【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及鸡育种，具体涉及鸡环状rna gal-svil_0013在促进鸡原代成肌细胞增殖中的应用。
技术介绍
1、我国是鸡肉消费大国，庞大的人口数量为鸡肉消费提供了广阔的市场基础。现在的快节奏生活方式使得快餐迅速发展，肯德基、麦当劳等产品中的炸鸡多使用白羽肉鸡为原料，鸡肉高蛋白、低脂肪、低胆固醇的特点也使得鸡肉受到追求健康饮食及有健身需求的人的追捧。急需培育出高品质的鸡品种，其中关键问题在于开发新的高遗传力的选育指标，筛选出新的调控鸡肌肉发育的关键基因。
2、动物骨骼肌的发育受到一系列复杂严密的调控，在胚胎发育过程中，中胚层的某些细胞逐渐分化为成肌细胞。成肌细胞不断增殖并开始融合，形成多核的肌管，这是骨骼肌发育的起始阶段。随着动物的生长，肌纤维的数量基本不再增加，但肌纤维的直径和长度不断增大。此时，肌肉组织逐渐成熟，其功能也不断完善。成肌细胞是骨骼肌发育的关键细胞。成肌细胞通过一系列的信号调控，进行定向分化，最终融合形成肌纤维。这种融合过程使得肌纤维具有多核的结构特点，为肌肉的收缩功能提供了基础。
3、circrna是一类独特的共价闭环rna分子，没有5'端帽子结构和3'端poly(a)尾巴，这种环状结构使得circrna不能通过典型的rna降解途径降解，需要通过核酸内切酶线性化后才能将其降解，因此具有更高的体内稳定性，半衰期更长。circrna可调节肌肉发生，如直接影响骨骼肌卫星细胞的增殖和分化，这种体内稳定的rna分子或许能够成为筛选调控鸡肌肉发育的关键分子。
4、鸡的svil基因位
技术实现思路
1、本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供了鸡环状rnagal-svil_0013在促进鸡成肌细胞增殖中的应用以及其检测引物。
2、本专利技术的第一个目的是提供一种鸡环状rnagal-svil_0013作为鸡育种标志物的应用。通过检测不同品种鸡中的环状rnagal-svil_0013的表达水平，筛选出鸡肌肉高产的肉鸡品种。
3、本专利技术的第二个目的是提供一种荧光定量pcr检测引物在检测鸡环状rna gal-svil_0013的应用。本专利技术的第三个目的是提供一种鸡环状rnagal-svil_0013在促进成肌细胞增殖的应用。
4、本专利技术的第四个目的是提供一种鸡环状rnagal-svil_0013的过表达载体。
5、本专利技术的第五个目的是提供一种鸡环状rnagal-svil_0013的过表达载体在促进成肌细胞增殖的应用。
6、本专利技术的第六个目的是提供一种鸡环状rnagal-svil_0013在鸡肌肉的生长发育中的应用。
7、为了实现上述目的，本专利技术是通过以下方案予以实现的：
8、专利技术以传统慢速生长型本土肉鸡(云南大围山鸡)以及快速生长型肉鸡(白羽肉鸡)为研究对象，这里以云南大围山鸡以及白羽肉鸡的原代成肌细胞为研究对象，根据circrna的反向剪切位点序列特征设计引物，通过pcr和测序，克隆其全长并测定gal-svil_0013的环形结构。通过rnase r和反转录实验探究gal-svil_0013的分子特性，利用rt-qpcr探究gal-svil_0013在不同时期以及不同组织中的表达水平。通过构建过表达载体，结合rt-qpcr、cck-8试验，探究gal-svil_0013对原代成肌细胞增殖的影响。
9、因此，本专利技术要求保护以下内容：
10、一种鸡环状rna，所述鸡环状rna为gal-svil_0013，其核苷酸序列如seq id no：1所示。
11、seq id no：1：
12、cgaatctcggtttgagatgtcaacgtcaggcagcgctttgtctgccggtggtgaccgtgaaagagggccgcgaaggccgaggcgctatttcactcctggtgaaaatagaaagacttctgagcgatttaaaacccaacctataacgtcagcagaacgaaaggagacggataggtaggcatgtatgtagctctgcgtggcgttgtggtgcaggtctattatgtgtgctgaaataccaactgctgacgatgaagaaaaattagatgaccgagccaaactaagtgtagctgcaaagagactgctttttagatttgaattctgacatctgtcgtcttaggaaatggaaaaatcttttgaaatgaagaatattcctaaaccacctacgagaagctcagcagtagagagaagaatgcggcgtttgcaggacagatcacacacgcagcctattaccagtgaggaagtggtcattgcagctactgaaactacccctgcttcacgttctgtgaatacccacacagtagtggcaagagtacctagtcccactctagttaagagcactgtacaacctaccag。
13、一种鸡环状rnagal-svil_0013的荧光定量pcr检测引物，其核苷酸序列如seq idno：2～3所示。
14、上述荧光定量pcr检测引物在检测鸡环状rnagal-svil_0013的应用。
15、上述鸡环状rna在促进成肌细胞增殖的应用。
16、一种含有鸡环状rna的载体在促进成肌细胞增殖的应用，所述载体含有gal-svil_0013，核苷酸序列如seq id no：1所示。
17、优选地，所述载体为plo5-cir。
18、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
19、本专利技术通过一系列实验证明了gal-svil_0013的存在和在鸡肉成肌过程中的重要应用。包括：1)发现了在肌肉中svil的环状转录本gal-svil_0013，并克隆获得了该环状rna分子的序列全长(图1a)。2)检测到了gal-svil_0013是真实存在的：①具有特异的反向剪切位点(跨本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种鸡环状RNA，其特征在于，所述鸡环状RNA为gal-SVIL_0013，其核苷酸序列如SEQID NO：1所示。
2.鸡环状RNAgal-SVIL_0013的荧光定量PCR检测引物，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示。
3.权利要求2所述的荧光定量PCR检测引物在检测鸡环状RNA gal-SVIL_0013的应用。
4.一种鸡环状RNA的过表达载体在促进成肌细胞增殖的应用，其特征在于，所述载体含有gal-SVIL_0013的过表达序列。
5.权利要求4所述鸡环状RNAgal-SVIL_0013促进鸡成肌细胞增殖的应用。
6.权利要求2所述鸡环状RNA gal-SVIL_0013作为鸡育种标志物的应用。
【技术特征摘要】
1.一种鸡环状rna，其特征在于，所述鸡环状rna为gal-svil_0013，其核苷酸序列如seqid no：1所示。
2.鸡环状rnagal-svil_0013的荧光定量pcr检测引物，其特征在于，其核苷酸序列如seq id no：2和seq id no：3所示。
3.权利要求2所述的荧光定量pcr检测引物在检测鸡环状rna ga...
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