【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及细胞培养，尤其涉及一种用于γδt细胞的培养基及γδt细胞的培养方法。
技术介绍
1、γδt细胞是一种执行固有免疫功能的t细胞，其被认为是介于天然免疫与获得性免疫之间的特殊免疫细胞类型。大部分γδt细胞不表达cd4、cd8分子，具有特异性识别抗原功能而无mhc限制，在机体肿瘤免疫和感染免疫中发挥着重要的作用。
2、现有技术表明，γδt细胞对肿瘤细胞的杀伤活性与使用的培养基的成分之间存在一定的相关性。例如，cn 201510270659.3公开了一种高效诱导γδt细胞的方法及应用，通过在专用于培养γδt细胞的培养基中包含了一些能促进γδt细胞特异性增殖及分化的组分，从而能够得到数量更多，纯度更高且杀伤活性更强的γδt细胞。因此，有必要提供一种用于γδt细胞的培养基及γδt细胞的培养方法，为开发高效杀伤肿瘤细胞的γδt细胞提供新的方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种用于γδt细胞的培养基及γδt细胞的培养方法，为开发具有高效杀伤肿瘤细胞功能的γδt细胞提供理论基础。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种用于γδt细胞的培养基，以optmizer作为基础培养基，所述optmizer培养基中还含有：浓度为150～250iu/ml的il-2、浓度为40～60μmol/l的il-6、浓度为40～60μmol/l的维生素c、浓度为8～12μmol/l的维生素b3和浓度为3～7μmol
4、优选的，所述optmizer培养基中还含有体积浓度为2～8％的胎牛血清。
5、本专利技术提供了一种所述的培养基在γδt细胞培养中的应用。
6、本专利技术提供了一种杀伤活性提高的γδt细胞的培养方法，将外周血单个核细胞用所述的培养基培养，得到杀伤活性提高的γδt细胞。
7、优选的，所述培养时γδt细胞的初始浓度为1×105～1×107个/ml。
8、优选的，所述培养在温度为36～38℃、co2浓度为4～6％条件下进行。
9、优选的，每培养2～4天对细胞进行换液一次。
10、优选的，所述培养的总时间为10～20天。
11、本专利技术还提供了一种按照所述方法培养得到的γδt细胞。
12、本专利技术进一步提供了一种所述的γδt细胞在制备预防或治疗杀伤肿瘤细胞的产品中的应用。
13、本专利技术提供了一种γδt细胞的培养基，以optmizer作为基础培养基，并添加有il-2、il-6、维生素c、维生素b3和辅酶q10。本专利技术还将制备的γδt细胞的培养基用于培养杀伤活性提高的γδt细胞，可以显著提高培养得到的γδt细胞对a549细胞和hepg2细胞的杀伤率。
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1.一种用于γδT细胞的培养基，其特征在于，以OpTmizer作为基础培养基，所述OpTmizer培养基中还含有：浓度为150～250IU/mL的IL-2、浓度为40～60μmol/L的IL-6、浓度为40～60μmol/L的维生素C、浓度为8～12μmol/L的维生素B3和浓度为3～7μmol/L的辅酶Q10。
2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述OpTmizer培养基中还含有体积浓度为2～8％的胎牛血清。
3.一种权利要求1或2所述的培养基在γδT细胞培养中的应用。
4.一种杀伤活性提高的γδT细胞的培养方法，其特征在于，将外周血单个核细胞用权利要求1或2所述的培养基培养，得到杀伤活性提高的γδT细胞。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述培养时γδT细胞的初始浓度为1×105～1×107个/mL。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述培养在温度为36～38℃、CO2浓度为4～6％条件下进行。
7.如权利要求4～6任一项所述的方法，其特征在于，每培养2～4天对细胞进行换液一次。<...
【技术特征摘要】
1.一种用于γδt细胞的培养基，其特征在于，以optmizer作为基础培养基，所述optmizer培养基中还含有：浓度为150～250iu/ml的il-2、浓度为40～60μmol/l的il-6、浓度为40～60μmol/l的维生素c、浓度为8～12μmol/l的维生素b3和浓度为3～7μmol/l的辅酶q10。
2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述optmizer培养基中还含有体积浓度为2～8％的胎牛血清。
3.一种权利要求1或2所述的培养基在γδt细胞培养中的应用。
4.一种杀伤活性提高的γδt细胞的培养方法，其特征在于，将外周血单个核细胞用权利要求1或2所述的培养基...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢院荣，叶茂，王禹，刘泽坤，
申请(专利权)人：广东壹加再生医学研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：
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