【技术实现步骤摘要】
本专利技术属生物固碳，尤其涉及一种布鲁氏菌固定二氧化碳的方法。
技术介绍
1、目前常见的co2利用技术有物理、化学、生物法。生物转化技术具有反应条件温和、固碳永久、环境友好、产物多样、产品附加值高等优点，是目前世界上最主要和最有效的co2资源化利用方式之一。植物光合作用的过程较为复杂，且易受生化因素和扩散因素的影响，而微生物固定途径相对简单。因此利用自养微生物固定co2并将其转化为高附加值产品是实现co2资源化利用的有效策略。在该过程中微生物可以在相对温和的压力和温度条件下捕获和转化co2，并且没有二次污染，同时还可以产生乙醇、乙酸等增值化合物，已引起人们的广泛关注。
2、虽然氢氧化细菌将二氧化碳转化为有机碳的效率比较高，但是氢气的制备、存储、运输、使用等环节都需要特殊的氢气安全技术，因此对整个实验室的条件要求较高，这阻碍了该类型微生物的大规模应用。因此亟需筛选一种可将co2转化为有机碳的非氢氧化细菌。
技术实现思路
1、针对上述现有技术中存在的问题，本专利技术提供了一种布鲁氏菌wyq-2、菌剂及其用途，本专利技术的布鲁氏菌wyq-2和菌剂在具有电子供体的条件下，尤其是以还原铁粉作为电子供体时，能够突破二氧化碳转化为其它高附加值产物需要极高的化学能的化学壁垒，实现对二氧化碳的有效固定。此外，固定反应中还原铁粉（零价转化为二价后）可以作为微量元素调控微生物生长过程中蛋白质的分泌。
2、一方面，本专利技术提供了一种布鲁氏菌wyq-2，所述布鲁氏菌wyq-2的微生
3、进一步，本专利技术所述的布鲁氏菌wyq-2的菌体呈小点状、白色不透光、形态饱满，且无鞭毛。
4、进一步，本专利技术所述的布鲁氏菌wyq-2的菌苔沿划线生长。
5、另一方面，本专利技术提供了一种菌剂，所述菌剂包括上述任一项所述的布鲁氏菌wyq-2。
6、进一步，本专利技术所述的菌剂的制备方法包括：
7、步骤1）斜面培养：
8、将所述布鲁氏菌wyq-2接种于固体培养基中进行培养48~72h，培养温度为30℃；得到斜面菌体；
9、所述固体培养基的配制方法为：将16g的na2hpo4·12h2o，6.8g的kh2po4，4g的ch3coona，1g的酵母粉，0.002g的feso4，0.0002g的(nh4)2moo4，1ml的微量元素溶液加入800ml蒸馏水中得到溶液a，将0.58的mgso4，0.067的cacl2溶解在200ml蒸馏水中得到溶液b，将溶液a和b缓慢搅拌混合后得到培养基，随后取100ml液体体积加入250ml血清瓶中，加入2g琼脂，配得固体培养基；
10、步骤2）扩大培养：
11、将步骤1）中培养得到的所述斜面菌体接种至平板培养48~72 h后，再接种至液体培养基中进行振荡培养24~48h，之后经离心分离去掉上清液，再进行无机盐溶液清洗后，加入无机盐溶液振荡完全，得到所述菌剂；
12、所述振荡培养的转速为140~180 r/min，所述振荡培养的温度为25~30℃，所述液体培养基的ph=5~9。
13、进一步，本专利技术所述的菌剂的制备方法中，所述液体培养基的组成为：5g/l的酵母粉，10g/l的蛋白胨，10g/l的nacl；
14、或者，所述液体培养基的组成为：4.5g/l的na2hpo4·12h2o，1.0g/l的kh2po4，2.5g/l的(nh4)2so4，0.2g/l的mgso4·7h2o，0.023g/l的cacl2，1ml/l的微量元素母液，1ml/l的维生素母液。
15、进一步，本专利技术所述的菌剂的制备方法中，所述微量元素母液包括：1g/l的feso4，0.05g/l的cuso4，0.014g/l的h3bo3，0.1g/l的mnso4·4h2o，0.02g/l的na2moo4·2h2o，0.02g/l的cocl2·6h2o。
16、所述维生素母液还包括：0.2g/l的生物素vh，0.2g/l的叶酸vb，1g/l的盐酸吡哆醇vb6，0.5g/l的核黄素，0.45~0.55g/l的维生素b2，0.5g/l的硫铵vb1，0.5g/l的烟酸，0.5g/l的泛酸vb5，0.01g/l的b-12，0.5g/l的对氨基苯甲酸和0.5g/l的硫辛酸。
17、再一方面，本专利技术提供了一种上述任一项所述的布鲁氏菌wyq-2的用途，所述布鲁氏菌wyq-2在提供电子供体的条件下，用于固定二氧化碳，进行固定反应；
18、或者，
19、所述布鲁氏菌wyq-2在还原铁粉作为电子供体的条件下，用于固定二氧化碳，进行固定反应。
20、再一方面，本专利技术提供了一种上述任一项所述的菌剂的用途，所述菌剂在还原铁粉作为电子供体的条件下用于固定二氧化碳，进行固定反应。
21、进一步，本专利技术所述的布鲁氏菌wyq-2或菌剂的用途中，所述固定反应的初始二氧化碳浓度体积分数为30vol%~66 vol%、初始还原铁粉的浓度为0.1~2 g/100ml，所述的固定反应的ph为5~9。
