【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，具体涉及一种重组嵌合蛋白包涵体的纯化与复性方法。
技术介绍
1、目前来说，高效表达质粒构建的大肠杆菌工程菌在大量合成异源蛋白质时，一般情况下以不溶性包涵体的形式存在于细菌细胞内。包涵体由高度聚集的外源蛋白质、核酸、蛋白质合成酶及核糖体组成。其中大部分是克隆外源基因的表达产物，它们具有工程菌表达的外源基因的正确的氨基酸序列，但空间构象往往是错误的。包涵体的外源蛋白质是没有生物活性的，需经细胞裂解、提取、洗涤后，再经变性、复性、纯化步骤才能得到可溶的有活性的蛋白质。外源蛋白质序列中如果同时含有半胱氨酸，则其往往形成错误交联的二硫键。这易使蛋白质在纯化复性的过程中形成不溶性的聚集体。在纯化复性过程中，必须解决二硫键的正确配对。
技术实现思路
1、为了解决以上技术问题，本专利技术提供了一种重组嵌合蛋白包涵体的纯化和复性方法，所述的方法包括：
2、（1）包涵体制备，处理发酵培养后的菌体获得包涵体；
3、（2）包涵体溶解，将包涵体采用变性液溶解，获得包含外源蛋白的包涵体变性液；
4、（3）蛋白质纯化和复性，包括将包涵体变性液用金属离子螯合亲和层析进行纯化和复性，
5、其中，所述包涵体复性液包含精氨酸。
6、优选地，所述的步骤（1）中处理发酵培养后的菌体包括菌体的破碎和沉淀的收集、洗涤、离心。
7、优选地，所述步骤（2）中的变性液包括4~10m尿素，10~100m tris，0~10mm edta，0~2
8、优选地，所述步骤（3）中的包涵体复性液包含0.1~1.0m的l-精氨酸。
9、优选地，所述的重组嵌合蛋白包括任意的含组氨酸标签的重组嵌合蛋白，如细胞因子、免疫原性蛋白等。
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1.一种重组嵌合蛋白包涵体复性与纯化的方法，其特征在于，所述的方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤（1）中处理发酵培养后的菌体包括菌体破碎、沉淀收集、洗涤、离心。
3. 根据权利要求1-2任一所述的方法，其特征在于，所述的步骤（2）中变性液包括 10-50 mmol/L Tris，0.1-0.5 mol/L NaCl，4.0-10.0 mol/L尿素，0-100 mmol/L β-巯基乙醇，2％Triton。
4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，所述的步骤（3）中的包涵体复性液包含0-1.0mol/L的L-精氨酸。
【技术特征摘要】
1.一种重组嵌合蛋白包涵体复性与纯化的方法，其特征在于，所述的方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤（1）中处理发酵培养后的菌体包括菌体破碎、沉淀收集、洗涤、离心。
3. 根据权利要求1-2任一所述的方法，其特征在于，所述的步骤（2）中变性液包括 1...
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