【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物分子低温胁迫领域，具体涉及cmock1基因在创制黄瓜耐低温砧木中的应用。
技术介绍
1、黄瓜(cucumis sativus l)是我国重要的设施果菜作物，种植面积和产量均位居世界首位。黄瓜是典型的喜温蔬菜，低温耐受性差，越冬茬育苗和定植初期容易受到低温胁迫(<10℃)，导致生理障碍和化瓜，果实产量和品质大幅降低，重则减产30％以上，减收约10万元/公顷，造成严重经济损失。嫁接作为提高低温耐受性的有效手段已经成为日光温室黄瓜冬春季栽培的配套措施之一，南瓜砧木不仅能保持黄瓜栽培品种的优良性状，还提高了抗病及抗逆性，尤其是低温耐受性。然而不同砧木调控的黄瓜优势不同，如黑籽南瓜抗逆强但嫁接的黄瓜品质较差，白籽南瓜嫁接黄瓜品质较好但抗逆性不稳定。生产中急需一些具有多重性状(同时保持品质和提高抗性、易繁殖)的砧木，既能提高低温耐受性又能保持黄瓜原有的果实品质，因此南瓜砧木改良及砧穗互作的机制一直是植物嫁接领域的研究热点。
2、前期课题组利用组学及分子生物学手段验证挖掘出南瓜耐低温的关键基因胆碱激酶cmock1，分析发现其mrna能通过南瓜砧木长距离运输至黄瓜接穗并提高嫁接黄瓜的低温耐受性。但是否能通过过表达cmock1转基因创制黄瓜专用耐低温砧木，嫁接黄瓜后提高黄瓜品种的低温耐受性尚不清楚。
技术实现思路
1、针对现有市场上黄瓜栽培生产中多重性状(同时保持品质和提高耐低温性、易繁殖)的砧木材料不足的缺陷，本专利技术目的是提供一种通过过表达cmock1基因创
2、本专利技术构建了一套蔬菜作物黄瓜毛状根遗传和稳定遗传转化方法，得到过表达cmock1基因的转基因黄瓜，进行其响应低温的生理及基因表达分析，最后将过表达黄瓜和野生型嫁接探究过表达cmock1基因对黄瓜抗冷性的影响。
3、为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案是：
4、cmock1基因在黄瓜耐低温中的应用，
5、所述cmock1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
6、cmock1基因在创制黄瓜耐低温砧木中的应用，
7、所述cmock1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
8、优选的，
9、所述cmock1基因的编码蛋白的氨基酸序列如seq id no.2所示。
10、优选的，
11、通过在黄瓜植株中提高cmock1基因的表达量，提高黄瓜植株的耐低温能力。
12、用于扩增所述cmock1基因的引物对，所述引物对的核苷酸序列如seq id no.9-10所示。
13、一种耐低温黄瓜的选育方法，
14、通过提高黄瓜植株中cmock1基因的表达量，提高黄瓜植株的耐低温能力；所述cmock1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
15、优选的，包括如下步骤：
16、1)扩增cmock1基因，得到扩增产物；
17、2)确定酶切位点为xbai、kpni，将所述扩增产物连接到载体pcambia1305-35s:c-gus-noster-35s:c-gfp-noster上，获得过表达载体pcambia1305-35s::cmock1-gus-noster-35s:c-gfp-noster，测序正确后提取质粒；
18、3)将过表达载体pcambia1305-35s::cmock1-gus-noster-35s:c-gfp-noster转入农杆菌gv3101感受态中，通过浸染黄瓜子叶的方法进行黄瓜的遗传转化；
19、4)通过对过表达载体pcambia1305-35s::cmock1-gus-noster-35s:c-gfp-noster上的gfp序列扩增以及植株cmock1的qrt-pcr检测获得cmock1基因的过表达株系。
20、一种创制黄瓜耐低温砧木的方法，
21、通过遗传转化得到过表达cmock1基因的黄瓜，过表达cmock1基因的做砧木进行嫁接，获得耐低温砧木；
22、所述cmock1基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
23、本专利技术的有益效果是：
24、本专利技术具有解析南瓜砧木调控黄瓜低温耐受性的分子机理的创新性，补充和完善嫁接提高抗冷性的机制，为未来黄瓜耐冷砧木品种创制提供新的思路，是一套兼具科学性、创新性和实用性的科学研究方法。
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1.CmoCK1基因在黄瓜耐低温中的应用，其特征在于，
2.CmoCK1基因在创制黄瓜耐低温砧木中的应用，其特征在于，
3.根据权利要求1或2的应用，其特征在于，
4.根据权利要求1或2的应用，其特征在于，
5.用于扩增如权利要求1或2中所述CmoCK1基因的引物对，其特征在于：所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.9-10所示。
6.一种耐低温黄瓜的选育方法，其特征在于，
7.根据权利要求6所述的一种耐低温黄瓜的选育方法，其特征在于，包括如下步骤：
8.一种创制黄瓜耐低温砧木的方法，其特征在于，
【技术特征摘要】
1.cmock1基因在黄瓜耐低温中的应用，其特征在于，
2.cmock1基因在创制黄瓜耐低温砧木中的应用，其特征在于，
3.根据权利要求1或2的应用，其特征在于，
4.根据权利要求1或2的应用，其特征在于，
5.用于扩增如权利要求1或2中所述cmo...
【专利技术属性】
技术研发人员：张文娜，张淼，王翠翠，王闹闹，刘雯倩，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：
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