【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测用微球领域，具体而言，涉及一种表面羟基与羧基化修饰微球及其制备方法。
技术介绍
1、光激发化学发光技术以其高检测精度、高灵敏度、高特异性以及低成本和高效能的均相检测特点，在生物检测领域尤其是激素等小分子检测中显示出显著优势。光激发化学发光技术通过利用纳米级微球作为反应载体，在使用微球作为吸附载体时，往往会存在非特异性吸附的问题，造成非特异性吸附的主要原因是疏水作用和静电作用。静电作用主要是由于蛋白质拥有随机分布在其表面的带正电荷的氨基酸残基以及带负电荷的氨基酸残基，任何带净正电荷材料或者负电荷材料都会非常轻易地吸附蛋白质(电荷吸附)。
2、目前减少非特异性吸附的手段包括对微粒表面进行改性，现有技术中涉及在微球的表面修饰羧基，修饰羧基可以使微球具有改善的亲水性。然而羧基带负电荷，还是会由于静电作用和疏水作用而使非特异性吸附广泛存在，从而影响检测的准确性，但是羧基容易进行抗体偶联，生物微球表面又需要带有羧基。中国专利cn116718782a中记载了一种减少非特异性吸附的方法，其方法为在现有羧基受体微球上结合上含有功能官能团(如羧基、氨基、巯基、醛基等)的聚乙二醇衍生物，使之在检测过程中，由于受体微球表面呈亲水性，减少了蛋白疏水区与微球疏水区的非特异性吸附，从而达到减少干扰的目的。但其描述的工艺复杂，耗时长，操作不便。
3、因此如何制备低耗时、低成本、非特异性吸附低的生物微球，是困扰生物微球领域技术人员多年的一大难题。
技术实现思路
1、本专
2、为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：
3、本专利技术的一个方面，提供一种表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，包括以下步骤：
4、(1)制备高分子微球；
5、(2)对高分子微球表面进行改性处理，使微球表面携带羟基基团；
6、(3)使用氧化剂处理步骤(2)的微球，通过调控所述氧化剂与微球的比例，使微球表面携带的羟基基团中的30％-70％的比例被氧化为羧基，获得表面羟基与羧基化修饰微球。
7、进一步地，在步骤(3)中，所述氧化剂与步骤(2)的微球的质量比为1：0.05-1：2，所述氧化剂选自高碘酸钠和硼氢化钠。
8、在一些实施方式中，在步骤(3)中，所述氧化剂与步骤(2)的微球的质量比为1：0.2至1：1，所述氧化剂优选高碘酸钠。
9、进一步地，所述步骤(2)中使用同时含有羟基和双键的化合物，对微球表面进行改性处理，使微球表面携带羟基基团。
10、进一步地，所述同时含有羟基和双键的化合物选自甲基丙烯酸羟乙酯和3-丁烯-1醇。
11、在一些实施方式中，所述同时含有羟基和双键的化合物优选甲基丙烯酸羟乙酯。
12、在一些实施方式中，所述高分子微球为聚苯乙烯微球。
13、本专利技术的另一个方面，提供一种表面羟基与羧基化修饰聚苯乙烯微球的制备方法，包括以下步骤：
14、(1)将苯乙烯用0.05％ naoh水溶液清洗之后，依次加水和sds，之后搅拌至sds完全溶解，再加入引发剂-过硫酸钾，水浴加热至80℃，继续搅拌，反应2h，获得含聚苯乙烯微球的溶液；
15、(2)向所述聚苯乙烯微球溶液中加入甲基丙烯酸羟乙酯和过硫酸钾，继续反应4h，反应结束后，用乙醇洗去未反应物质，然后干燥，获得表面携带羟基基团的聚苯乙烯微球；
16、(3)将所述表面携带羟基基团的聚苯乙烯微球用水重悬，加入高碘酸钠，室温下搅拌2h，除去未反应物质，然后干燥，获得表面羟基与羧基化修饰聚苯乙烯微球。
17、本专利技术还提供一种羟基与羧基化修饰微球，其通过上述方法制备得到。
18、本专利技术还提供了上述羟基与羧基化修饰微球在化学发光检测中的应用。
19、本专利技术的制备方法及所得到的产物具有如下优点及有益效果：
20、(1)本专利技术制备了一种表面同时修饰有羧基和羟基的高分子微球或聚苯乙烯微球，具有良好的亲水性，同时微球表面结构简单，仅有羟基与羧基基团；另外，相比于表面全部为羧基化修饰的微球，该微球表面有一定的羟基化占比，因此带电荷量更少，可以减少因疏水作用及电荷静电吸附作用而产生的非特异性吸附。
21、(2)本专利技术的制备方法包括在高分子微球表面先修饰羟基化基团，再利用羟基易被氧化的性质，将部分羟基氧化为羧基，形成可以结合蛋白的点位，本专利技术的方法工艺简单、操作简便、耗时短；另外，微球表面携带的羟基与羧基的比例可调，即通过调控所述氧化剂与微球的比例即可实现，本专利技术制备的微球适用性广泛。
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1.一种表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述氧化剂与步骤(2)的微球的质量比为1：0.05-1：2，所述氧化剂选自高碘酸钠和硼氢化钠。
3.如权利要求2所述的表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述氧化剂与步骤(2)的微球的质量比为于1：0.2-1：1，所述氧化剂优选高碘酸钠。
4.如权利要求3所述的表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中使用同时含有羟基和双键的化合物对微球表面进行改性处理，使微球表面携带羟基基团。
5.如权利要求4所述的表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，其特征在于，所述同时含有羟基和双键的化合物选自甲基丙烯酸羟乙酯和3-丁烯-1醇，优选甲基丙烯酸羟乙酯。
6.如权利要求5所述的表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，其特征在于，所述高分子微球为聚苯乙烯微球。
7.如权利要求6所述的表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，其特征在于
8.一种表面羟基与羧基化修饰微球，其特征在于，通过权利要求1-7任一项所述的方法制备得到。
9.权利要求8所述的表面羟基与羧基化修饰微球在化学发光检测中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述的表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述氧化剂与步骤(2)的微球的质量比为1：0.05-1：2，所述氧化剂选自高碘酸钠和硼氢化钠。
3.如权利要求2所述的表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述氧化剂与步骤(2)的微球的质量比为于1：0.2-1：1，所述氧化剂优选高碘酸钠。
4.如权利要求3所述的表面羟基与羧基化修饰微球的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中使用同时含有羟基和双键的化合物对微球表面进行改性处理，使微球表面...
【专利技术属性】
技术研发人员：陶勇，石悦，
申请(专利权)人：智德远见科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：
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