【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，特别是涉及一种医用生物传感检测的新产品和新方法。
技术介绍
1、心血管疾病是一种心脏和血管疾病，具有高患病率和致死率的特点。在众多类型的心血管疾病中，高血压是最为常见的一种，影响着全球约三分之一的成年人。同时，高血压可诱发一系列代谢综合征，由于不同代谢途径的功能障碍会导致脑缺血、动脉粥样硬化、心血管和炎症性疾病的风险增加，因而高血压通常被称为“沉默杀手”。高血压一般缺乏明显症状，传统上通过测量收缩压和舒张压进行诊断。然而，在大多数情况下，这种诊断形式为时已晚，疾病已经造成器官损害。因此，通过监测体液中特定生化标志物的微小变化来进行高血压的早期诊断，可以最大限度地降低器官损伤的风险，提高患者的生活质量。
2、通过监测体液中特定生化标志物的细微变化进行早期检测，可以显著降低器官损伤风险并改善生活质量。研究已发现特定的炎症标志物，如c反应蛋白(crp)、白细胞介素6(il-6)和肿瘤坏死因子-α(tnf-α)，这些标志物在高血压患者中升高。这些标志物为了解与疾病有关的炎症途径提供了宝贵的见解，并可作为早期检测的潜在生物标志物。已采用标准分析方法对炎症因子进行量化，例如酶联免疫吸附测定、表面等离子体共振(spr)和表面增强拉曼散射(sers)。然而，单独监测它们只能提供高血压进展中炎症的不完整情况，高il-6水平表明炎症持续存在，但如果不将其与其他标志物关联起来，就很难评估炎症的严重程度。同样，单独测量crp可能会错过启动炎症级联的细胞因子的作用。通过仅监测il-6或crp，很难衡量治疗对导致高血压的
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种基于nh2-uio-66@aunps的生物传感探针，用于联动监测il-6和crp；建立一个多功能平台，以支持药物发现和伴随诊断。本专利技术预先设计了双目标联动监测探针(dtlm探针)，也就是本专利技术所述双靶标联动监测的生物传感探针。il-6和crp作为关键炎症标志因子，本专利技术以il-6和crp适配体制备的dtlm探针，用于构建糖尿病、抑郁症、骨关节炎、冠心病、高血压等相关疾病的药物评价平台和/或伴随诊断平台。通过用药或伴随诊断过程中，il-6和crp炎症标志表达水平的变化，判断药物或伴随诊断的方法是否产生相应的效果。在本专利技术一项优选的实施方式中，以芪参益气滴丸缓解高血压心脏损害的疗效为例，验证了本专利技术提供了药物评价和/或伴随诊断平台的准确性和有效性。本专利技术所提供的双靶标联动监测的生物传感探针、药物评价和/或伴随诊断监测系统，以及药物评价和/或伴随诊断平台并不局限于高血压，也不局限于糖尿病、抑郁症、骨关节炎、冠心病、高血压等疾病的药物评价及伴随诊断评价，实际上，凡是炎症相关疾病，在用药或伴随诊断过程中il-6和crp的表达水平变化的疾病，均落入本专利技术的范围之内。
2、首先，针对定向固定策略，通过一锅法合成了nh2-uio-66，为其提供了丰富的nh2基团。随后，在nh2-uio-66上原位合成aunps，通过au-n键形成nh2-uio-66@aunps纳米复合物。接下来，通过au-s键将巯基修饰的il-6适配体和crp适配体固定到nh2-uio-66@aunps上，用于特异性识别各个目标物。结合fam修饰的il-6信号链和tamra修饰的crp信号链，完成了dtlm探针的构建。对dtlm探针的优化也进行了研究，以实现il-6和crp联动监测的最佳性能。在il-6和crp存在的情况下，目标物结合相应的适配体，取代了相应的信号链，从而使溶液中荧光信号增强。双重信号输出互不干扰，能够同时检测il-6和crp。此外，根据特定需求，il-6或crp也可以分别检测，使得在单次样本注射中完成多重检测。对于单独检测，il-6的检测范围为1pg/ml到1μg/ml，检测限(lod)为0.350pg/ml，crp的检测范围为1pg/ml到10μg/ml，lod为0.315pg/ml。对于同时检测，il-6和crp的检测范围保持不变，而检测限分别为0.355pg/ml和0.367pg/ml。在优化参数下，快速识别出健康大鼠和高血压大鼠在不同处理下的血清il-6和crp水平的细微差异。本专利技术所述双靶标联动监测的生物传感探针成功探索了中药“芪参益气”的抗炎作用，并评估了其在减轻高血压心脏损伤方面的有效性。此外，双靶标联动监测的生物传感探针准确区分了健康供体和高血压患者的血清il-6和crp水平。更重要的是，所述双靶标联动监测的生物传感探针捕捉到治疗后血清水平的轻微变化，确保抗炎治疗能够准确地应用于最有需求的患者。双靶标联动监测的生物传感探针为双重指标的同步追踪提供了一个有前景的平台，不仅用于药物发现中的机制验证，还可用于伴随诊断以量身定制治疗方案。
