【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于药物载体，具体涉及硼替佐米包封剂、硼替佐米脂质体及制备方法。
技术介绍
1、硼替佐米(bortezomib，btz)是一种蛋白酶体抑制剂，其在多发性骨髓瘤(multiplemyeloma，mm)中的应用使得mm的中位生存期由3-5年延长至5-7年。btz已成为治疗新诊断多发性骨髓瘤(newlydiagnosedmultiplemyel oma，ndmm)的i类推荐药物。然而，btz造成的周围神经病变等不良反应严重影响患者的生存和预后。由于btz毒性是由btz和血浆蛋白之间的非特异性相互作用引起的，因此可以通过生产btz脂质体来克服。制造脂质体btz是降低其药物副作用的一种有效方法。
2、脂质体(或脂质双层小泡)是由可包封水相的同心有序脂质双层构成的圆形小泡，可作为包含于水相或脂质双层中的治疗和诊断剂的递送载体。以脂质体包封形式递送药物可提供许多优势，视药物而定，包括例如降低药物毒性、改变药代动力学或提高药物溶解度。现有的硼替佐米脂质体制备方法操作复杂，粒径较大，同时对硼替佐米的包封率不高，因此，亟需一种制备方法简单的脂质体来满足硼替佐米的给药。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种硼替佐米包封剂、硼替佐米脂质体及制备方法，以解决前述问题中的至少一种。
2、根据本专利技术的一个方面，提供了一种硼替佐米包封剂，包封剂为脂质体，其原料成分至少含有带负电荷的脂质、胆固醇。
3、在一些实施方式中，带负电荷的脂质包括二硬脂酰磷脂酰甘油
4、根据本专利技术的第二个方面，提供了一种硼替佐米包封剂(即空白脂质体)的制备方法，包封剂为脂质体，该脂质体采用脂质分散法制备得到，具体步骤如下：
5、(1)向葡甲胺加纯水，此时，葡甲胺溶液的浓度为300mm，加入冰醋酸将ph值调到8.5，得到葡甲胺缓冲液；
6、(2)将胆固醇、带负电荷的脂质等原料成分用第一溶剂、甲醇、水复合溶剂溶解，再加乙醇溶解，得到脂质溶液；
7、(3)将脂质溶液水浴旋蒸，除去有机溶剂；
8、(4)向步骤(3)旋蒸后的溶液中先加入ph为8.5的葡甲胺溶液60℃水浴水化，再用100nm挤出法制备得到空白脂质体。
9、在一些实施方式中，步骤(2)中第一溶剂、甲醇、水三者体积比为3：3：1。
10、在一些实施方式中，步骤(2)中第一溶剂为三氯甲烷、二氯甲烷、乙醇、乙酸异丙酯、异丁醇、叔丁醇中的至少一种。
11、在一些实施方式中，还包括如下步骤：将步骤(4)制备得到的空白脂质体过凝胶纯化柱和/或用中空纤维柱切向流超滤，用ph为6.5的nacl-hepes缓冲液除去外水相中的葡甲胺。具体地，凝胶纯化柱可以为g50纯化柱。
12、其中，配制nacl-hepes缓冲液具体操作为：称取氯化钠1.6352g，mw：58.4；hepes0.9532g，mw：238.3，先加纯水150ml溶解完全，然后加1.0m的氢氧化钠溶液调ph到6.5后加纯水到200ml。其中，nacl表示氯化钠，hepes表示2-(4-(2-羟乙基)哌嗪)乙磺酸，cas号7365-45-9；mw表示分子量。
13、或者，硼替佐米包封剂(即空白脂质体)可采用溶剂注入法得到，具体步骤如下：
14、(1)配制ph为8.5的葡甲胺缓冲液；
15、(2)将胆固醇、带负电荷的脂质等原料成分用第二溶剂、甲醇、水复合溶剂溶解，得到脂质溶液；
16、(3)将脂质溶液按照体积比1:3注入到葡甲胺缓冲液中，60℃搅拌15min后用葡甲胺缓冲液稀释；
17、(4)通过凝胶纯化柱和/或中空纤维柱切向流超滤除去脂质体中的有机相并将脂质体溶液浓缩至30mg/ml，取样测粒径；
18、(5)用100nm挤出法制备空白脂质体。
19、在一些实施方式中，第二溶剂为三氯甲烷、二氯甲烷、乙醇、乙酸异丙酯、异丁醇、叔丁醇中的至少一种。
20、在一些实施方式中，步骤(2)第二溶剂、甲醇、水三者体积比为2：8：1.5。
21、在一些实施方式中，还包括如下步骤：将步骤(5)制备得到的空白脂质体过凝胶纯化柱，用ph为6.5的nacl-hepes缓冲液通过中空纤维柱切向流替换外水相中的葡甲胺缓冲液。其中，凝胶纯化柱可以为g50纯化柱。
22、其中，配制nacl-hepes缓冲液具体操作为：称取氯化钠1.6352g，mw：58.4；hepes0.9532g，mw：238.3，先加纯水150ml溶解完全，然后加1.0m的氢氧化钠溶液调ph到6.5后加纯水到200ml。其中，nacl表示氯化钠，hepes表示2-(4-(2-羟乙基)哌嗪)乙磺酸，cas号7365-45-9；mw表示分子量。
23、根据本专利技术的第三个方面，提供了一种硼替佐米脂质体，硼替佐米与上述硼替佐米包封剂进行孵育，直至硼替佐米装载在硼替佐米包封剂中，除去游离的硼替佐米获得。
24、根据本专利技术的第四个方面，提供了一种硼替佐米脂质体的制备方法，具体步骤如下：
