【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药和生物，具体涉及一种肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法及其在评价婴配粉的免疫调节功能中的应用。
技术介绍
1、母乳是婴儿早期成长过程中最完美的食物，对婴幼儿的健康和认知产生贯穿其整个生命周期的重要影响。但由于各种原因不能进行母乳喂养或母乳不足时，婴配粉则是母乳的最佳替代品；它是根据婴幼儿的营养需求设计的一种特殊配方奶粉，能够提供给婴幼儿全面均衡的营养，对婴儿早期生长发育及其肠道微生物群落的形成产生至关重要的影响。
2、婴幼儿期是人体免疫系统发育的关键时期，也是疾病的易发期，因此，良好的免疫力是婴幼儿健康成长的重要保障。而肠道微生物群落对婴幼儿的先天性免疫系统的发育、适应性免疫系统的形成及后天的成长发育至关重要，不仅参与了婴幼儿免疫系统的激活和成熟、调节免疫反应、维持肠道上皮稳态、调节宿主新陈代谢、调节神经系统以及大脑发育等生理过程，还对婴幼儿的感染、过敏及炎症等具有良好的改善作用。
3、虽有越来越多的研究表明，含有母乳源益生菌和母乳低聚糖等功能组分的婴配粉能够通过促进婴幼儿肠道有益菌的生长来发挥其对肠道微生物群落的良好的调节作用，并进而改善婴幼儿的免疫功能；但对于免疫功能的调节评价大多通过模型动物的血清及免疫器官等相关免疫指标来实现，缺乏肠道菌群的评价模型。
4、目前对肠道菌群的研究大多只关注于细菌；而随着研究的不断深入，人们发现，肠道中除了细菌外，还包括真菌、病毒、古生菌等微生物群落，它们与肠道共同进化，形成了复杂的共生体以及互惠关系，进而促进机体的免疫和健康；同时，
5、然而，肠道中的微生物群落容易受到遗传、环境、饮食等因素的影响，稳定性较差，难以形成稳定的肠道微生物群落。
技术实现思路
1、专利技术目的：本专利技术所要解决的技术问题是提供了一种肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法。
2、本专利技术还要解决的技术问题是提供了所述的模型构建方法在用于评价婴配粉免疫调节功能中的应用。
3、技术方案：为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，所述构建方法包括将含有乳脂肪球膜的乳粉基粉奶液的样品对出生第2～23d的哺乳期动物进行分阶段灌胃干预，灌胃时样品温度保持在36～38℃，试验过程中动物体温维持在35～36℃，所述含有乳脂肪球膜的乳粉基粉奶液的用量为0.1～0.8ml/次，2～4次/d。
4、其中，所述乳粉基粉包括但不仅限于婴儿配方乳粉基粉。
5、其中，每千克乳粉基粉中含有0.40kg脱盐乳清粉、0.18kg食物植物调和油、0.19kg乳糖、0.02kg乳清蛋白粉、0.005kg浓缩乳清蛋白粉、0.005kg复配营养强化剂(维生素、矿物质)及1.6kg生牛乳喷雾干燥成的0.2kg乳粉。
6、其中，所述动物包括但不仅限于幼鼠。作为优选，本专利技术所述动物为出生第2d的哺乳期雄性sd幼鼠。
7、其中，所述分阶段灌胃干预的频次为：在幼鼠出生第2～4d，0.1～0.2ml/次，2次/d；第5～9d，0.3-0.5ml/次，4次/d；第10～23d：0.5-0.8ml/次，4次/d；第23d后：1ml/次，4次/d。
8、其中，所述幼鼠每次干预间隔3～4h，每次干预后轻轻按摩幼鼠腹部1～2min。
9、其中，所述乳脂肪球膜浓度为500～1000mg/kg(mfgm质量/幼鼠体重)。
10、其中，所述婴儿配方奶液中的奶粉浓度为130～160g/kg的婴幼儿配方乳粉基粉，组成同上。
11、本
技术实现思路
还包括所述的构建方法在评价婴配粉的免疫调节功能中的应用。
12、其中，所述应用包括对构建得到的模型中的肠道四界菌群进行kegg功能富集分析，并预测得到免疫相关的物种，将预测得到的物种分别与通路中的免疫基因及免疫相关的表型指标进行斯皮尔曼相关性分析，得到与免疫显著相关的四界菌群，将待测婴配粉对应的菌群与其进行比较，如果菌群组成和丰度相似或相同则为高免疫调节能力，否则免疫调节能力低于模型组。
13、本专利技术用于评价婴配粉免疫调节功能的肠道四界菌群的获得方法包括；
14、(1)利用上海美吉生物医药科技有限公司云平台对上述构建方法得到的稳定的肠道四界菌群进行kegg功能富集分析；
15、(2)筛选与免疫相关的通路，并创建基因集，然后对基因集进行物种注释，预测得到免疫相关的物种；
16、(3)将预测得到的物种分别与通路中的免疫基因及免疫相关的表型指标进行斯皮尔曼相关性分析，得到与免疫显著相关的四界菌群(p<0.05)，即为可用于评价婴配粉免疫调节功能的肠道四界核心菌群。
17、其中，所述稳定的肠道四界菌群包括232个物种：
