【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及探针领域，尤其涉及一种脂滴硫化氢荧光探针及其制备方法和应用。
技术介绍
1、脂滴是一种高度动态的细胞器，维持着细胞脂质和能量稳态，在调节脂质和能量代谢中具有关键作用。脂滴的功能障碍往往与许多病理状况有关，如肥胖、糖尿病和动脉粥样硬化等代谢疾病。硫化氢(h2s)作为一种重要的生物信号分子，在生物学领域以及相关跨学科研究中均受到广泛关注。研究表明，硫化氢在调控脂滴数量及尺寸方面发挥举足轻重的作用。内源性h2s浓度异常往往与多种疾病的发生密切相关，例如癌症、阿尔茨海默病(ad)、肺动脉高压和糖尿病等等。此外，在各种类型的癌症及缺氧条件下，往往导致h2s相关生成酶失调，进一步导致内源性h2s水平升高，加重癌症疾病的发展。目前硫化氢虽在线粒体，溶酶体等其他细胞器内的检测已有大量报道，然而，由于脂滴自身高度动态的特征，基于脂滴内硫化氢检测的报道却十分有限，且现有的荧光探针检测速度较慢、检测限高至μm级别，灵敏度较低，大大限制其生物应用。
2、综上，构建一种具有高检测上限的用于检测脂滴硫化氢的荧光探针是当务之急。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种脂滴硫化氢荧光探针及其制备方法和应用具有高灵敏度、可裸眼检测脂滴硫化氢优势。
2、根据本专利技术的第一方面实施例的一种脂滴硫化氢荧光探针，所述脂滴硫化氢荧光探针为
3、具有如式(i)所示结构的化合物，或其药学上可接受的盐：
4、p>
5、其中，所述r1选自烷基、环烷基、烷氧基、芳香取代基中的任意一种。
6、所述r2选自如下式结构中的一种：
7、
8、其中，所述r3和r4各独立的选自c2-c20的饱和直链或支链烷基，r3和r4相同或不同。
9、根据本专利技术的第一方面实施例至少具有以下有益效果：
10、本专利技术提供的荧光探针在硫化氢检测中具有操作简便、反应迅速、选择性好、灵敏度高的优势同时可实现脂滴内硫化氢成像，在硫化氢检测研究领域具有实际的应用价值，可用于生物体系及环境监测等。
11、根据本专利技术的一些实施例，所述r3和r4选自叔丁基。
12、根据本专利技术的一些实施例，所述r1中，所述烷基选自：-(ch2)nch3，n为0～18。
13、根据本专利技术的一些实施例，所述r1中，所述烷氧基选自：-o(ch2)nch3，n为0～18；或-(och2ch2)nch3，n为2～18。
14、根据本专利技术的一些实施例，所述r1中，所述芳香取代基选自：
15、
16、n为0～21。
17、根据本专利技术的第二方面实施例的一种脂滴硫化氢荧光探针的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
18、s1.将化合物2、化合物3和催化剂混合、加热反应后除杂得到化合物4，其中化合物2的结构式如式(ⅱ)所示，化合物3的结构式如式(ⅲ)所示：
19、
20、s2.将化合物4、2，4-二硝基氟苯和缚酸剂混合反应除杂。
21、根据本专利技术的一些实施例，步骤s1中，所述催化剂包括哌啶。
22、根据本专利技术的一些实施例，步骤s2中，所述无机碱包括碳酸钾和碳酸铯中的至少一种。
23、根据本专利技术的一些实施例，所述化合物2和所述化合物3的摩尔比为1:1。
24、根据本专利技术的一些实施例，步骤s1中，所述混合的过程中还包括加入溶剂，所述溶剂包括乙醇、甲醇、二氯乙烷和二氯甲烷中的至少一种。
25、根据本专利技术的一些实施例，步骤s1中，所述除杂的步骤包括：萃取、干燥后蒸发浓缩干燥得到混合物，过柱分离。
26、根据本专利技术的一些实施例，步骤s2中，所述反应的步骤中还包括加入溶剂，所述溶剂包括n，n-二甲基甲酰胺。
27、根据本专利技术的一些实施例，所述化合物4、所述2，4-二硝基氟苯和所述无机碱的摩尔比为1:1～3：1～4。
