【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农业微生物及生物防治领域，具体涉及一种用于蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂及其制备方法与应用。
技术介绍
1、蔬菜土传病害是蔬菜生产大敌，随着连作年限增加，问题越显突出，发病率最高可达40％-50％。研究分析表明：作物连作障碍是由植物、土壤和微生物共同作用形成。主要原因包括土壤理化性质变化、土壤生态环境变异和植物自毒。这三种机制相互作用，共同限制作物增产稳产。文献分析显示，上述三种原因中植物占34％、土壤占22％而微生物占44％，因此生物因素成为连作障碍的关键因素。
技术实现思路
1、本专利技术克服现有技术的不足，提供一种用于蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂，具有广谱促生，对多种蔬菜，土传病原菌有抑制作用，对叶类蔬菜，对瓜类蔬菜，对薯类有促生作用。
2、为解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案为：
3、一种用于蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂，所述混合菌剂中含有蜡样芽孢杆菌(bacillus cereus)bc1、枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)bs2和短小芽孢杆菌(bacillus pumilus)bc3；
4、蜡样芽孢杆菌(bacillus cereus)bc1的保藏编号为cgmcc no.32167，枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)bs2的保藏编号为cgmcc no.32165，短小芽孢杆菌(bacilluspumilus)bc3的保藏编号为cgmcc no.32166。
6、筛选出，于2024年10月10日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，其地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；其保藏编号为cgmcc no.32167。枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)bs2分离筛选自山西太原小店区菜田有机肥土壤内，从200多个细菌菌株中筛选。
7、筛选出，于2024年10月10日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，其地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；其保藏编号为cgmcc no.32165。
8、本专利技术的短小芽孢杆菌(bacillus pumilus)bc3分离自山西太原菜田有机肥土壤内，从200个细菌菌株中筛选。
9、筛选出，于2024年10月10日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，其地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；其保藏编号为cgmcc no.32166。
10、本专利技术还提供上述一种用于蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：
11、(1)将保藏编号为cgmcc no.32167的蜡样芽孢杆菌bc1、保藏编号为cgmccno.32165的枯草芽孢杆菌bs2和保藏编号为cgmcc no.32166的短小芽孢杆菌bc3分别进行液体发酵，分别获得蜡样芽孢杆菌bc1发酵液、枯草芽孢杆菌bs2发酵液和短小芽孢杆菌bc3发酵液；
12、(2)将步骤(1)得到的蜡样芽孢杆菌bc1发酵液、枯草芽孢杆菌bs2发酵液和短小芽孢杆菌bc3发酵液在使用前按照质量比为0.5:2:0.5的比例混合得到混合微生物菌剂。
13、蜡样芽孢杆菌bc1的液体发酵的培养基为：玉米粉3g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾2g、氯化钠3g、硫酸铵4g、碳酸钙0.5g、硫酸镁0.2g、硫酸锌0.2g、酵母膏3g、葡萄糖30g、水1000ml，121℃灭菌30分，液体发酵条件为：发酵温度30℃，转速：160转/分,时间：48小时，接种量为7％，ph设定7.5.蜡样芽孢杆菌bc1发酵液的浓度为，1011cfu/ml左右10％。
14、枯草芽孢杆菌bs2的液体发酵的培养基为：玉米粉3.5g、黄豆粉3.5g蛋白胨3g、磷酸二氢钾2g、氯化钠3g、硫酸铵4g、碳酸钙2g、硫酸镁0.6g、氯化锰0.6g、酵母膏3g、葡萄糖40g、水1000ml，121℃灭菌20分，液体发酵条件为：.发酵温度32℃，转速：160转/分，时间：48小时，接种量为8％，ph设定8(初始)，枯草芽孢杆菌bs2发酵液的浓度为：1011cfu/ml左右10％
15、短小芽孢杆菌bc3的液体发酵的培养基为：玉米粉3g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾2g、氯化钠3g、硫酸铵3g、碳酸钙0.8g、硫酸镁0.4g、硫酸锌0.4g、酵母膏4g、葡萄糖35g、水1000ml，121℃灭菌20分，，液体发酵条件为：.发酵温度30℃，转速：155转/分，时间：48小时，接种量为8％，ph设定7，短小芽孢杆菌bc3发酵液的浓度为：1010-1011cfu/ml之间。
16、本专利技术还提供上述的混合微生物菌剂在蔬菜种植中对土传病害的防病促生作用及应用。
17、进一步的，所述蔬菜为辣椒、西葫芦、萝卜、油菜、红薯和芹菜等。
18、进一步的，所述应用，包括以下步骤：
