，得到所述mil-101/au nrs纳米复合材料。
5.如权利要求4所述的比色/sers双模生物传感器的制备方法，其特征在于，所述胺化mil-101溶液的浓度为1g/l；所述胺化mil-101溶液和au-nrs溶液的体积比为1:1；
6.如权利要求5...
【专利技术属性】
技术研发人员：彭丽杰，陈全胜，何慧琪，焦天慧，许艺，张杨洪，董成钢，
申请(专利权)人：集美大学，
类型：发明
国别省市：
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