【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗体生物学领域，尤其涉及一种dll1抗体及其应用。
技术介绍
1、dll1是一种在哺乳动物体内发现的抗体蛋白质，是notch信号传导途径的重要配体之一。notch信号传导途径在细胞分化、增殖和生长中起关键作用，在多种生物学过程如胚胎发育、组织稳态和疾病进展中发挥作用。notch信号传导与癌症和神经系统疾病的发展相关联，因此检测dll1的存在和表达水平，在癌症研究和神经生物学研究中特别重要。
2、噬菌体展示技术是一种用于筛选和识别蛋白质、肽段、抗体以及其他生物分子的技术。该技术利用噬菌体作为载体，将目标分子的基因插入噬菌体基因组中，使得这些分子可以展示在噬菌体的表面。这种展示方法在生物学和生物
具有广泛应用。噬菌体展示常用于筛选抗体或抗体片段，从而开发出针对特定抗原的高亲和力抗体。
3、在生物学研究中，抗体作为最常用的检测工具广泛应用于免疫组织化学、免疫印迹和免疫荧光等实验技术。研究notch信号传导相关的疾病问题，需要开发dll1抗体来检测、标记人的dll1蛋白。此外，小鼠是常用的动物模型，如何检测小鼠dll1蛋白也是体内动物实验需要解决的问题。
4、因此有必要开发一种可以特异性结合人和小鼠dll1蛋白的抗体，以便在癌症和神经生物学方面进行相关研究。
技术实现思路
1、基于上述问题，本专利技术所要解决的问题在于提供一种可以特异性结合人和小鼠dll1蛋白的抗体及其应用；通过检测dll1抗体的存在和表达水平，以便进行相关生物学研究
2、本专利技术的技术方案如下：
3、一种dll1抗体，包括三个不同的scfv序列，每个scfv序列分别包含3p53、3p47及4p108序列中的一个。
4、一实施例中，上述dll1抗体中，所述scfv序列包含3p53序列时，所述scfv序列的重链可变区的氨基酸序列如seq id no:11所示，所述scfv序列的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:12所示；相应地，所述3p53序列中包括三个重链互补决定区和三个轻链互补决定区；三个所述重链互补决定区分别为hcdr1、hcdr2、hcdr3，三个所述轻链互补决定区分别为lcdr1、lcdr2、lcdr3；其中：
5、当3p53序列为chothia时，hcdr1的氨基酸序列为ggtfssya、hcdr2的氨基酸序列为iipilgia、hcdr3的氨基酸序列为arddiavagnfdy、lcdr1的氨基酸序列为qsistl、lcdr2的氨基酸序列为aas、lcdr3的氨基酸序列为qqsysthsit；或者
6、当3p53序列为kabat时，hcdr1的氨基酸序列为syais、hcdr2的氨基酸序列为riipilgianyaqefqg、hcdr3的氨基酸序列为ddiavagnfdy、lcdr1的氨基酸序列为rtsqsistlln、lcdr2的氨基酸序列为aastlqs、lcdr1的氨基酸序列为qqsysthsit。
7、一实施例中，上述dll1抗体中，scfv序列包含3p53序列时，所述scfv序列的重链可变区的氨基酸序列如seq id no:14所示，所述scfv序列的轻链可变区的氨基酸序列如seqid no:15所示；相应地，所述3p47序列中包括三个重链互补决定区和三个轻链互补决定区；三个所述重链互补决定区分别为hcdr1、hcdr2、hcdr3；三个所述轻链互补决定区分别为lcdr1、lcdr2、lcdr3；其中：
8、当3p47序列为chothia时，hcdr1的氨基酸序列为gytftsy、hcdr2的氨基酸序列为npsggs、hcdr3的氨基酸序列为dssswygdyyygmdv、lcdr1的氨基酸序列为rasqgigdhla、lcdr2的氨基酸序列为aasslqs、lcdr3的氨基酸序列为qqynnyplt；或者
9、当3p47序列为kabat时，hcdr1的氨基酸序列为syymh、hcdr2的氨基酸序列为iinpsggstsyaqkfqg、hcdr3的氨基酸序列为dssswygdyyygmdv、lcdr1的氨基酸序列为rasqgigdhla、lcdr2的氨基酸序列为aasslqs、lcdr1的氨基酸序列为qqynnyplt。
10、一实施例中，上述dll1抗体中，scfv序列包含3p53序列时，所述scfv序列的重链可变区的氨基酸序列如seq id no:17所示，所述scfv序列的轻链可变区的氨基酸序列如seqid no:18所示；相应地，所述4p108序列中包括三个重链互补决定区和三个轻链互补决定区；三个所述重链互补决定区分别为hcdr1、hcdr2、hcdr3，三个所述轻链互补决定区分别为lcdr1、lcdr2、lcdr3；其中：
11、当4p108为chothia时，hcdr1的氨基酸序列为gdtfssy、hcdr2的氨基酸序列为ipilgi、hcdr3的氨基酸序列为ddiavagsfdy、lcdr1的氨基酸序列为rasqsisryln、lcdr2的氨基酸序列为aasslqs、lcdr3的氨基酸序列为qqsysaqyt；或者
12、当4p108序列为kabat时，hcdr1的氨基酸序列为syais、hcdr2的氨基酸序列为riipilgianyaqefqg、hcdr3的氨基酸序列为ddiavagsfdy、lcdr1的氨基酸序列为rasqsisryln、lcdr2的氨基酸序列为aasslqs、lcdr1的氨基酸序列为qqsysaqyt。