19、(1)在蔬菜移栽或播种期的前1-2周，先用混合微生物菌液处理土壤，将混合微生物菌液稀释50-300倍，将其均匀喷洒在地表，或均匀喷洒在有机肥上，然后混翻均匀，再翻耕到10-20厘米土中，使微生物自然生长定殖，对土壤中越冬的病原菌有较好的抑制作用；
20、(2)蔬菜苗移栽前用混合微生物菌液蘸根，蔬菜苗移栽前用混合微生物菌液稀释50倍蘸根10-30分钟后，移栽，蘸根后苗子被拮抗菌有效保护，减少被土壤病原菌侵染；
21、(3)发病前用混合微生物菌液灌根，将混合微生物菌液200-300倍稀释后每株灌0.5斤-1斤，一共灌1-2次，有效减少田间发病率。
22、与现有技术相比本专利技术具有以下有益效果：
23、本专利技术混合微生物菌剂具有广谱促生。对多种蔬菜土传病原菌有抑制作用，对叶类蔬菜，对瓜类蔬菜，对薯类有促生作用。
24、本专利技术混合微生物菌剂施入土壤，可使土壤中微生物数量显著增加，而增加的这些微生物的活动又可以促进土壤酶活性的增强，并且可以使土壤难溶性矿物养分得到分解并释放。与此同时这些微生物还能分泌植物激素，从而促进作物生长。本专利技术混合微生物菌剂，对绿色无公害及有机蔬菜、薯类、瓜类生产具有重要的意义。
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1.一种用于蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂，其特征在于，所述混合菌剂中含有蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）BC1、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BS2和短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）BC3；
2.根据权利要求1所述的一种用于蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的一种蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述蜡样芽孢杆菌BC1的液体发酵的培养基为：玉米粉3g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾2g、氯化钠3g、硫酸铵4g、碳酸钙0.5g、硫酸镁0.2g、硫酸锌0.2g 、酵母膏3g、葡萄糖30g、水1000mL，121℃灭菌30分，液体发酵条件为：发酵温度30℃，转速：160转/分,时间：48小时，接种量为7%，PH设定7.5.蜡样芽孢杆菌BC1发酵液的浓度为，1011cfu/mL左右10%。
4. 根据权利要求2所述的一种蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，枯草芽孢杆菌BS2的液体发酵的培养基为：玉米粉3.5
5.根据权利要求2所述的一种蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述短小芽孢杆菌BC3的液体发酵的培养基为：玉米粉3g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾2g、氯化钠3g、硫酸铵3g、碳酸钙1.5g、硫酸镁0.4g、硫酸锌0.4g 、酵母膏4g、葡萄糖35g、水1000mL，121℃灭菌20分，液体发酵条件为：发酵温度30℃，转速：155转/分，时间：48小时，接种量为8%，PH设定7，短小芽孢杆菌BC3发酵液的浓度为：1010-1011cfu/Ml之间。
6.如权利要求1所述的混合微生物菌剂在蔬菜种植中有防病促生的作用及其应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述蔬菜为辣椒、西葫芦、萝卜、油菜、红薯和芹菜等。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种用于蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂，其特征在于，所述混合菌剂中含有蜡样芽孢杆菌（bacillus cereus）bc1、枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）bs2和短小芽孢杆菌（bacillus pumilus）bc3；
2.根据权利要求1所述的一种用于蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的一种蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述蜡样芽孢杆菌bc1的液体发酵的培养基为：玉米粉3g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾2g、氯化钠3g、硫酸铵4g、碳酸钙0.5g、硫酸镁0.2g、硫酸锌0.2g 、酵母膏3g、葡萄糖30g、水1000ml，121℃灭菌30分，液体发酵条件为：发酵温度30℃，转速：160转/分,时间：48小时，接种量为7%，ph设定7.5.蜡样芽孢杆菌bc1发酵液的浓度为，1011cfu/ml左右10%。
4. 根据权利要求2所述的一种蔬菜土传病害防治的混合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，枯草芽孢杆菌bs2的液体发酵的培养基为：玉米粉3.5g、黄豆粉3.5 g蛋白胨3g、磷酸二氢钾2g、氯...
【专利技术属性】
技术研发人员：丁超，马利平，秦曙，郝变青，温映红，乔雄梧，石文鑫，刘文魁，
申请(专利权)人：山西农业大学山西功能农产品检验检测中心，
类型：发明
国别省市：
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