3、为了实现上述目的，本专利技术提供了一种双靶标联动监测的生物传感探针，以nh2-uio-66@aunps纳米复合材料为基底材料，所述基底材料上连接有双重监测标志物识别适配体，所述双重监测标志物适配体用以连接监测标志物，所述监测标志物为il-6和crp；在nh2-uio-66表面原位合成aunps，形成nh2-uio-66@aunps纳米复合材料作为基底材料；将il-6适配体和crp适配体通过au-s键连接到nh2-uio-66@aunps上；所述il-6适配体与il-6cdna互补形成双链结构，所述il-6cdna上连接有第一荧光染料；所述crp适配体与crp cdna互补形成双链结构，所述crp cdna上连接有第二荧光染料。
4、优选的是，所述il-6适配体或crp适配体的5’端包含有巯基修饰。
5、上述任一项优选的是，所述il-6适配体为序列如seq id no：1所示的核苷酸序列，在seq id no：1所示的核苷酸序列的5’端包含有巯基修饰，修饰基团的结构式为：
6、
7、上述任一项优选的是，所述il-6cdna包含有如seq id no：3所示的核苷酸序列。
8、上述任一项优选的是，所述crp适配体为序列如seq id no：2所示的核苷酸序列，在seq id no：2所示的核苷酸序列的5’端包含有巯基修饰，修饰基团的结构式为：
9、
10、上述任一项优选的是，所述crp cdna包含有如seq id no：4所示的核苷酸序列。
11、上述任一项优选的是，所述第一荧光染料和所述第二荧光染料的激发光谱不应完全重叠；所述第一荧光染料和所述第二荧光染料的发射光谱分离至不产生信号干扰；所述第一荧光染料和所述第二荧光染料中一种荧光染料的最大发射波长不同于另一种染料的最大激发波长。
12、上述任一项优选的是，所述第一荧光染料和所述第二本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种双靶标联动监测的生物传感探针，以NH2-UiO-66@AuNPs纳米复合材料为基底材料，所述基底材料上连接有监测标志物，其特征在于，所述基底材料上连接有双重监测标志物适配体，所述双重监测标志物适配体用以连接所述监测标志物；所述双重监测标志物适配体为IL-6适配体和CRP适配体；所述监测标志物为IL-6和CRP；在NH2-UiO-66表面原位合成AuNPs，形成NH2-UiO-66@AuNPs纳米复合材料作为基底材料；将IL-6适配体和CRP适配体通过Au-S键连接到NH2-UiO-66@AuNPs上；所述IL-6适配体与IL-6cDNA互补形成双链结构，所述IL-6cDNA上连接有第一荧光染料；所述CRP适配体与CRP cDNA互补形成双链结构，所述CRP cDNA上连接有第二荧光染料。
2.如权利要求1所述的生物传感探针，其特征在于，所述IL-6适配体为序列如SEQ IDNO：1所示的核苷酸序列，在SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列的5’端包含有巯基修饰，修饰基团的结构式为：
3.如权利要求2所述的生物传感探针，其特征在于，所述IL-6cDN
4.如权利要求1所述的生物传感探针，其特征在于，所述CRP适配体为序列如SEQ IDNO：2所示的核苷酸序列，在SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列的5’端包含有巯基修饰，修饰基团的结构式为：
5.如权利要求1所述的生物传感探针，其特征在于，所述CRP cDNA包含有如SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列。
6.如权利要求1-5任一项所述的生物传感探针的制备方法，包括以下步骤：
7.利用权利要求1-6任一项所述的生物传感探针构建的生物传感监测系统。
8.如权利要求7所述的监测系统，其特征在于，
9.如权利要求7所述的监测系统，其特征在于，
10.如权利要求7-9任一项所述的生物传感监测系统在构建药物评价和/或伴随诊断平台中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种双靶标联动监测的生物传感探针，以nh2-uio-66@aunps纳米复合材料为基底材料，所述基底材料上连接有监测标志物，其特征在于，所述基底材料上连接有双重监测标志物适配体，所述双重监测标志物适配体用以连接所述监测标志物；所述双重监测标志物适配体为il-6适配体和crp适配体；所述监测标志物为il-6和crp；在nh2-uio-66表面原位合成aunps，形成nh2-uio-66@aunps纳米复合材料作为基底材料；将il-6适配体和crp适配体通过au-s键连接到nh2-uio-66@aunps上；所述il-6适配体与il-6cdna互补形成双链结构，所述il-6cdna上连接有第一荧光染料；所述crp适配体与crp cdna互补形成双链结构，所述crp cdna上连接有第二荧光染料。
2.如权利要求1所述的生物传感探针，其特征在于，所述il-6适配体为序列如seq idno：1所示的核苷酸序列，在seq id no：1所示的核苷酸序列的5’端包含有巯...
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