28、根据本专利技术的一些实施例，步骤s2中，所述反应的温度为0～40℃。
29、根据本专利技术的一些实施例，所述除杂的步骤包括：萃取、干燥后蒸发浓缩干燥得到混合物，过柱分离。
30、根据本专利技术的第三方面实施例的一种脂滴硫化氢荧光探针在制备细胞内硫化氢荧光检测试剂中的应用。
31、根据本专利技术的第四方面实施例的一种脂滴硫化氢荧光探针在制备细胞内硫化氢荧光成像试剂中的应用。
32、根据本专利技术的一些实施例，所述细胞包括hela细胞。
33、根据本专利技术的一些实施例，所述应用的步骤包括：在溶剂中将所述脂滴硫化氢荧光探针与硫化氢混合反应后进行紫外或荧光光谱检测。
34、根据本专利技术的一些实施例，所述脂滴硫化氢荧光探针与硫化氢混合反应的时间为20～45min。
35、根据本专利技术的一些实施例，所述脂滴硫化氢荧光探针的浓度为10-7～10-2mol/l。
36、根据本专利技术的一些实施例，所述硫化氢的检测上限为51nmol/l。
37、根据本专利技术的一些实施例，所述硫化氢的检测上限为44nmol/l。
38、根据本专利技术的一些实施例，所述溶剂包括dmso和h2o的至少一种。
39、上述混合溶剂的条件下，探针兼具亲水和亲脂性。
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1.一种脂滴硫化氢荧光探针，其特征在于，所述脂滴硫化氢荧光探针为具有如式(I)所示结构的化合物，或其药学上可接受的盐：
2.根据权利要求1所述的脂滴硫化氢荧光探针，其特征在于，所述R1中，所述烷基选自：-(CH2)nCH3，n为0～18。
3.根据权利要求1所述的脂滴硫化氢荧光探针，其特征在于，所述R1中，所述烷氧基选自：-O(CH2)nCH3，n为0～18或-(OCH2CH2)nCH3，n为2～18。
4.根据权利要求1所述的脂滴硫化氢荧光探针，其特征在于，所述R1中，所述芳香取代基选自：
5.一种如权利要求1～4任一项所述的脂滴硫化氢荧光探针的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述催化剂包括哌啶、氢氧化钠、氢氧化钾和氢氧化钙中的至少一种。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述缚酸剂包括碳酸钾和碳酸铯中的至少一种。
8.一种如权利要求1～4任一项所述的脂滴硫化氢荧光探针在制备细胞内硫化氢荧光检测试
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述硫化氢的检测上限为100mol/L。
10.一种如权利要求1～4任一项所述的脂滴硫化氢荧光探针在制备细胞内硫化氢荧光成像试剂中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种脂滴硫化氢荧光探针，其特征在于，所述脂滴硫化氢荧光探针为具有如式(i)所示结构的化合物，或其药学上可接受的盐：
2.根据权利要求1所述的脂滴硫化氢荧光探针，其特征在于，所述r1中，所述烷基选自：-(ch2)nch3，n为0～18。
3.根据权利要求1所述的脂滴硫化氢荧光探针，其特征在于，所述r1中，所述烷氧基选自：-o(ch2)nch3，n为0～18或-(och2ch2)nch3，n为2～18。
4.根据权利要求1所述的脂滴硫化氢荧光探针，其特征在于，所述r1中，所述芳香取代基选自：
5.一种如权利要求1～4任一项所述的脂滴硫化氢荧光探针的制备...
【专利技术属性】
技术研发人员：李兰清，王瑞雅，廖万涛，胡景鑫，胡金辉，陈文华，
申请(专利权)人：五邑大学，
类型：发明
国别省市：
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