本发明专利技术公开了一种具有氧化应激调节作用的活性肽及其制备和应用，所述活性肽的氨基酸序列为Ala‑Val‑Pro‑Ile‑Cys‑Ala‑Val‑Pro。所述活性肽的制备方法包括采集珍珠贝，获得提取物，收集上清液，选择、筛选以及合成多肽。本发明专利技术具有氧化应激调节作用的活性肽具有较高的活性，能够较好的清除自由基，减轻H<subgt;2</subgt;O<subgt;2</subgt;对肤成纤维细胞的损伤；能够促进皮肤伤口愈合。所述具有氧化应激调节作用的活性肽在减轻细胞氧化应激药物或器械中具有较好的应用前景。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物多肽，具体涉及一种具有氧化应激调节作用的活性肽及其制备和应用。
技术介绍
1、氧化应激是指由于体内活性氧(reactive oxygen species，ros)的过度产生或抗氧化系统功能的不足，导致机体内氧化与抗氧化状态失衡的病理过程，氧化应激不仅损伤细胞膜、蛋白质及dna分子，还会抑制组织修复和再生能力，这一过程与多种慢性疾病的发生和发展密切相关，尤其在糖尿病及其并发症中发挥了至关重要的作用。
2、近年来，大量研究聚焦于通过调节氧化应激缓解细胞损伤，以促进糖尿病创面愈合。活性多肽作为一类功能多样的生物分子，以其结构特异性和多种生物活性成为抗氧化研究的重要方向，特定的具有氧化应激调节作用的活性多肽能够通过靶向调控氧化应激信号通路，除过量的活性氧，抑制炎症反应，并促进细胞增殖和血管生成。拓宽具有氧化应激调节作用的活性肽来源，开发具有特异性和高效性的具有氧化应激调节作用的活性肽，对制备减轻细胞氧化应激药物或器械具有重要意义。
3、中国专利cn114031669a(公开日期：2022年02月11日)，公开了一种厚壳贻贝抗氧化活性肽肽及其制备和应用，涉及多肽
一种了厚壳贻贝抗氧化肽gln glu thrtyr及tyr gluleuhis asp，可以减少细胞内活性氧ros的产生，形成保护作用。其通过激活keap1/nrf2信号通路，发挥抗氧化作用并对血管内皮细胞发挥保护作用，可以为高血压、冠心病、脑血栓、心肌梗死、动脉粥样硬化、心力衰竭等心脑血管疾病的预防和治疗提供候选药物。
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p>4、中国专利cn114317654a(公开日期：2022年4月12日)，公开了一种海洋生物抗氧化活性肽的制备方法，涉及抗氧化活性肽
所述方法包括：s1)提取碎的乌贼组织中的胶原蛋白；s2)将提取的胶原蛋白、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶与风味蛋白酶在水中混合进行酶解，得到酶解液；s3)将所述酶解液经盐析沉淀、透析处理后，得到海洋生物抗氧化活性肽。与现有技术相比，以乌贼为原料提取抗氧化活性肽，采取不同的酶解方式，能够对蛋白质进行有效、彻底地催化，从而获得品质好，氨基酸组成合理，功效稳定，质量可靠的活性多肽。5、中国专利cn116904542a(公开日期：2023年10月20日)，公开了一种基于牡蛎壳的抗氧化活性肽及其制备方法，涉及牡蛎壳综合利用
该专利用于解决缺乏对基于牡蛎壳的抗氧化活性肽的研究，导致牡蛎壳的综合利用仍然不够理想，限制了牡蛎壳资源的开发和利用的问题；该制备方法首先将牡蛎壳充分细化，能够易于将牡蛎壳上的蛋白质进行提取，之后对蛋白质进行溶解，使得蛋白质提取效果优良，之后利用多种蛋白酶进行测试，筛选出适用于牡蛎壳上的蛋白质的蛋白酶，从而能够对蛋白质充分酶解，形成活性肽，之后将牡蛎壳酶解液进行逐级超滤，使得具有抗氧化能力的组分得到了浓缩，提高抗氧化活性肽的抗氧化性能，使得牡蛎壳资源得到充分利用，对牡蛎壳资源的开发和利用具有重要意义。
6、经过检索发现，目前虽然有部分专利关于多肽的制备是通过以贝类为原材料，但是其研究方向主要为如何利用贝类的制备抗氧化肽，且制备过程复杂。合浦珠母贝是常见的用于珍珠生产的贝类，其体表粘液是一种未充分利用的生物资源，目前对合浦珠母贝体表粘液作为来源的具有氧化应激调节作用的活性肽研究较少，其多肽氨基酸序列不明确、制备方法和应用也有待进一步开发。
技术实现思路
1、为了解决以上技术问题，本专利技术的提供一种具有氧化应激调节作用的活性肽及其制备和应用。
2、一种具有氧化应激调节作用的活性肽，所述活性肽的氨基酸序列为
3、ala-val-pro-ile-cys-ala-val-pro。
4、所述活性肽能够与调节氧化应激的蛋白酶结合；
5、所述蛋白酶为sod、cat和keap1中的任意一种。
6、一种具有氧化应激调节作用的活性肽的制备方法，包括以下步骤：
7、s1：获得提取物，采集珍珠贝，开贝后将贝肉连同粘液置于纱网中过滤获得粘液提取物；
8、s2：收集上清液，对s1中所述粘液提取物进行离心处理，收集上清液并检测蛋白多肽蛋白质组学；