25、(1)制备空白脂质体，其中空白脂质体的制备可采用上述的脂质分散法或溶剂注入法；
26、(2)向空白脂质体中加硼替佐米乙醇溶液，在室温浴孵育；
27、(3)除去游离的硼替佐米，即得包载有硼替佐米的脂质体溶液。
28、在一些实施方式中，步骤(2)的硼替佐米乙醇溶液制备步骤如下：将3.84mg硼替佐米溶于200μl无水乙醇中制得。
29、在一些实施方式中，步骤(3)中可通过过g50纯化柱除去游离的硼替佐米，或者中空纤维柱切向流除去游离的硼替佐米。
30、通过本专利技术制备得到的硼替佐米脂质体包封率到达80％以上，并且粒径较小，可达到100nm左右。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.硼替佐米包封剂，其特征在于，所述包封剂为脂质体，其原料成分至少含有带负电荷的脂质、胆固醇。
2.根据权利要求1所述的硼替佐米包封剂，其特征在于，带负电荷的脂质包括二硬脂酰磷脂酰甘油及其盐、二棕榈酰磷脂酰甘油及其盐、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油及其盐、二豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸及其盐、1,2-二软脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸及其盐、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸及其盐、1,2-双硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸及其盐、二月桂酰基磷酸酯及其盐、二棕榈酰基磷脂酰丝氨酸及其盐中的至少一种。
3.权利要求1所述硼替佐米包封剂的制备方法，其特征在于，采用脂质分散法制备，具体步骤如下：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述第一溶剂为三氯甲烷、二氯甲烷、乙醇、乙酸异丙酯、异丁醇、叔丁醇中的至少一种。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，还包括如下步骤：制备NaCl-HEPES缓冲液，将步骤(4)制备得到的空白脂质体过凝胶纯化柱和/或用中空纤维柱切向流超滤，用NaCl-HEPES缓冲液除去外水相中的葡甲胺
6.权利要求1所述硼替佐米包封剂的制备方法，其特征在于，采用溶剂注入法制备，具体步骤如下：
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述第二溶剂为三氯甲烷、二氯甲烷、乙醇、乙酸异丙酯、异丁醇、叔丁醇中的至少一种。
8.一种硼替佐米脂质体，其特征在于，由硼替佐米与权利要求1所述的硼替佐米包封剂进行孵育，直至硼替佐米装载在所述硼替佐米包封剂中，除去游离的硼替佐米即可。
9.权利要求8所述硼替佐米脂质体的制备方法，其特征在于，步骤如下：
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中可通过凝胶纯化柱除去游离的硼替佐米，或者中空纤维柱切向流除去游离的硼替佐米。
...【技术特征摘要】
1.硼替佐米包封剂，其特征在于，所述包封剂为脂质体，其原料成分至少含有带负电荷的脂质、胆固醇。
2.根据权利要求1所述的硼替佐米包封剂，其特征在于，带负电荷的脂质包括二硬脂酰磷脂酰甘油及其盐、二棕榈酰磷脂酰甘油及其盐、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油及其盐、二豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸及其盐、1,2-二软脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸及其盐、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸及其盐、1,2-双硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸及其盐、二月桂酰基磷酸酯及其盐、二棕榈酰基磷脂酰丝氨酸及其盐中的至少一种。
3.权利要求1所述硼替佐米包封剂的制备方法，其特征在于，采用脂质分散法制备，具体步骤如下：
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述第一溶剂为三氯甲烷、二氯甲烷、乙醇、乙酸异丙酯、异丁醇、叔丁醇中的至少一种。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：林佳亮，马巧芳，陈晓杰，陈锡铖，李剑光，杨永胜，赵孝斌，
申请(专利权)人：浙江海昶生物医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。