【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学领域，具体涉及一种抗glypican-3的全人源化单域抗体及其应用。
技术介绍
1、在原发性肝癌中，肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,hcc)是最常见的病理分型，约占75％-85％(xu w,jian d,yang h,et al.aggregation-induced emission:application in diagnosis and therapy of hepatocellular carcinoma[j].biosensors and bioelectronics,2024,266)。全球范围内，hcc发病率呈逐年上升的趋势，尤其是在亚洲地区(wang y,deng b.hepatocellular carcinoma:molecularmechanism,targeted therapy,and biomarkers[j].cancer metastasis rev,2023,42(3):629-52)，并且hcc患者(尤其是晚期患者)的总生存率较低，这也使得开发针对特定靶标的、高效的hcc治疗方案尤为重要。
2、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican-3,gpc3)是硫酸乙酰肝素糖蛋白(heparansulfate proteoglycan,hspg)家族成员之一，通过糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,gpi)锚定在细胞表面。截至目前已有多篇研究表明，gpc3在细胞膜表面主要起到调节信号转导的作用(filmus
3、单域抗体(single-domain antibody,sdab)的分子量极小，仅有12-15kda，只含有单个重链可变区(vh)，具有与传统抗体类似的抗原结合亲和力，但结合了小分子和单克隆抗体的优点，具有更高的溶解性、稳定性和特异性(mohseni a,molakarimi m,taghdir m,et al.exploring single-domain antibody thermostability by molecular dynamicssimulation[j].j biomol struct dyn,2019,37(14):3686-96；tang h,gao y,hanj.application progress of the single domain antibody in medicine[j].int j molsci,2023,24(4))，对识别抗原片段具有独特的优势。以上这些特征使得单域抗体在基础研究、诊断和治疗中被大量应用。目前已有超过30种单域抗体化合物正在临床开发中(kunzs,durandy m,seguin l,feral c c.nanobody((r))molecule,a giga medical tool innanodimensions[j].int j mol sci,2023,24(17))，并且也已有研究成功开发出sdab衍生的gpc3靶向immunopet成像策略，在临床前hcc模型中表现出了优秀的诊断准确性(an s,zhang d,zhang y,et al.gpc3-targeted immunopet imaging of hepatocellularcarcinomas[j].eur j nucl med mol imaging,2022,49(8):2682-92)。
技术实现思路
1、针对现有问题的不足，本专利技术的目的是提供一种抗glypican-3的全人源化单域抗体及其应用。本专利技术利用噬菌体展示技术，通过靶向人gpc3蛋白进行抗体筛选，获得了1个抗人gpc3特异性全人源单克隆单域抗体。获得的单域抗体能与人gpc3特异性结合，并能有效抑制wnt信号的活化，为以gpc3为靶标的hcc治疗提供了有效的备选抗体药物，具有潜在的临床应用前景。
2、本专利技术解决其技术问题采用的技术方案是：
3、第一方面，本专利技术保护一种抗glypican-3的全人源化单域抗体，其包括3个重链互补决定区cdr，其中，
4、cdr1的氨基酸序列为seq id no:1的第31-35位氨基酸序列；
5、cdr2的氨基酸序列为seq id no:1的第50-66位氨基酸序列；
6、cdr3的氨基酸序列为seq id no:1的第99-107位氨基酸序列。
7、在具体的实施方案中，所述单域抗体还包括框架区。
8、在更具体的实施方案中，所述单域抗体的框架区fr1为seq id no:1的第1-30位氨基酸序列；所述单域抗体的框架区fr2为seq id no:1的第36-49位氨基酸序列；所述单域抗体的框架区fr3为seq id no:1的第67-98位氨基酸序列；所述单域抗体的框架区fr4为seqid no:1的第108-118位氨基酸序列。
9、在具体的实施方案中，所述抗体选自如下(a1)-本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗Glypican-3的全人源化单域抗体，其包括3个重链互补决定区CDR，其中，CDR1的氨基酸序列为SEQ ID NO:1的第31-35位氨基酸序列；
2.根据权利要求1所述的抗Glypican-3的全人源化单域抗体，其特征在于，所述抗体选自如下(A1)-(A3)中的任一种：
3.权利要求1或2所述的抗Glypican-3的全人源化单域抗体的核酸分子，其序列如SEQID NO:2所示。
4.含有权利要求3所述核酸分子的表达盒。
5.含有权利要求3所述核酸分子的重组载体或含有权利要求4所示表达盒的重组载体。
6.含有权利要求3所述核酸分子的重组微生物、或含有权利要求4所述表达盒的重组微生物、或含有权利要求5所述重组载体的重组微生物。
7.一种药物组合物，其包括治疗或诊断有效量的权利要求1或2所述的抗Glypican-3的全人源化单域抗体，以及药学上可接受的载体。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物进一步包括治疗或诊断有效量的至少一种选自治疗剂、诊断剂和治疗诊断剂
9.权利要求1或2所述的抗Glypican-3的全人源化单域抗体在制备治疗肝细胞癌的药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述治疗包括：向所述受试者施用包括有效量的前文任一项所述的抗Glypican-3的全人源化单域抗体以及可接受的载体的药物组合物。
...【技术特征摘要】
1.一种抗glypican-3的全人源化单域抗体，其包括3个重链互补决定区cdr，其中，cdr1的氨基酸序列为seq id no:1的第31-35位氨基酸序列；
2.根据权利要求1所述的抗glypican-3的全人源化单域抗体，其特征在于，所述抗体选自如下(a1)-(a3)中的任一种：
3.权利要求1或2所述的抗glypican-3的全人源化单域抗体的核酸分子，其序列如seqid no:2所示。
4.含有权利要求3所述核酸分子的表达盒。
5.含有权利要求3所述核酸分子的重组载体或含有权利要求4所示表达盒的重组载体。
6.含有权利要求3所述核酸分子的重组微生物、或含有权利要求4所述表达...
【专利技术属性】
技术研发人员：高威，陈飞燕，刘溪，徐驰，王旭飞，刘晓宇，刘学斌，
申请(专利权)人：南京医科大学，
类型：发明
国别省市：
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