【技术实现步骤摘要】
本公开涉及酚类化合物的检测，特别是涉及一种烟草提取物中茶多酚的提取测定方法。
技术介绍
1、烟草提取物中含有许多的酚类化合物，烟草茶多酚物质主要分为单宁类(绿原酸)、香豆素类(莨菪灵、莨菪亭、七叶亭)和黄酮类(芸香苷、黄酮、鼠李糖)等，其中绿原酸、芸香苷和莨菪亭是烟叶中最主要的酚类物质，而绿原酸占总多酚的75％～95％。烟草酚类物质及其衍生物不仅是烟草植物的代谢产物还参与烟草植物细胞的代谢活动，对烟草生长具有调节作用。茶多酚物质被认为是产生烟草香气的主要成分之一。在合理的调制、陈化条件下，多酚类化合物经一系列反应降解生成一系列降解产物，它能赋予烟草制品优雅的香气，增加烟草制品的香气量，对改善烟草制品的品质有重要作用，准确测定烟草中的酚类物质对于烟草识别、烟草制品质量控制的开发具有重要意义。
2、目前，测定茶多酚物质的方法主要有分光光度法、气相色谱法和液相色谱法等。分光光度法只能测定多酚总含量，不能测定多酚的种类及其含量，实验证明显色温度和显色时间对绿原酸标准溶液的吸光度影响较大口；气相色谱法需要进行复杂的衍生化，操作步骤较复杂；传统的液相色谱法需用有机溶剂对样品进行脱脂处理，操作较麻烦，需消耗较多的流动相，且会造成多酚损失，使得烟草提取物的多酚类化合物测试结果不准确。
3、如对比文件cn202110826485.x公开的一种检测雪茄烟中多酚化合物的方法，通过采取适当酸度的甲醇溶液对雪茄烟中多酚化合物进行提取，再使用高效液相色谱仪进行检测的方法。该方案能准确测定雪茄烟中多酚化合物含量，但是该方案是直接对烟叶
4、又如对比文件cn202410172935.1公开的一种茶多酚单体的检测方法，利用液相色谱柱分离样品中的茶多酚单体，分离出的茶多酚单体进入所述反应器内，并向反应器中加入适量的多巴胺，调节反应液ph至12-13，进行柱后衍生反应，生成具有蓝绿色荧光的产物，提供荧光检测器，用于生成产物的液相色谱图。该方案需要进行复杂的衍生化，操作步骤较复杂。
技术实现思路
1、本公开的目的是克服现有技术中的不足之处，提供一种茶多酚物质损失较少、制备简单、分析时间短及茶多酚物质测定准确的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法。
2、本公开的目的是通过以下技术方案来实现的：
3、一种烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，包括如下步骤：
4、配置茶多酚物质的标准溶液；
5、获得烟草提取物，将甲醇水溶液加入烟草提取物中进行定容，以获得茶多酚稀释液；
6、将所述茶多酚稀释液密封后进行超声提取，以获得茶多酚提取液；
7、配置乙二胺四乙酸二钠稳定液，用所述乙二胺四乙酸二钠稳定液对所述茶多酚提取液进行定容，以获得茶多酚净化液；
8、在所述茶多酚净化液加入psa吸附剂，进行离心静置，以获得待测液；
9、将所述待测液及所述茶多酚物质的标准溶液进行仪器分析。
10、在其中一个实施例中，配置乙二胺四乙酸二钠稳定液包括如下步骤：
11、将乙二胺四乙酸加入乙腈溶液溶解，以获得乙二胺四乙酸溶解液；
12、将所述乙二胺四乙酸溶解液用超纯水进行定容，以获得乙二胺四乙酸二钠稳定液。
13、在其中一个实施例中，将乙二胺四乙酸加入乙腈溶液溶解，以获得乙二胺四乙酸溶解液之后，将所述乙二胺四乙酸溶解液用超纯水进行定容，以获得乙二胺四乙酸二钠稳定液之前还包括如下步骤：
14、配置抗坏血酸稳定液；
15、将所述抗坏血酸稳定液加入乙二胺四乙酸溶解液中。
16、在其中一个实施例中，配置抗坏血酸稳定液包括如下步骤：
17、将抗坏血酸加入乙腈溶液溶解，以获得抗坏血酸溶解液；
18、将抗坏血酸溶解液用超纯水进行定容，以获得抗坏血酸稳定液。
19、在其中一个实施例中，配置茶多酚物质的标准溶液包括如下步骤：
20、称取茶多酚物质，用甲醇完全溶解后，用甲醇定容，以获得标准储备液；
21、移取不同体积的标准储备液5份-7份，用体积分数为50:50的甲醇水溶液进行配置，以获得不同浓度的茶多酚物质的标准工作溶液。
22、在其中一个实施例中，将所述茶多酚稀释液密封后进行超声提取，以获得茶多酚提取液，包括如下步骤：
23、对所述茶多酚净化液进行密封；
24、将密封的所述茶多酚净化液放入超声波振荡装置中进行超声提取，所述超声波频率为40khz-120khz，所述超声提取的时间为15min-20min。
25、在其中一个实施例中，在所述茶多酚净化液加入psa吸附剂，进行离心静置，以获得待测液之后，在将所述待测液及所述茶多酚物质的标准溶液进行仪器分析之前，还包括如下步骤：
26、对所述待测液及所述茶多酚物质的标准溶液分别进行过滤。
27、在其中一个实施例中，所述待测液及所述茶多酚物质的标准溶液的仪器分析通过带esi检测器的高效液相色谱质谱联用仪进行检测。
28、在其中一个实施例中，所述高效液相色谱质谱联用仪的色谱条件：
29、色谱柱为c18色谱柱，规格为100mm×2.1mm，粒径1.9μm或等效柱；柱流量0.30ml/min，柱温箱温度为40℃；进样量为5μl；及/或，
