【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种蛋白/多肽-药物偶联方法。
技术介绍
1、随着生物技术的快速发展，靶向治疗在复杂疾病的治疗中日益受到关注。多肽-药物偶联(pdcs)和抗体-药物偶联(adcs)作为靶向治疗的重要手段，凭借其优越的特异性和有效性，逐渐成为研究和临床应用的热点。这些技术通过将肽或抗体的靶向特异性与常规药物的效力相结合，能够显著提高对多种疾病的治疗特异性、靶向性和有效性，同时降低了对正常细胞的毒性，并增强药物的治疗效果。当前，已有多种pdcs或adcs在处于临床试验中，部分已经在市场上获批，并应用于临床治疗，如mylotarg和polivy等。这些药物的成功上市证明了靶向治疗在抗肿瘤领域的潜力，也推动了相关偶联技术的进一步发展。
2、目前，蛋白/多肽-药物偶联的方法主要包括蛋白质工程、生物偶联和化学偶联等技术。其中，蛋白质工程方法能够实现精确设计和定点标记，但通常工艺复杂且成本较高。生物偶联方法具有高度特异性，适合在复杂生物环境中应用，但其效果受到酶稳定性和背景干扰的限制。相比之下，化学偶联方法因其操作简单和高效受到广泛关注，例如常见的半胱氨酸(烷基化和交联化)和赖氨酸(酰化或烷基化)偶联的创新方法，以及扩展到基于羰基、酰胺、叠氮基的偶联技术等(chem.soc.rev.2021,50,14801494；chembiochem 2023,24,e202300254)。但因药物结构及其释放等方面的因素，许多偶联技术可能面临选择性不足和稳定性差的挑战，并且部分方法所使用的金属试剂在某些情况下可能对生物体
技术实现思路
1、针对上述技术问题以及本领域存在的不足之处，本专利技术提供了一种蛋白/多肽-药物偶联方法，条件简单、反应高效、反应位点选择性高，可实现多种药物与不同多肽/蛋白(例如抑肽酶等)的偶联，且可释放药物分子，保留药物分子药效活性。
2、一种蛋白/多肽-药物偶联方法，包括方法i或方法ii；
3、方法i：将水杨醛衍生物、苯硼酸衍生物和二级胺混合反应，然后与含有赖氨酸的多肽和/或蛋白混合反应，完成蛋白/多肽-药物偶联；以多肽(peptide)为例，方法i反应通式如图32所示，其中r4-nh-r5表示二级胺，aa表示氨基酸，k表示赖氨酸；
4、方法ii：将水杨醛衍生物、芳炔基三氟硼酸钾衍生物以及含有色氨酸的多肽和/或蛋白混合反应，完成蛋白/多肽-药物偶联；
5、所述水杨醛衍生物具有如下所示结构：
6、
7、所述苯硼酸衍生物具有如下所示结构：
8、
9、所述芳炔基三氟硼酸钾衍生物具有如下所示结构：
10、
11、r1、r2、r3分别独立表示h或者一个或多个取代基(例如c1～c4烷氧基等)，且r1、r2、r3中的一个或多个包含至少一个可断裂释放药物分子的药物分子基团。
12、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，方法i中含有赖氨酸的多肽和/或蛋白、方法ii中含有色氨酸的多肽和/或蛋白可分别独立为游离的多肽和/或蛋白、连接在树脂上的多肽和/或蛋白中的一种或几种。进一步的，所述树脂可包括2-cl-trt、rink-amide-mbha中的一种或多种。当使用到连接在树脂上的多肽和/或蛋白时，可进一步通过三氟乙酸(tfa)/三异丙基硅烷(tips)/水的混合溶液进行切割，得到蛋白/多肽-药物偶联物。更进一步的，三氟乙酸(tfa)/三异丙基硅烷(tips)/水的混合溶液中三氟乙酸、三异丙基硅烷和水的体积比可为95:1:4。
13、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，方法i可在第一溶剂中进行。
14、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，方法ii可在第二溶剂中进行。
15、进一步的，所述第一溶剂、所述第二溶剂可分别独立选自乙腈、1,2-二氯乙烷、甲苯、甲醇、pbs缓冲溶液、n,n-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、1,4-二氧六环、水中的一种或几种混合。
16、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，方法i、方法ii的反应温度可分别独立选自室温至120℃，例如80℃等。
17、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，断裂释放的药物分子可分别独立选自布洛芬、萘普生、芬布芬、吲哚美辛、双氯芬酸等中的至少一种。
18、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，所述药物分子基团可通过断裂酯键、酰胺键中的一种或多种释放所述药物分子。酯键、酰胺键是相对容易断裂的化学键，有利于有效释放所述药物分子并起效。
19、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，所述二级胺可为2-甲基四氢吡咯、二乙基胺、二丁基胺、n-甲基苯胺、四氢吡咯、2,2’-二甲基四氢吡咯、2-(二苯甲基)吡咯烷、脯氨酰胺、脯氨醇、哌啶、3,5-二甲基哌啶、哌嗪、吗啉等中的一种或多种。
20、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法无金属参与。
