【技术实现步骤摘要】
本专利技术公开涉及化合物检测的，尤其涉及一种基于紫外分光光度法的化合物检测方法。
技术介绍
1、cas号为111549-97-4的化合物作为一种重要的化学原料，用于合成b型流感嗜血杆菌(hib)结合疫苗的生产。该疫苗是通过化学合成的方法所制得的新型疫苗。该化合物构成hib疫苗抗原部分的骨架。在生产过程中，该化合物采用称量其重量后投料的方式进行生产，其他物料的投料也均基于此化合物的质量计算各自的投料系数。因此，对其定量检测能够为投料的准确性做出贡献。
2、目前市面上各生产厂家对于cas号为111549-97-4的化合物的含量均采用高效液相色谱(hplc)法的面积归一化法进行检测。面积归一化法仅为产品的曲线下面积与检测条件下具有该检测器可测定值的杂质曲线下面积与产品曲线下面积之和的百分比值，所测得的含量并非含量本意的重量百分比(见下文说明1)；其作为含量检测的方法不够准确(见下文说明2)，只是因为其操作简便快捷(对样品溶解进针即可)，才在市面上得到了广泛的应用。如采用该方法进行某产品的含量检测，应结合更严格的方法学验证，以确认面积归一化法适用于其所测定的样品，故单独应用面积归一化法检测cas号为111549-97-4的化合物含量是不准确的。此外，cas号为111549-97-4的化合物会在hplc测量的过程当中产生两个峰，导致hplc法不适用于该化合物的检测。
3、说明1：《中华人民共和国药典》2020版(现行版，以下简称中国药典)规定，原料药、药用辅料的“含量(％)，除另有注明者外，均按重量计……符号‘％’
4、说明2：例如检测器为紫外-可见分光检测器，检测波长设定为220nm，则该方法事实上测得的是产品与杂质及产品之和在220nm时的曲线下面积比值，即其检测的只是产品的曲线下面积与220nm条件下具备紫外吸收的杂质与产品的曲线下面积之和的比值。如其中的杂质未能进行定量分析，则其紫外吸收面积也并非对应其质量，举例来说，假定所测样品纯度为90％，其余10％均为同一杂质；且同等质量的纯样品在220nm处的曲线下面积为1，而杂质在220nm处的曲线下面积为5。则在220nm处进行检测，面积归一化法会导致所得的样品含量为90×1/(90×1+10×5)＝64.3％，远远偏离了样品的实际含量。又或者假设样品曲线下面积为1，而杂质无吸收，则会导致我们以为样品纯度为100％，对于可能会影响后续反应的杂质的存在一无所知。这样的含量检测结果会导致在投料过程中，我们并不知道实质上投入了多少原料。尤其是cas号为111549-97-4的化合物的投料量，其重量还默认为100％的纯物质，用于指导其他原料所需称量的重量/体积以投入生产，不能得知其实际的投入量将导致生产的不可控。
5、因此，研发一种用于cas号为111549-97-4的化合物的含量检测方法，成为一个亟待解决的问题。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种基于紫外分光光度法的化合物检测方法，用于对cas号为111549-97-4的化合物进行定量检测。
2、本专利技术提供了一种基于紫外分光光度法的化合物检测方法，包括如下步骤：
3、步骤1：样品前处理，以甲醇为溶剂，将样品充分溶解并旋蒸至干，获得去除可挥发杂质的样品，同样，以去除可挥发杂质的样品作为待检测样品；
4、步骤2：精密称取待检测样品，以甲醇为溶剂，配制不同浓度的溶液，浓度范围为0.25mg/ml-1.5mg/ml；
5、步骤3：设置紫外分光光度计的波长为258nm，测定不同浓度的样品吸光度，建立样品浓度与吸光度的标准曲线；
6、步骤4：波长为258nm下，通过紫外分光光度计测定cas号为111549-97-4的化合物的吸光度，以所述标准曲线为基准，通过步骤1中测得的失重比例计算样品化合物的含量。
7、进一步地，所述方法适用于cas号为111549-97-4的化合物。
8、进一步地，步骤2中，配制不同浓度的样品，包括1.5mg/ml、1.0mg/ml、0.75mg/ml、0.50mg/ml以及0.25mg/ml的样品溶液。
9、本专利技术公开了一种基于紫外分光光度法的定量检测方法，包括：样品配制、曲线制备、定量检测以及方法学验证等步骤，基于cas号为111549-97-4的化合物质量与其在紫外分光光度计上测得的吸光度值在一定范围内呈线性关系，据此可对其进行定量检测。
10、本专利技术提供的定量检测方法纠正了市面上该化合物原检测方法hplc面积归一化法的错误，所涉及的设备(天平、紫外分光光度计)易得且操作简便，方法本身具有很好的线性关系，定量准确，符合《中华人民共和国药典》的要求，操作相对简便、快捷，易于普及推广。
11、应当理解的是，以上的一般描述和后文的细节描述仅是示例性和解释性的，并不能限制本专利技术的公开。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种基于紫外分光光度法的化合物检测方法，其特征见下：
2.根据权利要求1所述的一种基于紫外分光光度法的化合物检测方法，其特征在于，所述方法适用于CAS号为111549-97-4的化合物。
3.根据权利要求1所述的一种基于紫外分光光度法的化合物检测方法，其特征在于，步骤2中，配制不同浓度的样品溶液，包括1.5mg/ml、1.0mg/ml、0.75mg/ml、0.50mg/ml以及0.25mg/ml的样品溶液。
【技术特征摘要】
1.一种基于紫外分光光度法的化合物检测方法，其特征见下：
2.根据权利要求1所述的一种基于紫外分光光度法的化合物检测方法，其特征在于，所述方法适用于cas号为111549-97-4的化合物。
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【专利技术属性】
技术研发人员：韩迅，牟景艳，于卓，陶永健，姜丽君，张占峰，张帅，历永宏，李建平，
申请(专利权)人：长春海伯尔生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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