30、所述高效液相色谱质谱联用仪的质谱条件:
31、离子源为电喷雾离子源(esi)；电离模式为正离子模式；电喷雾电压为+3500v；离子源温度为350℃；离子传输管温度为350℃；扫描方式为多反应检测(mrm)。
32、在其中一个实施例中，所述茶多酚物质包括表没食子儿茶素、儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯中至少一种。
33、与现有技术相比，本公开至少具有以下优点：
34、上述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，通过超声提取使得茶多酚物质从茶多酚提取物内脱离，烟草提取物无需进行复杂的衍生化及脱脂处理，使得烟草提取物的检测茶多酚物质损失较少，待测液制备简单及分析时间短；通过加入乙二胺四乙酸二钠稳定液，使得茶多酚净化液的更加稳定，从而提高了烟草提取物中茶多酚的测定的准确性；通过psa吸附剂除去茶多酚净化液的有机酸、脂肪酸及金属离子，进一步减少了其他物质对茶多酚物质的检测干扰，进而使得烟草提取物中茶多酚物质的检测更加准确。
35、通过添加抗坏血酸维持茶多酚净化液的ph稳定并抑制茶多酚物质的氧化，通过乙二胺四乙酸二钠减少了金属对抗坏血酸的破坏作用，进而增加了抗坏血酸抗氧化性能，从而延长了抗坏血酸对茶多酚物质的抗氧化效果；通过茶多酚超声提取控制温度减少茶多酚净化液中抗坏血酸的分解与氧化，从而使得茶多酚物质保持稳定，茶多酚物质的损耗较少，进而使得茶多酚提本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，配置乙二胺四乙酸二钠稳定液包括如下步骤：
3.根据权利要求1所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，将乙二胺四乙酸加入乙腈溶液溶解，以获得乙二胺四乙酸溶解液之后，将所述乙二胺四乙酸溶解液用超纯水进行定容，以获得乙二胺四乙酸二钠稳定液之前还包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，配置抗坏血酸稳定液包括如下步骤：
5.根据权利要求1所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，配置茶多酚物质的标准溶液包括如下步骤：
6.根据权利要求1所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，将所述茶多酚稀释液密封后进行超声提取，以获得茶多酚提取液，包括如下步骤：
7.根据权利要求1所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，在所述茶多酚净化液加入PSA吸附剂，进行离心静置，以获得待测液之后，在将所述待测液及所述
8.根据权利要求1所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，所述待测液及所述茶多酚物质的标准溶液的仪器分析通过带ESI检测器的高效液相色谱质谱联用仪进行检测。
9.根据权利要求8所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，所述高效液相色谱质谱联用仪的色谱条件：
10.根据权利要求1所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，所述茶多酚物质包括表没食子儿茶素、儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯中至少一种。
...【技术特征摘要】
1.一种烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，配置乙二胺四乙酸二钠稳定液包括如下步骤：
3.根据权利要求1所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，将乙二胺四乙酸加入乙腈溶液溶解，以获得乙二胺四乙酸溶解液之后，将所述乙二胺四乙酸溶解液用超纯水进行定容，以获得乙二胺四乙酸二钠稳定液之前还包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，配置抗坏血酸稳定液包括如下步骤：
5.根据权利要求1所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，配置茶多酚物质的标准溶液包括如下步骤：
6.根据权利要求1所述的烟草提取物中茶多酚的提取测定方法，其特征在于，将所述茶多酚稀释液密封后...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁庄宝，刘慧，吴成琴，
申请(专利权)人：深圳市艾溹技术研究有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。