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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物促生,具体地说,是一种西红花根际真菌及其在促进模式植物拟南芥生长中的应用。
技术介绍
1、西红花是鸢尾科番红花属植物番红花crocus sativus l.的干燥柱头,全株仅雌蕊的三分叉红色丝状柱头可入药,产量低而价值高昂,被喻为“植物黄金”,具有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神的功效。西红花中主要药用成分为西红花苷、西红花酸、番红花苦素等,研究发现西红花具有提高心脑血管功能、安神、抗肿瘤、防治阿尔茨海默病、抗焦虑抑郁、治疗糖尿病等作用。
2、目前,西红花实际生产大多采用“二段式”栽培法,球茎放室内半年培育开花,室内采花后在室外田间种植半年以繁殖新球茎的方式进行,这种栽培模式西红花柱头品质较好,但繁殖率低,不利于西红花的大规模种植。目前西红花栽培存在种球繁殖率低、栽培技术不规范、病虫害发生率增加等问题,相关研究者提出了构建种质资源平台、科学规划种植、综合开发西红花副产品等解决方法。但并未明确提出提高西红花产量的相关科学技术。
3、植物根际真菌是指在植物根系周围土壤中或附着于根表面的一类可以通过直接或间接的方式促进植物生长的真菌,是许多植物生长诱导剂的主要来源之一。植物根际促生真菌已成为一种通过提高种子萌发率、促进根茎生长、增加叶绿素产量等生态友好地提高作物产量的方式。其作用模式包括植物所需的基本微量和大量营养素的增溶和矿化,以调节各种植物生长过程的平衡。植物根际真菌还能通过诱导植物系统抗性发挥生物防治作用,从而提高植物的产量。已有大量研究表明根际真菌制备的生物菌肥能促进植物的生长,如哈茨木霉
4、但是,关于通过西红花根际真菌促拟南芥生长的应用目前还未见报道。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于针对现有技术的不足,提供一种西红花根际真菌及其在促进拟南芥生长中的应用。
2、本专利技术的第一方面,提供了一种植物根际真菌,属于子囊菌门,锤舌菌纲,柔膜菌目,分类命名为背芽突霉属真菌(cadophora malorum)srf536。所述的根际真菌是从鸢尾科番红花属植物西红花(crocus sativus l.)根际土中分离得到的,经微生物分类学鉴定为背芽突霉属真菌(cadophora malorum)srf536。该菌株已保藏,菌种保藏号为cgmccno.41085,保藏日期为2024年1月23日,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc),地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,邮编为100101。
3、本专利技术所述的根际真菌的固体培养特征为:
4、在土豆葡萄糖琼脂培养基(pda)上28℃暗培养,菌丝生长较慢,菌落整体呈圆形,表面黄白色,中心处菌丝白色绒毛状,中层黄色,外层白色菌丝可见;菌落背部内层黄色,外层白色,见图1。
5、本专利技术所述的根际真菌在显微镜下的形态特征为:菌丝体透明、薄壁,扭曲,菌丝较细,有分支,表面多平滑,稀疏可见透明孢子,见图2。
6、本专利技术所述的根际真菌的its扩增电泳图见图3,its分子序列如seq id no.1所示。
7、将测序结果于ncbi网站进行序列比对(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/blast.cgi),同cadophora malorum(mk626762)、cadophora malorum(mt666165)、cadophora malorum(mt666152)在同一分支上,序列比对相似性达99.81%。用mega7.0做多序列比对,用邻接法(neighbor-joining,nj)分析,随机挑取1个序列,重复比对1000次。本专利技术所述内生真菌的系统进化树见图4。
8、本专利技术的第二方面,提供了上述根际真菌在促进拟南芥生长中的应用。
9、所述的上述应用,将真菌打成菌饼接种至拟南芥生长培养基中,可以促进模式植物拟南芥侧根与叶片生长,增加拟南芥生物量。
10、上述应用,主要是通过以下技术方案来实现的:
11、(1)取srf536在无菌条件下,用接种针挑取少量菌丝,接入已灭菌的pda培养基(配方为土豆200g,葡萄糖20g,琼脂15g,蒸馏水1000ml,ph自然),28℃,60%湿度条件下暗培养5d。
12、(2)在1/2ms培养基上部宽度约7cm处划一条横线,选取生长状况相近的拟南芥幼苗挑至划线处,幼苗之间的间隔为0.5~1.0cm。
13、(3)无菌条件下,用直径5mm经灭菌的打孔器在菌落边缘打取菌饼,用已灭菌的镊子夹取菌饼置于距离横线3cm处,用打孔器制作相同大小的pda块作为对照组,每个真菌设3个重复。
14、(4)置于24℃光照培养箱中培养,16h光照8h黑暗,14d后测量植株生物量并在显微镜下观察拟南芥根部及叶片形态,能明显观察到srf536促进拟南芥的生长。
15、本专利技术优点在于:
16、本专利技术所述的西红花根际真菌背芽突霉属真菌srf536(cadophora malorum),与拟南芥共培养后可以促进拟南芥侧根与叶片生长,增加拟南芥生物量,可提高生物量219.2%。本专利技术的根际真菌促进拟南芥生长效果明显,为植物促生及作物产量提升领域带来广阔的应用前景。
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1.一种西红花根际真菌,其特征在于,所述的根际真菌是从鸢尾花科番红花属植物西红花根际土壤中分离得到的,分类命名为背芽突霉属真菌(Cadophora malorum)SRF536,于2024年1月23日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,菌种保藏编号为CGMCCNo.41085。
2.一种权利要求1所述西红花根际真菌的应用,其特征在于,所述西红花根际真菌用于促进模式植物拟南芥的生长。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述西红花根际真菌是通过促进侧根生长,叶片生长与生物量的提升来促进拟南芥生长。
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述应用具体为,将西红花根际真菌接种至拟南芥培养基进行共培养,促进拟南芥的生长。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述应用按照以下步骤进行:(1)选取长势一致的拟南芥幼苗,接种至1/2MS培养基中,幼苗之间的间隔为0.5~1.0cm;
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,西红花根际真菌采用菌饼形式接种,菌饼接种量为1个菌饼/板。
7.根据权利要求5所述
...【技术特征摘要】
1.一种西红花根际真菌,其特征在于,所述的根际真菌是从鸢尾花科番红花属植物西红花根际土壤中分离得到的,分类命名为背芽突霉属真菌(cadophora malorum)srf536,于2024年1月23日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,菌种保藏编号为cgmccno.41085。
2.一种权利要求1所述西红花根际真菌的应用,其特征在于,所述西红花根际真菌用于促进模式植物拟南芥的生长。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述西红花根际真菌是通过促进侧根生长,叶片生长与生物量的提升来促进拟南芥生长。
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述应用具体为,将西红花根际真菌接种至拟南芥培养基进行共培养,促进拟南芥的生长。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述应用按照以下步骤进行:(1)选取长...
【专利技术属性】
技术研发人员:张思媛,朱波,毛美琴,秦路平,党友超,沈瑶,叶林鑫,张楠,
申请(专利权)人:浙江中医药大学,
类型:发明
国别省市:
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