21、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，方法i中所述含有赖氨酸的多肽和/或蛋白、方法ii中所述含有色氨酸的多肽和/或蛋白可分别独立具有穿膜性、靶向特异性中的一种或多种性质。
22、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，r1、r2、r3中的一个或多个可包含至少一个具有荧光性质的基团。
23、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，所述水杨醛衍生物可选自以下任意一种或多种：
24、
25、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，所述苯硼酸衍生物可选自以下任意一种或多种：
26、
27、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，所述芳炔基三氟硼酸钾衍生物可为：
28、
29、所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，方法i中所述含有赖氨酸的多肽、方法ii中所述含有色氨酸的多肽可分别独立具有2～50个氨基酸。
30、本专利技术还提供了一种蛋白/多肽-功能性分子偶联方法，所述功能性分子可为具有荧光性质的分子等，类似方法i、方法ii，其中r1、r2、r3可不必然要求它们中的一个或多个包含至少一个可断裂释放药物分子的药物分子基团，取而代之的是，r1、r2、r3中的一个或多个包含至少一个功能性分子基团，例如具有荧光性质的分子基团等，当然r1、r2、r3中的一个或多个还可包含至少一个可断裂释放药物分子的药物分子基团。所述的蛋白/多肽-功能性分子偶联方法，技术方案和参数条件等的进一步具体选择可参照上文介绍的蛋白/多肽-药物偶联方法。
31、本专利技术与现有技术相比，有益效果有：
32、本专利技术方法条件简单、反应高效、反应位点选择性高，可实现多种药物、功能性分子与不同多肽/蛋白(例如抑肽酶等)的偶联，且可释放药物分子，保留药物分子药效活性和功能性分子的原有功能。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，包括方法I或方法II；
2.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，方法I中含有赖氨酸的多肽和/或蛋白、方法II中含有色氨酸的多肽和/或蛋白分别独立为游离的多肽和/或蛋白、连接在树脂上的多肽和/或蛋白中的一种或几种；
3.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，方法I在第一溶剂中进行；
4.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，方法I、方法II的反应温度分别独立选自室温至120℃。
5.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，断裂释放的药物分子分别独立选自布洛芬、萘普生、芬布芬、吲哚美辛、双氯芬酸中的至少一种。
6.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，所述药物分子基团通过断裂酯键、酰胺键中的一种或多种释放所述药物分子。
7.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，所述二级胺为2-甲基四氢吡咯、二乙基胺、二丁基胺、N-甲基苯胺、四氢吡咯、2,2’-二甲基
8.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，所述蛋白/多肽-药物偶联方法无金属参与；
9.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，R1、R2、R3中的一个或多个包含至少一个具有荧光性质的基团。
10.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，所述水杨醛衍生物选自以下任意一种或多种：
...【技术特征摘要】
1.一种蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，包括方法i或方法ii；
2.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，方法i中含有赖氨酸的多肽和/或蛋白、方法ii中含有色氨酸的多肽和/或蛋白分别独立为游离的多肽和/或蛋白、连接在树脂上的多肽和/或蛋白中的一种或几种；
3.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，方法i在第一溶剂中进行；
4.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，方法i、方法ii的反应温度分别独立选自室温至120℃。
5.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药物偶联方法，其特征在于，断裂释放的药物分子分别独立选自布洛芬、萘普生、芬布芬、吲哚美辛、双氯芬酸中的至少一种。
6.根据权利要求1所述的蛋白/多肽-药...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。