9、s3：选择多肽，根据蛋白质组学数据选择具有氧化应激调节作用的多肽；
10、s4：筛选多肽，利用分子对接技术预测并从上清液中筛选多肽；
11、s5：合成多肽，用固相合成法合成多肽，并验证多肽调节氧化应激的活性。
12、进一步的，步骤s1中所述纱网的孔径为0.5-1cm
13、进一步的，步骤s2中所述离心处理的离心速度为8000-10000rpm，离心时间为10-15min。
14、进一步的，所述步骤s3包括以下步骤：
15、步骤s301、基于蛋白质组学数据，使用基于深度学习的在线预测工具peptideranker对多肽进行评分，多肽vgarvvgccahvasvlwylgyfr得分为0.9889分，接近1分说明具有潜在的生物学活性；
16、步骤s302、进一步利用katedra biochemii zywnosci在线工具预测多肽活性，发现具有氧化应激调控潜能的多肽ala-val-pro-ile-cys-ala-val-pro。
17、进一步的，所述步骤s4使用discovery studio建立多肽三维结构模型，使用autodock vina模拟活性肽与抗氧化酶sod、cat和keap1结合能力。
18、进一步的，所述步骤s5中验证调节氧化应激的活性以自由基清除率为评价指标；所述自由基包括dpph和abts。
19、进一步的，所述步骤s5中通过多肽与h2o2处理的细胞共孵育并检测细胞活力验证多肽调节氧化应激的活性。
20、一种具有氧化应激调节作用的活性肽在制备减轻细胞氧化应激药物或器械中的应用。
21、相比于现有技术，本专利技术的优点和效果如下：
22、1、本专利技术提供一种具有氧化应激调节作用的活性肽ala-val-pro-ile-cys-ala-val-pro，能促进人成纤维细胞增殖，能够应用于促进皮肤伤口愈合，可用于发现并开发新的创伤愈合药物。
23、2、本专利技术提供一种具有氧化应激调节作用的活性肽的制备方法，通过初步分离的珍珠贝表粘液，有助于快速实现蛋白质多肽鉴定；通过蛋白质组学数据，发现具有氧化应激调控潜能的多肽；通过分子对接筛选抗氧化多肽，然后固相合成，有助于提高海洋来源活性肽开发效率。
24、3、本专利技术提供一种具有氧化应激调节作用的活性肽的应用，所述抗氧化活性肽具有较好的清除自由基，减轻h2o2对细胞的损伤，所述抗氧化活性肽在减轻细胞氧化应激药物或器械中具有较好的应用前景。
25、上述说明仅是本申请技术方案的概述，为了能够更清楚了解本申请的技术手段，从而可依照说明书的内容予以实施，并且为了让本申请的上述和其他目的、特本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种具有氧化应激调节作用的活性肽，其特征在于，所述活性肽的氨基酸序列为Ala-Val-Pro-Ile-Cys-Ala-Val-Pro。
2.根据权利要求1所述的一种具有氧化应激调节作用的活性肽，其特征在于，所述活性肽能够与抗氧化蛋白酶结合。
3.根据权利要求2所述的一种具有氧化应激调节作用的活性肽，其特征在于，所述抗氧化蛋白酶为SOD、CAT和keap1中的任意一种。
4.根据权利要求1-3任一项所述的一种具有氧化应激调节作用的活性肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的一种具有氧化应激调节作用的活性肽的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述离心处理的离心速度为8000-10000rpm，离心时间为10-15min。
6.根据权利要求4或5所述的一种具有氧化应激调节作用的活性肽的制备方法，其特征在于，所述步骤S3包括以下步骤：
7.根据权利要1-3任一项所述的一种具有氧化应激调节作用的活性肽在制备减轻细胞氧化应激药物或器械制备中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种具有氧化应激调节作用的活性肽，其特征在于，所述活性肽的氨基酸序列为ala-val-pro-ile-cys-ala-val-pro。
2.根据权利要求1所述的一种具有氧化应激调节作用的活性肽，其特征在于，所述活性肽能够与抗氧化蛋白酶结合。
3.根据权利要求2所述的一种具有氧化应激调节作用的活性肽，其特征在于，所述抗氧化蛋白酶为sod、cat和keap1中的任意一种。
4.根据权利要求1-3任一项所述的一种具有氧化应激调节作用的活...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑立，许胜，马珂，周波，曾韬，罗艳，
申请(专利权)人：广西医科大学，
类型：发明
国别省市：
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