【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物医药，具体涉及一种可注射水凝胶微球的制备方法及其应用。
技术介绍
1、传统的给药系统具有固有的局限性，例如靶向性差和治疗指数低，这会导致系统性的副作用并增加治疗的成本和持续时间。为了克服这些缺点，已经为不同的治疗应用开发了各种纳米递送系统。其中，脂质体(自组装脂质囊泡)是迄今为止临床应用研究最多的纳米系统之一。脂质体由微米或纳米大小的磷脂囊泡组成，其膜由磷脂双层组成，将其内部水腔与外部水环境隔离开来。由于其双层磷脂能通过磷酸胆碱头形成的润滑层而具备多孔性和可注射性，从而应用于制药和医学。因为表现出脂质双层，并允许在管腔或双层本身内封装各种生物分子且具有完全生物相容性、无毒，因此在生物学领域备受关注。
2、水凝胶是3d交联的聚合物网络，具有类似于身体组织的高吸水能力，这使它们能够封装药物并在生理条件下保护它们。水凝胶的递送机理通常由被动扩散控制，被动扩散很大程度上取决于水凝胶结构(如水凝胶孔径、交联程度、刺激敏感水凝胶容量等)。然而，由于存在不希望的立即释放药物的可能性，这会增加药物的局部浓度，从而引起意想不到的体内毒性。
3、肌少症是一种影响老年人群的生活质量且与年龄增长密切相关的疾病。线粒体功能障碍是以nad+水平降低引起的能量代谢紊乱为核心，引起骨骼肌衰老的关键。补充烟酰胺单核苷酸(nmn)可提高体内nad+水平改善能量代谢，即便采用上述给药方式，现目前仍然缺乏作用时间长、高效的补充策略。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的上述不足，本申
2、为了解决上述技术问题，本申请采用如下技术方案：
3、一种可注射水凝胶微球的制备方法，具体包括如下步骤：
4、步骤1：nmn脂质体微粒的制备：
5、室温下通过微流控设备将水相和脂相进行组装，获得载有nmn脂质体微粒nmn@lipo-s；其中，在组装过程中，水相流速为700～800μl·min-1，脂相流速为200～300μl·min-1；所述水相为β-烟酰胺单核苷酸水溶液，其浓度为3～5mg/l；所述脂相为脂质体；
6、步骤2：甲基丙烯酰化氧化透明质酸的制备；
7、采用高碘酸钠对透明质酸在室温下进行氧化处理得到氧化透明质酸，对得到的氧化透明质酸进行透析以去除杂质；然后在缓冲液中，采用甲基丙烯酸酐对氧化透明质酸进行修饰，室温下避光反应0.5～2h，过滤烘干后得到水凝胶微球前体物质ahm；其中，高碘酸钠与透明质酸的摩尔比为(1:1)～(5:1)，甲基丙烯酸酐与氧化透明质酸的摩尔比为(1:2)～(1:5)，所述缓冲液为ph为7～9的pbs缓冲液；
8、步骤3：负载nmn脂质体的水凝胶微球的制备：
9、将步骤2得到的ahm与步骤1得到的nmn@lipo-s混合，随后向其中加入引发剂后得到混合物，将该混合物通入微流控设备，使ahm与nmn@lipo-s进行混合组装，并在微流控设备中的混合位置处照射365nm或者405nm紫外光使其进行聚合反应，得到所述水凝胶微球nmn@lipo-s@ahm；
10、其中，按照质量百分比计算，在混合物中，ahm的用量为1％～12％，光引发剂的用量为0.1％～1％，表面活性剂的用量为0.1～2％；在混合物中，nmn@lipo-s浓度为0.1mg/ml～5mg/ml；油相为石蜡油或者二甲基硅油，表面活性剂为span80。
11、优选地，在步骤1中，所述脂质体包括中性脂质、阳离子脂质和ss31；所述中性脂质为胆固醇，所述阳离子脂质由dotap、dlin-k-c3-dma、sm102、dodac组成；其中，胆固醇、dotap、dlin-k-c3-dma、sm102、dodac和ss31的质量比为1:1.8:0.5:0.95:2:(0.12～0.4)。
12、优选地，ss31进行如下预处理：
13、将ss31与dspe-peg2k-nhs酯按摩尔比为(1.0～1.5)：1的比例混合，使用dmso溶解搅拌后，透析冻干，得到dspe-peg2k-ss31粉末。
14、本申请还提供了一种可注射水凝胶微球的应用，上述制备方法制备得到的水凝胶微球用于制备治疗肌少症的药物。
15、与现有技术相比，本申请具有如下有益效果：
16、1、本申请通过将水凝胶的药物递送系统同微流控技术得到的脂质体微粒同整合，利用脂质体材料对nmn包裹，同时在脂质体中引入了线粒体靶向肽ss-31，实现更持久和稳定的释放，从而可使nmn选择性靶向细胞线粒体，提高应用效果。
17、2、本申请所述水凝胶微球(nmn@lipo-s@ahm)中，水凝胶微球负载nmn，实现nad+合成原材料的持续供给、缓释，避免nmn的快速代谢；同时结合使用线立体靶向肽，将nmn向线粒体的靶向递送，达到精准持续改善线粒体能量代谢，从而延缓骨骼肌细胞衰老的目的，为治疗衰老相关疾病(例如肌少症)提供了新的治疗方案，是一种极具潜力的生物材料。
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1.一种可注射水凝胶微球的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，在步骤1中，所述脂质体包括中性脂质、阳离子脂质和SS31；所述中性脂质为胆固醇，所述阳离子脂质由DOTAP、DLin-K-C3-DMA、SM102和DODAC组成；其中，胆固醇、DOTAP、DLin-K-C3-DMA、SM102、DODAC和SS31的质量比为1:1.8:0.5:0.95:2:（0.12~0.4）。
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述SS31进行如下预处理：
4.一种可注射水凝胶微球的应用，其特征在于，权利要求1~3任意所述制备方法制备得到的水凝胶微球用于制备治疗肌少症的药物。
【技术特征摘要】
1.一种可注射水凝胶微球的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，在步骤1中，所述脂质体包括中性脂质、阳离子脂质和ss31；所述中性脂质为胆固醇，所述阳离子脂质由dotap、dlin-k-c3-dma、sm102和dodac组成；其中，胆固醇、dotap、dlin-k-c...
【专利技术属性】
技术研发人员：包微，周建瑜，
申请(专利权)人：重庆市巴南区人民医院，
类型：发明
国别省市：
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