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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于益生菌组装,尤其涉及一种多酚纳米颗粒组装益生菌的方法和应用。
技术介绍
1、人体肠道微生物与疾病息息相关,例如肥胖、过敏,炎症性肠病、抑郁症、癌症等。肠道微生物群平衡易受到各种内源性因素和外部因素,如食物、抗生素治疗等的影响,导致“肠道失调”,此时口服益生菌有助于恢复肠道菌群的动态平衡。但益生菌在体外生产加工和贮藏期间容易因氧气、温度等造成菌体存活率低,在体内容易因低胃液ph、胆盐、脂酶等的影响造成生物活性差,而只有足够数量的活菌,释放到人体肠道中才能发挥其益生作用。为了保证益生菌的存活率和在人体肠道中定殖与释放,需对益生菌进行包埋。
2、纳米工程组装是一种单细菌包封技术。目前常用的单细菌包封技术主要是金属-多酚网络(mpn)包菌,但是mpn在ph=2的酸性条件下会拆卸,使得益生菌暴露在胃液中,降低了益生菌在口服过程中的胃活性以及肠定殖率。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种多酚纳米颗粒组装益生菌的方法和应用,本专利技术的方法能够保护益生菌在胃液中的活性,提高益生菌在肠道中的定殖率。
2、本专利技术提供了一种多酚纳米颗粒组装益生菌的方法,包括以下步骤:
3、将益生菌、表没食子儿茶素没食子酸酯水溶液、氨基酸和甲醛混合,进行曼尼希缩合反应,完成菌表面多酚纳米颗粒的组装。
4、优选的,所述表没食子儿茶素没食子酸酯水溶液中表没食子儿茶素没食子酸酯的浓度为2.5~3mg/ml。
5、优选的,所述氨基酸的反应
6、优选的,所述益生菌的反应浓度为(1~2)×109cfu/ml。
7、优选的,所述甲醛和益生菌菌悬液的体积比为(1~3):2000。
8、优选的,所述曼尼希缩合反应的反应温度为20~30℃;所述曼尼希缩合反应的反应时间为1min~2h。
9、优选的,在进行曼尼希缩合反应后,还包括对进行曼尼希缩合反应的反应产物进行离心,收集沉淀。
10、优选的,所述益生菌包括大肠杆菌(escherichia coli)nissle 1917和/或植物乳杆菌(lactobacillusplantarum)。
11、本专利技术还提供了上述方案所述的方法得到的益生菌制剂,所述益生菌的表面组装有多酚纳米颗粒。
12、本专利技术还提供了上述方案所述的益生菌制剂在制备益生菌口服产品中的应用。
13、本专利技术提供了一种多酚纳米颗粒组装益生菌的方法,包括以下步骤:将益生菌、表没食子儿茶素没食子酸酯水溶液、氨基酸和甲醛混合,进行曼尼希(mannich)缩合反应,完成菌表面多酚纳米颗粒的组装。本专利技术以egcg水溶液为益生菌菌悬液的悬浮剂,利用植物多酚(egcg)在细胞界面黏附的作用特性,得到表面附着上多酚的益生菌。然后在甲醛(醛基)存在的条件下,益生菌表面的多酚与氨基酸发生曼尼希缩合反应,在短时间内迅速形成纳米颗粒,使得益生菌表面组装上胃不溶、肠溶的egcg-氨基酸纳米颗粒,保护益生菌在胃液中的活性,提高益生菌在肠道中的定殖率。
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1.一种多酚纳米颗粒组装益生菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述表没食子儿茶素没食子酸酯水溶液中表没食子儿茶素没食子酸酯的浓度为2.5~3mg/mL。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述氨基酸的反应浓度为0.5~0.75mg/mL;所述氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、组氨酸、甘氨酸和亮氨酸中的至少一种。
4.根据权利要求1或3所述的方法,其特征在于,所述益生菌的反应浓度为(1~2)×109CFU/mL。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述甲醛和益生菌菌悬液的体积比为(1~3):2000。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述曼尼希缩合反应的反应温度为20~30℃;所述曼尼希缩合反应的反应时间为1min~2h。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在进行曼尼希缩合反应后,还包括对进行曼尼希缩合反应的反应产物进行离心,收集沉淀。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述益生菌包括大肠杆菌(Escherichiaco
9.权利要求1~8任意一项所述的方法得到的益生菌制剂,其特征在于,所述益生菌的表面组装有多酚纳米颗粒。
10.权利要求9所述的益生菌制剂在制备益生菌口服产品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种多酚纳米颗粒组装益生菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述表没食子儿茶素没食子酸酯水溶液中表没食子儿茶素没食子酸酯的浓度为2.5~3mg/ml。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述氨基酸的反应浓度为0.5~0.75mg/ml;所述氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、组氨酸、甘氨酸和亮氨酸中的至少一种。
4.根据权利要求1或3所述的方法,其特征在于,所述益生菌的反应浓度为(1~2)×109cfu/ml。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述甲醛和益生菌菌悬液的体积比为(1~3):2000。
6.根据权利要求1所...
【专利技术属性】
技术研发人员:潘海波,兰苏情,陈士国,刘东红,丁甜,徐恩波,叶兴乾,
申请(专利权)人:浙江大学长三角智慧绿洲创新中心,
类型:发明
国别省市:
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