【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因检测领域，具体涉及一种fhv-1和fcv的双重荧光定量pcr检测引物及其应用。
技术介绍
1、随着宠物市场的不断发展，伴侣动物的呼吸道问题也在不断激增，其中呼吸道感染中属fhv-1、fcv最为常见，流行率最高，感染症状较复杂，存在一定的死亡率，对伴侣动物的健康和人类的健康均有严重影响。目前，在临床诊疗过程中，常用的检测方法仍是胶体金试纸条，该方法虽然便捷，但灵敏度较差，尤其fhv-1和fcv感染均存在潜伏期和带毒阶段，此阶段该方法容易出现假阴性的情况。而荧光定量pcr检测方法具有高效、敏感、快捷等特点，已经广泛应用于临床病毒检测，对感染伴侣动物的病原体的早期诊断和预防具有很大的意义。为建立鉴别快速便捷诊断猫疱疹病毒(fhv-1)和猫杯状病毒(fcv)的新型方法，因此需要一种fhv-1和fcv的双重荧光定量pcr检测引物及其应用。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种fhv-1和fcv的双重荧光定量pcr检测引物及其应用。
2、本专利技术通过以下技术方案实现：
3、本专利技术中所述的引物对和探针组合中包含有：
4、1)用于检测猫疱疹病毒病株fhv的引物对和探针，其上游引物的序列为seq idno:1，下游引物的序列为seq id no:2、探针的序列为seq id no:3；
5、2)用于检测猫杯状病毒株fcv的引物对和探针，其上游引物的序列为seq id no:4，下游引物的序列为seq id no:5、探针
6、3)用于作为内参检测的猫外源内标的引物对和探针，其上游引物的序列为seq idno:7，下游引物的序列为seq id no:8、探针的序列为seq id no:9。
7、一种多重荧光定量pcr检测试剂盒，所述的试剂盒中包含有所述的引物对和探针组合。
8、一种用于检测猫疱疹病毒和猫杯状病毒的方法，所述的方法是使用所述的引物对和探针组合进行多重pcr荧光定量检测。
9、进一步地，所述的方法，其中猫疱疹病毒株的引物上下游各0.1μmo l/20μl，探针0.05μmo l/20μl；猫杯状病毒株的引物上下游各0.1μmo l/20μl，探针0.05μmo l/20μl；猫外源内标的引物上下游各0.1μmo l/20μl，探针0.05μmo l/20μl。
10、5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，反应条件为50℃15min 1个循环；95℃2min；95℃15s、60℃30s，40个循环；25℃10s 1个循环。
11、本专利技术采用上述技术方案与现有技术相比，最大的特点在于：
12、本专利技术利用新构建的双重taqman荧光定量pcr进行微囊化预处理，减少了操作过程的环境污染，特异性强、灵敏度高、重复性好，为临床猫呼吸系统疾病病原鉴别诊断和宠物健康监测提供了技术支持。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种用于检测猫疱疹病毒和猫杯状病毒双重荧光定量PCR检测引物对和探针组合，其特征在于，所述的引物对和探针组合中包含有：
2.一种多重荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中包含有权利要求1所述的引物对和探针组合。
3.一种用于检测猫疱疹病毒和猫杯状病毒的方法，其特征在于，所述的方法是使用权利要求1所述的引物对和探针组合进行多重PCR荧光定量检测。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的方法，其中猫疱疹病毒株的引物上下游各0.1μmol/20μL，探针0.05μmol/20μL；猫杯状病毒株的引物上下游各0.1μmol/20μL，探针0.05μmol/20μL；猫外源内标的引物上下游各0.1μmol/20μL，探针0.05μmol/20μL。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，反应条件为50℃15min 1个循环；95℃2min；95℃15s、60℃30s，40个循环；25℃10s 1个循环。
【技术特征摘要】
1.一种用于检测猫疱疹病毒和猫杯状病毒双重荧光定量pcr检测引物对和探针组合，其特征在于，所述的引物对和探针组合中包含有：
2.一种多重荧光定量pcr检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒中包含有权利要求1所述的引物对和探针组合。
3.一种用于检测猫疱疹病毒和猫杯状病毒的方法，其特征在于，所述的方法是使用权利要求1所述的引物对和探针组合进行多重pcr荧光定量检测。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员：静争，
申请(专利权)人：江苏农牧科技职业学院，
类型：发明
国别省市：
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