13、上述dll1抗体可以用于制备igg抗体或fab抗体，并使igg抗体或fab抗体中包含dll1的重链可变区氨基酸(vh)序列和轻链可变区氨基酸(vl)序列；这样，dll1的vh和vl序列则成为igg抗或fab抗体的一部分；其中，igg抗体包括igg1、igg2、igg3及igg4等抗体。
14、本专利技术还提供一种用于检测肿瘤细胞或癌细胞的检测试剂，该检测试剂包含有上述dll1抗体、igg抗体或者fab抗体。
15、本专利技术提供的dll1抗体包含三个不同的scfv序列，用不同scfv序列分别对应的3p53、3p47及4p108序列来源的vh和vl序列构建与人类和小鼠dll1具有较高的亲和力的3p53-igg、3p47-igg及4p108-igg抗体，这些抗体能识别人类和小鼠dll1蛋白分子、细胞膜表达的dll1和组织表达的dll1，可用于elisa、wb、ihc等检测方法，使得dll1在检测分子、细胞及组织水平方面具有较好的应用前景；同时，三个不同的scfv序列可分别同时结合人类和小鼠来源的dll1抗原，具有不须进行种属改造即可用于人类dll1相关疾病的动物模型的检测及功能评价的用途前景。
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1.一种DLL1抗体，其特征在于，所述DLL1抗体包括三个不同的scFv序列，每个scFv序列分别包含3P53、3P47及4P108序列中的一个。
2.根据权利要求1所述的DLL1抗体，其特征在于，所述scFv序列包含3P53序列时，所述scFv序列的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示，所述scFv序列的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示。
3.根据权利要求2所述的DLL1抗体，其特征在于，所述3P53序列中的三个重链互补决定区HCDR1、HCDR2、HCDR3的氨基酸序列及所述3P53序列中的三个轻链互补决定区LCDR1、LCDR2、LCDR3的氨基酸序列分别如下：
4.根据权利要求1所述的DLL1抗体，其特征在于，所述scFv序列包含3P47序列时，所述scFv序列的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示，所述scFv序列的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示。
5.根据权利要求4所述的DLL1抗体，其特征在于，所述3P47序列中的三个重链互补决定区HCDR1、H
6.根据权利要求1所述的DLL1抗体，其特征在于，所述scFv序列包含4P108序列时，所述scFv序列的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:17所示，所述scFv序列的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:18所示。
7.根据权利要求6所述的DLL1抗体，其特征在于，所述4P108序列中的三个重链互补决定区HCDR1、HCDR2、HCDR3的氨基酸序列及所述4P108序列中的三个轻链互补决定区LCDR1、LCDR2、LCDR3的氨基酸序列分别如下：
8.一种IgG抗体，其特征在于，该IgG抗体中包含有权利要求1至7任一所述DLL1抗体的重链可变区的氨基酸序列和轻链可变区的氨基酸序列。
9.一种Fab抗体，其特征在于，该Fab抗体中包含有权利要求1至7任一所述DLL1抗体的重链可变区的氨基酸序列和轻链可变区的氨基酸序列。
10.一种用于检测肿瘤细胞或癌细胞的检测试剂，其特征在于，该检测试剂包含有权利要求1至7任一所述的DLL1抗体，或者包含有权利要求8所述的IgG抗体，或者包含有权利要求9所述的Fab抗体。
...【技术特征摘要】
1.一种dll1抗体，其特征在于，所述dll1抗体包括三个不同的scfv序列，每个scfv序列分别包含3p53、3p47及4p108序列中的一个。
2.根据权利要求1所述的dll1抗体，其特征在于，所述scfv序列包含3p53序列时，所述scfv序列的重链可变区的氨基酸序列如seq id no:11所示，所述scfv序列的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:12所示。
3.根据权利要求2所述的dll1抗体，其特征在于，所述3p53序列中的三个重链互补决定区hcdr1、hcdr2、hcdr3的氨基酸序列及所述3p53序列中的三个轻链互补决定区lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列分别如下：
4.根据权利要求1所述的dll1抗体，其特征在于，所述scfv序列包含3p47序列时，所述scfv序列的重链可变区的氨基酸序列如seq id no:14所示，所述scfv序列的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:15所示。
5.根据权利要求4所述的dll1抗体，其特征在于，所述3p47序列中的三个重链互补决定区hcdr1、hcdr2、hcdr3的氨基酸序列及所述3p47序列中的三个轻链互补...
【专利技术属性】
技术研发人员：马丽雅，王中胜，江亭，
申请(专利权)人：深圳市先康达生命科学有限公司，
类型：发明
国别省市：
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