22、进一步，本专利技术的布鲁氏菌wyq-2在不同电子供体浓度下对co2体现出不同的固定效果，在初始菌体浓度od600为0.05情况下，当电子供体浓度（铁粉浓度）为0.5~2 g/100ml时，对co2体现出较为优异的降解效果。
23、进一步，本专利技术提供的布鲁氏菌wyq-2对co2固定的效果受ph影响，在初始菌体浓度od600为0.05情况下，通入co2体积分数为35 vol%情况下，ph为7~9范围内，均能够对co2体现出较为优异的固定性能，证明该菌适宜生长的ph范围为碱性条件，这与前期污泥驯化结束ph变化情况一致。
24、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果：
25、（1）本专利技术的菌-布鲁氏菌wyq-2是非氢氧化细菌，能够在以co2为无机碳源，在具有电子供体的条件下生长，特别是还原铁粉作为电子供体的条件下生长，无需氢气条件就能将co2转化为高附加值的产品。同时，与利用氢气作为电子供体的氢氧化细菌相比，以还原铁粉作为电子供体，价格低廉、实验安全性较高且反应条件温和、环境友好。
26、（2）本专利技术的布鲁氏菌wyq-2固定co2的效果优异，在初始菌体浓度od600=0.05情况下，仍可以对高浓度的co2体现固定作用，对通入体积分数大于等于66%的co2仍能起到固定作用。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种布鲁氏菌WYQ-2，其特征在于，所述布鲁氏菌WYQ-2的微生物分类命名为布鲁氏菌(Brucella sp. )，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No: M20242175，保藏日期为2024年10月14日。
2.根据权利要求1所述的布鲁氏菌WYQ-2，其特征在于，所述布鲁氏菌WYQ-2的菌体呈小点状、白色不透光、形态饱满，且无鞭毛。
3.根据权利要求1所述的布鲁氏菌WYQ-2，其特征在于，所述布鲁氏菌WYQ-2的菌苔沿划线生长。
4.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂为包括权利要求1~3任一项所述的布鲁氏菌WYQ-2的菌悬液。
5.根据权利要求4所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂的制备方法包括：
6.根据权利要求5所述的菌剂，其特征在于，所述液体培养基的组成为：5g/L的酵母粉，10g/L的蛋白胨，10g/L的NaCl；
7. 根据权利要求6所述的菌剂，其特征在于，所述微量元素母液包括：1g/L的FeSO4，0.05g/L的CuSO4，0.014g/L的H3BO3，0.1g/L的MnSO
8.一种如权利要求1~3任一项所述的布鲁氏菌WYQ-2的用途，其特征在于，所述布鲁氏菌WYQ-2在提供电子供体的条件下，用于固定二氧化碳，进行固定反应；
9.一种如权利要求4~7任一项所述的菌剂的用途，其特征在于，所述菌剂在还原铁粉作为电子供体的条件下用于固定二氧化碳，进行固定反应。
10. 根据权利要求8或9所述的用途，其特征在于，所述固定反应的初始二氧化碳浓度体积分数为30vol%~66 vol%、初始还原铁粉的浓度为0.1~2 g/100mL，所述的固定反应的pH为5~9。
...【技术特征摘要】
1.一种布鲁氏菌wyq-2，其特征在于，所述布鲁氏菌wyq-2的微生物分类命名为布鲁氏菌(brucella sp. )，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no: m20242175，保藏日期为2024年10月14日。
2.根据权利要求1所述的布鲁氏菌wyq-2，其特征在于，所述布鲁氏菌wyq-2的菌体呈小点状、白色不透光、形态饱满，且无鞭毛。
3.根据权利要求1所述的布鲁氏菌wyq-2，其特征在于，所述布鲁氏菌wyq-2的菌苔沿划线生长。
4.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂为包括权利要求1~3任一项所述的布鲁氏菌wyq-2的菌悬液。
5.根据权利要求4所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂的制备方法包括：
6.根据权利要求5所述的菌剂，其特征在于，所述液体培养基的组成为：5g/l的酵母粉，10g/l的蛋白胨，10g/l的na...
【专利技术属性】
技术研发人员：尤菊平，王艳青，叶杰旭，陈东之，
申请(专利权)人：浙江海洋大学，
类型：发明
国别省市：
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