18、(1)118个细菌：lactobacillus属、unclassified_f__muribaculaceae属、prevotella属、unclassified_f__lachnospiraceae属、bacteroides属、ligilactobacillus属、unclassified_o__bacteroidales属、unclassified_f__oscillospiraceae属、phocaeicola属、muribaculum属、ruminococcus属、duncaniella属、unclassified_d__bacteria属、unclassified_f__bacteroidaceae属、parabacteroides属、eubacterium属、dorea属、unclassified_p__bacillota属、helicobacter属、alistipes属、paramuribaculum属、acetatifactor属、oscillibacter属、bifidobacterium属、segatella属、escherichia属、schaedlerella属、lawsonibacter属、desulfovibrio属、hungatella属、adlercreutzia属、acutalibacter属、roseburia属、paraprevotella属、unclassified_f__clostridiaceae属、unclassified_f__porphyromonadaceae属、faecalibaculum属、pseudoflavonifractor属、streptococcus属、barnesiella属、allobaculum属、enterocloster属、flavonifractor属、thomasclavelia属、odoribacter属、lachnoclostridium属、unclassified_本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括将含有乳脂肪球膜的乳粉基粉奶液的样品对出生第2～23d的哺乳期动物进行分阶段灌胃干预，灌胃时样品温度保持在35～38℃，试验过程中动物体温维持在35～36℃，所述含有乳脂肪球膜的乳粉基粉奶液的用量为0.1～0.8mL/次，2～4次/d。
2.根据权利要求1所述的肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，其特征在于，所述动物为幼鼠。
3.根据权利要求2所述的肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，其特征在于，所述分阶段灌胃干预的频次为：在幼鼠出生第2～4d，0.1～0.2mL/次，2次/d；第5～9d，0.3-0.5mL/次，4次/d；第10～23d：0.5-0.8mL/次，4次/d；第23d后：1mL/次，4次/d。
4.根据权利要求2所述的肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，其特征在于，所述幼鼠每次干预间隔3～4h，每次干预后轻轻按摩幼鼠腹部1～2min。
5.根据权利要求2所述的肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，其特征在于，所述乳脂肪球膜浓度为500～10
6.根据权利要求2所述的肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，其特征在于，所述奶液中的奶粉浓度为130～160g/kg的婴儿配方乳粉基粉。
7.根据权利要求1所述的构建方法，其特在于，所述应用中，所述的动物模型中稳定的肠道四界菌群包括232个物种：
8.权利要求1～7任一项所述的构建方法在评价婴配粉的免疫调节功能中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述应用包括对构建得到的模型中的肠道四界菌群进行KEGG功能富集分析，筛选与免疫相关的通路，并创建基因集，然后对基因集进行物种注释，预测得到免疫相关的物种；将预测得到的物种分别与通路中的免疫基因及免疫相关的表型指标进行斯皮尔曼相关性分析，得到与免疫显著相关的四界菌群，将待测婴配粉对应的菌群与其进行比较，如果菌群组成和丰度相似或相同则为高免疫调节能力，否则免疫调节能力低于模型组。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，用于评价婴配粉免疫调节功能的肠道四界核心菌群，包括112个物种：
...【技术特征摘要】
1.一种肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括将含有乳脂肪球膜的乳粉基粉奶液的样品对出生第2～23d的哺乳期动物进行分阶段灌胃干预，灌胃时样品温度保持在35～38℃，试验过程中动物体温维持在35～36℃，所述含有乳脂肪球膜的乳粉基粉奶液的用量为0.1～0.8ml/次，2～4次/d。
2.根据权利要求1所述的肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，其特征在于，所述动物为幼鼠。
3.根据权利要求2所述的肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，其特征在于，所述分阶段灌胃干预的频次为：在幼鼠出生第2～4d，0.1～0.2ml/次，2次/d；第5～9d，0.3-0.5ml/次，4次/d；第10～23d：0.5-0.8ml/次，4次/d；第23d后：1ml/次，4次/d。
4.根据权利要求2所述的肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，其特征在于，所述幼鼠每次干预间隔3～4h，每次干预后轻轻按摩幼鼠腹部1～2min。
5.根据权利要求2所述的肠道四界菌群稳定的动物模型的构建方法，其特征在于，所述乳脂肪球膜浓...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈大卫，郭聪聪，夏滋涵，顾瑞霞，张臣臣，孙晗，徐海燕，金雨诗，黄玉军，关成冉，瓦云超，瞿恒贤，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。