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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物农药,特别涉及一种橙黄小威氏曲霉ynf11sk发酵提取物及其应用。
技术介绍
1、小威氏曲霉(westerdykella),是荚孢腔菌科(sporormiaceae)的一类真菌。其中,hj lee等从westerdykella multispora f50733分离并鉴定了两种化合物gelastatins a和b,它们具有抑制mmps(matrixmetalloproteinases,基质金属蛋白酶)活性的作用,对mmp-1、mmp-2和mmp-9的抑制效果显著(journal of antibiotics,1997,50(4):357);ebeadga等从红藻中分离出一株westerdykella reniformis sp.nov.,从该菌株中分离的提取物能够抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(mrsa)、耐万古霉素屎肠球菌(vre)、华氏链球菌和普通变形杆菌的生长(ima fungus,2012,3(2):189-201);许建林从海洋中筛选出一株westerdykella dispersa fs350,从该菌株中分离并鉴定了8个化合物,测试了这些化合物的细胞毒活性和抗菌活性(广东药科大学,2018;journal of guangdong pharmaceuticaluniversity,2018);xu d等从海洋沉积物中筛选出一株westerdykella dispersia,从该菌株中分离并鉴定了6种新的烯基化四氢吡喃衍生物,测试了这些化合物的抗菌活性(fitoterapia,.2017,122:45
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是提供一种橙黄小威氏曲霉ynf11sk发酵提取物及其应用,其对烟草赤星病病原菌具有较好的抑制作用,表现出一定的农业应用潜力。
2、本专利技术所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的:
3、橙黄小威氏曲霉(westerdykella aurantiaca)ynf11sk,其保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为cctcc no:m 20242805。
4、一种橙黄小威氏曲霉(westerdykella aurantiaca)ynf11sk发酵提取物,所述发酵提取物通过以下方法制备:
5、(1)菌株固体活化:将保藏编号为cctcc no:m 20242805的菌株ynf11sk接种至试管固体斜面培养基,28℃静置培养5-7d,获得活化菌种;
6、(2)菌株液体培养:将活化菌种接种至三角瓶液体培养基,28℃摇床180-200rpm培养3-5d,获得菌株种子液;
7、(3)菌株扩大培养:将菌株种子液接种至三角瓶液体发酵培养基,28℃摇床180-200rpm培养12-15d,获得菌株发酵液;
8、(4)提取物制备:将菌株发酵液超声25-35min,用乙酸乙酯萃取10-20h,旋蒸得到浓缩粗提物,甲醇洗脱,获得发酵提取物。
9、优选地,上述技术方案中,步骤(1)中,所述固体斜面培养基为pda培养基,121℃高压蒸汽灭菌15min。
10、优选地,上述技术方案中,步骤(2)中,所述液体培养基为pdb培养基,每个500ml三角瓶中装入100ml pdb培养基,121℃高压蒸汽灭菌15min。活化菌种的接种量为每个三角瓶接种0.5-1cm2。
11、优选地,上述技术方案中,步骤(3)中,所述液体培养基为pdb培养基,每个2000ml三角瓶中装入250-300ml pdb培养基,其余制备方法同步骤(2)。菌株种子发酵液的接种量为每个三角瓶10-15ml。
12、优选地,上述技术方案中,步骤(4)中,菌株发酵液与乙酸乙酯的体积比为1:1-1:2;用1.0-1.5ml甲醇洗脱。
13、一种菌剂,包含橙黄小威氏曲霉(westerdykella aurantiaca)ynf11sk。
14、一种橙黄小威氏曲霉(westerdykella aurantiaca)ynf11sk或发酵提取物或菌剂在制备抑制烟草赤星病病原菌的药物中的应用。
15、本专利技术上述技术方案,具有如下有益效果:
16、本申请公开了橙黄小威氏曲霉ynf11sk及其发酵提取物的制备方法,并将该发酵提取物应用于抑制烟草赤星病。平板抑菌试验结果表明,用本专利技术方法制备得到的橙黄小威氏曲霉ynf11sk发酵提取物对烟草赤星病病原菌的抑菌圈直径平均为35.0mm,表明该发酵提取物对烟草赤星病病原菌具有强抑制活性,利用本专利技术提供的橙黄小威氏曲霉ynf11sk发酵提取物可有效地应用于抑制烟草赤星病病原菌。本专利技术具有原料成本低,生产工艺简单的优点,在作物农药
具有潜在的应用价值。
【技术保护点】
1.橙黄小威氏曲霉(Westerdykella aurantiaca)YNF11 SK,其特征在于,其保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 20242805。
2.一种橙黄小威氏曲霉(Westerdykella aurantiaca)YNF11SK发酵提取物,其特征在于,所述发酵提取物通过以下方法制备:
3.根据权利要求2所述的橙黄小威氏曲霉(Westerdykella aurantiaca)YNF11 SK发酵提取物,其特征在于,步骤(1)中,所述固体斜面培养基为PDA培养基,121℃高压蒸汽灭菌15min。
4.根据权利要求2所述的橙黄小威氏曲霉(Westerdykella aurantiaca)YNF11 SK发酵提取物,其特征在于,步骤(2)中,所述液体培养基为PDB培养基,每个500mL三角瓶中装入100mL PDB培养基,121℃高压蒸汽灭菌15min。
5.根据权利要求4所述的橙黄小威氏曲霉(Westerdykella aurantiaca)YNF11 SK发酵提取物,其特征在于,步骤(2)中,
6.根据权利要求2所述的橙黄小威氏曲霉(Westerdykella aurantiaca)YNF11 SK发酵提取物,其特征在于,步骤(3)中,所述液体培养基为PDB培养基,每个2000mL三角瓶中装入250-300mL PDB培养基,其余制备方法同步骤(2)。
7.根据权利要求6所述的橙黄小威氏曲霉(Westerdykella aurantiaca)YNF11 SK发酵提取物,其特征在于,步骤(3)中,菌株种子发酵液的接种量为每个三角瓶10-15mL。
8.根据权利要求2所述的橙黄小威氏曲霉(Westerdykella aurantiaca)YNF11 SK发酵提取物,其特征在于,步骤(4)中,菌株发酵液与乙酸乙酯的体积比为1:1-1:2;用1.0-1.5mL甲醇洗脱。
9.一种菌剂,其特征在于,所述菌剂中包含权利要求1所述的橙黄小威氏曲霉(Westerdykella aurantiaca)YNF11SK。
10.根据权利要求1所述的橙黄小威氏曲霉(Westerdykella aurantiaca)YNF11 SK或权利要求2-8任一所述的发酵提取物或权利要求9所述的菌剂在制备抑制烟草赤星病病原菌的药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.橙黄小威氏曲霉(westerdykella aurantiaca)ynf11 sk,其特征在于,其保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为cctcc no:m 20242805。
2.一种橙黄小威氏曲霉(westerdykella aurantiaca)ynf11sk发酵提取物,其特征在于,所述发酵提取物通过以下方法制备:
3.根据权利要求2所述的橙黄小威氏曲霉(westerdykella aurantiaca)ynf11 sk发酵提取物,其特征在于,步骤(1)中,所述固体斜面培养基为pda培养基,121℃高压蒸汽灭菌15min。
4.根据权利要求2所述的橙黄小威氏曲霉(westerdykella aurantiaca)ynf11 sk发酵提取物,其特征在于,步骤(2)中,所述液体培养基为pdb培养基,每个500ml三角瓶中装入100ml pdb培养基,121℃高压蒸汽灭菌15min。
5.根据权利要求4所述的橙黄小威氏曲霉(westerdykella aurantiaca)ynf11 sk发酵提取物,其特征在于,步骤(2)中,活化菌种的接种量为每个三角瓶接种0.5-1cm2。
6.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员:米其利,管莹,苗翠苹,单秋甫,蒋倩,蒋佳芮,许永,向海英,杨叶昆,
申请(专利权)人:云南中烟工业有限责任公司,
类型:发明
国别省市:
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