【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及单克隆抗体制备及免疫学检测，具体地，涉及单克隆抗体2f5在自身免疫性疾病和调控b细胞中的应用。
技术介绍
1、自身免疫性疾病（autoimmune diseases，aids）是一类由免疫系统错误地对自身抗原产生免疫反应而引起的疾病。这种病理状态导致免疫系统对机体自身的组织、器官或细胞成分发起攻击，最终引发器官损伤或功能障碍。近年来，多种自身免疫性疾病的发病率呈现出上升趋势，特别是在中青年女性群体中，已成为主要的死亡原因之一。目前已知的自身免疫性疾病种类繁多，接近百种，其中较为常见的包括系统性红斑狼疮（systemic lupuserythematosus，sle）、类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，ra）、原发性干燥综合征（primary sjogren's syndrome，pss）、以及graves病（graves disease，gd）等。
2、b细胞是体液免疫的主要细胞，通过产生能对后续的抗原暴露迅速做出反应的记忆b细胞和能持续分泌抗体的浆细胞来实现免疫效应。这些b细胞亚群可长期维持体液免疫和宿主保护，防止反复感染。b细胞的异常活化和分化在自身免疫病的病理过程中扮演着关键角色，也是自身免疫病患者总体肿瘤风险增加的重要因素之一。b细胞通过向t细胞呈递抗原、产生促炎细胞因子或自身抗体，直接或间接参与自身免疫过程。b细胞的异常活化可能与免疫耐受的破坏、th1/th2细胞平衡失调等因素有关，同时也受到b细胞内信号传导分子如toll样受体（toll-like receptors，t
3、目前利用细胞因子（如白细胞介素-21）调控b细胞的方法，细胞因子的有效浓度窗口小，易产生毒副作用；而基因组修饰技术（如敲除转录因子pax5）调控b细胞的方法，则技术要求高，具有“脱靶”风险；因此，亟需一种简便快捷的方法对其进行调控。
技术实现思路
1、本专利技术的第一个目的是针对现有技术的不足，提供.单克隆抗体2f5在制备治疗自身免疫性疾病药物中的应用，所述单克隆抗体2f5能够特异性结合dead box 解旋酶5（ddx5）蛋白，其为自身抗体，即针对机体自身组织、器官、细胞及其成分的抗体。
2、为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
3、单克隆抗体2f5在制备治疗自身免疫性疾病药物中的应用，所述自身免疫性疾病由b细胞异常分化导致，所述单克隆抗体2f5中，轻链2f5的互补决定区cdr1、cdr2和cdr3分别用lcdr1、lcdr2和lcdr3表示；lcdr1序列为qsvssn，lcdr2序列为gas，lcdr3序列为qqynnwprt。重链2f5的互补决定区cdr1、cdr2和cdr3分别用hcdr1、hcdr2和hcdr3表示；hcdr1序列为gftfsdys，hcdr2序列为itsssgyt，hcdr3序列为arvrsswgpids。
4、作为优选，所述单克隆抗体2f5促进b细胞增殖、活化和分化。
5、本专利技术的第二个目的是提供单克隆抗体2f5在制备促进b细胞增殖、活化或分化制剂中的应用。
6、作为优选，所述b细胞包括ramos、oci-ly-19和原代b细胞。
7、本专利技术的第三个目的是提供一种非诊断、非治疗目的的特异性诱导b细胞增殖、活化或分化的方法，所述方法包括以下步骤：
8、将纯化的单克隆抗体2f5稀释后配制成2f5抗体稀释液，然后处理b细胞。
9、作为优选，所述b细胞包括ramos、oci-ly-19和原代b细胞。
10、本专利技术的第四个目的是提供一种用于自身免疫性疾病的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下成分中的一种或多种：
11、(a)单克隆抗体2f5；
12、(b)编码单克隆抗体2f5的核酸；
13、(c)编码单克隆抗体2f5核酸的表达载体。
14、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
15、本专利技术利用从sle外周血中获得的单克隆自身抗体2f5，通过原代细胞和细胞系实验模型首次证实了其能够促进b细胞增殖、活化和分化，拓展了其在免疫调控领域的应用。该抗体完全人源化、靶向明确，能够极好地模拟自身免疫病患者外周血中高滴度自身抗体的血液微环境，是明确自身抗体的生物学功能，研究自身抗体调控b细胞活化和分化的理想工具。
16、本专利技术中单克隆抗体2f5靶向刺激b细胞的方法，诱导特定的b细胞亚群分化，减少了对非目标细胞的影响，特异性强，可控性高，具有更好的安全性和经济性，并且抗体介导的b细胞激活可以迅速发生，为快速诱导免疫反应提供了可能。本专利技术实现对b细胞分化的精确调控，使b细胞异常分化导致的免疫病理性疾病的治疗干预成为可能，为开发靶向致病性b细胞治疗自身免疫病和肿瘤的新靶点奠定重要的基础。同时，少量的正确抗体也能够显著提升低亲和力b细胞的响应能力，从而生成高亲和力抗体。因此，本专利技术对b细胞反应的精确调控对于疫苗设计、提升疫苗效果以及阻断传染病传播具有重大意义。
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1.单克隆抗体2F5在制备治疗自身免疫性疾病药物中的应用，其特征在于，所述自身免疫性疾病由B细胞异常分化导致；所述单克隆抗体2F5中：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述单克隆抗体2F5促进B细胞增殖、活化和分化。
3.单克隆抗体2F5在制备促进B细胞增殖、活化或分化制剂中的应用，其特征在于，所述单克隆抗体2F5中：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述B细胞包括RAMOS、OCI-LY-19和原代B细胞。
5.一种非诊断、非治疗目的的特异性诱导B细胞增殖、活化或分化的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述B细胞包括RAMOS、OCI-LY-19和原代B细胞。
7.一种用于自身免疫性疾病的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下成分中的一种或多种：
【技术特征摘要】
1.单克隆抗体2f5在制备治疗自身免疫性疾病药物中的应用，其特征在于，所述自身免疫性疾病由b细胞异常分化导致；所述单克隆抗体2f5中：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述单克隆抗体2f5促进b细胞增殖、活化和分化。
3.单克隆抗体2f5在制备促进b细胞增殖、活化或分化制剂中的应用，其特征在于，所述单克隆抗体2f5中：
4.根据权利要求3所述的应用，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：金可挺，吴静，王欢欢，许永超，洪金辉，陈亚伦，董佳雯，柯强，黄悦，
申请(专利权)人：杭州师范大学，
类型：发明
国别省市：
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