【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药，尤其是涉及一种具有抗氧化特性和抑制α-淀粉酶及高级糖化终产物(ages)活性的新型铁皮石斛多糖的制备方法。
技术介绍
1、抗氧化剂包括天然抗氧化剂和人工合成抗氧化剂。天然抗氧化剂如红三叶提取物、维生素c、e等，因其安全性和高效性受到广泛关注。人工合成抗氧化剂如叔丁基对羟基茴香醚(bha)和二丁基羟基甲苯(bht)虽被广泛使用，但是存在潜在的健康风险，用天然抗氧化剂取代人工合成抗氧化剂在食品领域中应用成为未来发展趋势
2、糖尿病是一种全球性的内分泌代谢疾病，以血糖水平升高为主要特征。据国际糖尿病联盟公布的数据，全球糖尿病患者数量已达数亿，且呈年轻化趋势。糖尿病的发病机制与氧化应激密切相关。氧化应激产生的过量活性氧可直接损伤胰岛β细胞，引起胰岛素分泌减少或胰岛素抵抗，导致血糖升高。抗氧化治疗可减轻氧化应激对胰岛β细胞的损伤，提高胰岛素敏感性，降低胰岛素抵抗，从而有助于降低血糖水平。随着对糖尿病发病机制认识的深入，开发新型、高效、安全的降血糖药物成为研究热点。
3、ages是过量糖和蛋白质结合的产物。人体内的ages主要有两种来源，一种是通过过量的糖和蛋白质之间的一系列反应产生的，另一种是通过摄入食物中所含的ages产生的，这些ages对人体有害，会与组织细胞结合并破坏细胞。研究表明，ages与糖尿病、动脉粥样硬化和阿尔茨海默病等一系列慢性疾病有关，是加速人体疾病和衰老的罪魁祸首。
4、石斛多糖(dop)是石斛中的一种重要生物活性成分，具有抗氧化、降血糖等多种生物活性。然而，传统
技术实现思路
1、针对现有技术存在的上述问题，本专利技术提供了一种具有抗氧化和降血糖活性的石斛多糖的制备方法。本专利技术以铁皮石斛鲜条为原料，可以快速高效地分离并富集具有抗氧化活性、抑制α-淀粉酶及高级糖化终产物(ages)活性的石斛多糖，并拓展本产品在终端食品中的应用。
2、本专利技术的技术方案如下：
3、本专利技术的第一个目的是提供一种铁皮石斛多糖的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
4、(1)将铁皮石斛鲜条清洗干净、切段、加水，匀质成糊状，过滤，收集滤液，制得铁皮石斛匀浆；
5、(2)使用脉冲电场处理铁皮石斛匀浆；
6、(3)向步骤(2)处理后的铁皮石斛匀浆中加入热水，提取多糖；
7、(4)向提取液中依次加入耐高温α-淀粉酶、糖化酶和中性蛋白酶进行酶解，酶解结束后离心，取上清液进行透析、冷冻干燥，制得铁皮石斛多糖(dop)。
8、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(1)中，切段的长度为2-3cm；过滤的残渣再榨取2-3次，合并滤液。
9、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(1)中，匀质时间为5-10min。
10、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(1)中，铁皮石斛鲜条质量与水的体积比为1:5-10g/ml。
11、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(1)中，过滤直接用纱布挤压过滤。
12、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(2)中，脉冲电场处理条件为：电场频率为100-200hz，脉冲宽度6-20μs，电场强度5-15kv/cm。
13、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(3)中，铁皮石斛匀浆与热水的体积比为1:2-5；热水的温度为60℃；提取温度为95-100℃，提取时间为2h。
14、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(3)中，采用酶反应器精确控制温度进行提取。
15、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(4)中，耐高温α-淀粉酶的用量为提取液的0.1-1wt％；反应体系的ph为5.8-6.5，温度为95-100℃，酶解时间为2h。
16、在本专利技术的一种实施方式中，糖化酶的用量为提取液的0.1-1wt％；反应体系的ph值为3-4.5，温度为30-60℃，酶解时间为2h。
17、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(4)中，中性蛋白酶的用量为0.1-1wt％；反应体系的ph值为6.0-8.0，温度为20-60℃，酶解时间为2h。
18、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(4)中，分步依次酶解，每次结束无需灭酶，需调节ph值。
19、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(4)中，离心的条件为8000rpm转速下离心15min。
20、在本专利技术的一种实施方式中，步骤(4)中，透析的条件为在纯水中透析，透析袋截留量为7000da，透析时间为72h。
21、本专利技术的第二个目的是提供一种上述制备方法制得的铁皮石斛多糖。
22、制得的铁皮石斛多糖纯度为85-90wt％，可以抑制α-淀粉酶的活性，抑制ages生成，还具备抗dpph活性。
23、本专利技术的第三个目的是提供一种上述铁皮石斛多糖的应用，用于制备饲料、药品、食品或保健品。
24、本专利技术有益的技术效果在于：
25、本专利技术制备方法可重复性高，并能实现工业化生产。
26、本专利技术制备过程中铁皮石斛匀浆通过脉冲电场处理，会破坏细胞膜的结构，使细胞膜出现穿孔，可以加速石斛多糖的溶出。
27、本专利技术制得石斛多糖具有良好的抗氧化能力和抑制α淀粉酶和ages的能力，对糖尿病的预防和人类的身体健康有益。
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1.一种铁皮石斛多糖的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，切段的长度为2-3cm；过滤的残渣再榨取2-3次，合并滤液。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，脉冲电场处理条件为：电场频率为100-200Hz，脉冲宽度6-20μs，电场强度5-15kv/cm。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，铁皮石斛匀浆与热水的体积比为1:2-5；热水的温度为60℃；提取温度为95-100℃，提取时间为2h。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，耐高温α-淀粉酶的用量为提取液的0.1-1wt％；反应体系的pH为5.8-6.5，温度为95-100℃，酶解时间为2h。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，糖化酶的用量为提取液的0.1-1wt％；反应体系的pH值为3-4.5，温度为30-60℃，酶解时间为2h。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，分步依次酶解，每次结束无需灭酶，需调节pH值。
9.一种权利要求1-8任一项所述制备方法制得的铁皮石斛多糖。
10.一种权利要求9所述铁皮石斛多糖的应用，其特征在于，用于制备饲料、药品、食品或保健品。
...【技术特征摘要】
1.一种铁皮石斛多糖的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，切段的长度为2-3cm；过滤的残渣再榨取2-3次，合并滤液。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，脉冲电场处理条件为：电场频率为100-200hz，脉冲宽度6-20μs，电场强度5-15kv/cm。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，铁皮石斛匀浆与热水的体积比为1:2-5；热水的温度为60℃；提取温度为95-100℃，提取时间为2h。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，耐高温α-淀粉酶的用量为提取液的0.1-1wt％；反应体系的ph为5.8-6...
【专利技术属性】
技术研发人员：董思好，李铖，赵伟，沈金金，
申请(专利权)人：浙江千斛雪酒业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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