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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及检测恩诺沙星,尤其涉及一种pbtzm荧光探针的合成方法及其应用。
技术介绍
1、恩诺沙星(enrofloxacin,enr),也称为乙基环丙沙星,是一种合成的第三代氟喹诺酮类抗生素,常用于治疗动物的各种细菌感染。然而,长期食用含有过量恩诺沙星的动物产品会对人类健康构成潜在威胁,如头晕、呼吸困难、失眠、意识模糊、肝损伤,甚至加剧胶原诱导性关节炎的严重程度。因此,许多国家和组织已经为enr的最大残留限量(mrl)制定了法律标准,根据动物产品的不同,mrl从100μg/kg到500μg/kg不等。到目前为止,已经开发了许多检测enr的分析方法,包括高效液相色谱-质谱(hplc-ms)、毛细管电泳(ce)、高效液相色谱仪(hplc)、电化学法(ec)、化学发光法和表面等离子体共(spr)。虽然这些方法有优点,但一些耗时、设备昂贵、操作复杂的缺陷限制了检测效率。因此,现在仍然迫切需要开发新的检测方法,因此需要一种pbtzm荧光探针的合成方法及其应用。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是为了解决现有技术问题而提出的一种pbtzm荧光探针的合成方法及其应用。
2、为了实现上述目的,本专利技术采用了如下技术方案:
3、本专利技术一种pbtzm荧光探针,所述荧光探针的化学名称为:2-[4-(4-二甲基氨基苯基)-1,3-丁二烯基]-3-甲基苯并[d]噻唑-3h-碘化物。结构如式(i)所示:
4、
5、一种pbtzm荧光探针的合成方法,包
6、(1)将2-甲基苯并噻唑和4-(二甲基氨基)肉桂醛按照mol比1:1混合后加入叔丁醇钾和dmf溶液,在80℃反应,加入二氯甲烷萃取后洗涤,分液,旋蒸出去多余溶剂柱层析纯化,得到2-[4-(4-二甲基氨基苯基)-1,3-丁二烯基]-苯并噻唑;
7、(2)将2-[4-(4-二甲基氨基苯基)-1,3-丁二烯基]-苯并噻唑溶于ch3cn中,加入碘甲烷85℃反应回流,常温反应完成后加入二氯甲烷萃取后洗涤,分液,旋蒸出去多余溶剂柱层析纯化得到化合物pbtzm。
8、进一步地,2-甲基苯并噻唑与叔丁醇钾的添加质量比为1:0.75。
9、进一步地,2-甲基苯并噻唑与dmf溶液的添加质量-体积比为0.03g/ml。
10、进一步地,2-[4-(4-二甲基氨基苯基)-1,3-丁二烯基]-苯并噻唑与碘甲烷的质量-体积比为0.98g/ml。
11、一种所述的pbtzm荧光探针在检测恩诺沙星含量中的应用,以合成的pbtzm为荧光染料,恩诺沙星核酸适配体为识别单元,将恩诺沙星核酸适配体、pbtzm加入到tris-hcl缓冲溶液中,加入待测物恩诺沙星后诱导核酸适配体结构改变引起体系荧光信号改变,检测体系荧光强度值,计算获得待测物含量,所述恩诺沙星的核酸适配体为:enr-aptamer:5’-ccc atc agg ggg cta ggc taa cac ggt tcg gct ctc tga gcc cgg gtt att tca ggggga-3。
12、进一步地,测定溶液荧光值的参数为554nm处为激发光波长,594~656nm范围处为发射波长。
13、相比现有技术,本专利技术的有益效果为:
14、本专利技术的有益效果在于:本专利技术合成了一种新型的荧光探针pbtzm,并构建了一种免标记的核酸适配体传感器用于enr的检测.只需简单混合即可一步得到荧光适配体传感器,并且无需添加其他高成本材料,检测成本低。
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1.一种PBTZM荧光探针,其特征在于:所述荧光探针的化学名称为:2-[4-(4-二甲基氨基苯基)-1,3-丁二烯基]-3-甲基苯并[d]噻唑-3H-碘化物。结构如式所示:
2.一种PBTZM荧光探针的合成方法,其特征在于:
3.根据权利要求2所述的一种PBTZM荧光探针的合成方法,其特征在于:2-甲基苯并噻唑与叔丁醇钾的添加质量比为1:0.75。
4.根据权利要求2所述的一种PBTZM荧光探针的合成方法,其特征在于:2-甲基苯并噻唑与DMF溶液的添加质量-体积比为0.03g/mL。
5.根据权利要求2所述的一种PBTZM荧光探针的合成方法,其特征在于:2-[4-(4-二甲基氨基苯基)-1,3-丁二烯基]-苯并噻唑与碘甲烷的质量-体积比为0.98g/mL。
6.一种如权利要求1所述的PBTZM荧光探针在检测恩诺沙星含量中的应用,其特征在于:以合成的PBTZM为荧光染料,恩诺沙星核酸适配体为识别单元,将恩诺沙星核酸适配体、PBTZM加入到Tris-HCl缓冲溶液中,加入待测物恩诺沙星后诱导核酸适配体结构改变引起体系荧光信号
7.根据权利要求6所述的引用,其特征在于:测定溶液荧光值的参数为554nm处为激发光波长,594~656nm范围处为发射波长。
...【技术特征摘要】
1.一种pbtzm荧光探针,其特征在于:所述荧光探针的化学名称为:2-[4-(4-二甲基氨基苯基)-1,3-丁二烯基]-3-甲基苯并[d]噻唑-3h-碘化物。结构如式所示:
2.一种pbtzm荧光探针的合成方法,其特征在于:
3.根据权利要求2所述的一种pbtzm荧光探针的合成方法,其特征在于:2-甲基苯并噻唑与叔丁醇钾的添加质量比为1:0.75。
4.根据权利要求2所述的一种pbtzm荧光探针的合成方法,其特征在于:2-甲基苯并噻唑与dmf溶液的添加质量-体积比为0.03g/ml。
5.根据权利要求2所述的一种pbtzm荧光探针的合成方法,其特征在于:2-[4-(4-二甲基氨基苯基)-1,3-丁二烯基]-苯并噻唑与碘甲烷的质量-体积比为0.9...
【专利技术属性】
技术研发人员:亢延飞,梁亭,孟雅莉,孔维闯,
申请(专利权)人:河北北方学院,
类型:发明
国别省市:
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