【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及检测，尤其涉及一种头孢克肟中4-甲氧基苄氯杂质的检测方法。
技术介绍
1、头孢克肟为(6r,7r)-7-[(z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-[(羧基甲氧基)亚氨基]乙酰基]氨基]-3-乙烯基-8-氧基-5-噻-1-氮杂双环[4.2.0]oct-2-烯-2-羧酸三水合物的简称，属于第三代头孢类抗生素，在体外具有广泛的抗菌谱，对革兰阴性菌和革兰阳性菌有强大的抗菌活性。
2、目前，头孢克肟的制备方法一般为采用7-苯乙酰胺基-3-氯甲基-头孢烯酸对甲氧基苄酯(gcle)为原料，通过叶立德(wittig)反应引入乙烯基，得到第一步中间体7-苯乙酰胺基-3-乙烯基-头孢烯酸对甲氧基苄酯(gvne)；采用亚胺基氯化物法，经氯化、醚化和水解反应脱去7位保护基，得到7-氨基-3-乙烯基-头孢烯酸对甲氧基苄酯(avne)；然后用间甲酚脱去4位酯基，得到头孢克肟母核7-氨基-3-乙烯基-头孢烷酸(avna)；采用头孢克肟侧链酯(mbt)与avna进行酰化反应，得到头孢克肟特丁基酯(tbo)；采用甲基磺酸对tbo进行水解，得到头孢克肟甲基磺酸盐，最后进一步处理得到头孢克肟。
3、其中，在第一步的合成中会引入4-甲氧基苄氯，结构式如下：
4、
5、4-甲氧基苄氯是具有警示结构的杂质，且根据ich m7《评估和控制药物中dna反应性(致突变)杂质以限制潜在的致癌风险》中“7.3与ltl暴露相关的可接受摄入量”给出的“表2单个杂质的可接受摄入量”，以治疗期<1月的可接受摄入剂量120
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种头孢克肟中4-甲氧基苄氯杂质的检测方法，本专利技术提供的头孢克肟中4-甲氧基苄氯杂质的检测方法准确度高、灵敏度好、回收率高以及检测速度快。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种头孢克肟中4-甲氧基苄氯杂质的检测方法，包括以下步骤：
4、将待检测头孢克肟与甲醇和乙腈混合，得到头孢克肟溶液，作为供试品溶液；
5、对所述供试品溶液进行高效液相色谱检测，根据获得的供试品溶液的液相色谱图得到供试品溶液的定量和/或定性结果，所述高效液相色谱检测的条件包括：
6、检测波长：233nm；
7、色谱柱：c18色谱柱；
8、柱温：20～40℃；
9、流动相：水和乙腈，所述水和乙腈的体积比为(45～60)：(40～55)。
10、若所述供试品溶液的液相色谱图中出现与对照品溶液的液相色谱图中出现与对照品溶液的液相色谱图出峰位置相同或保留时间±1％范围内的峰代表含有4-甲氧基苄氯杂质；
11、所述定量结果根据公式i获得：cx＝ax/ar×cr；
12、其中cx表示供试品溶液中4-甲氧基苄氯杂质浓度；ax表示对照品溶液的峰面积；ar表示供试品溶液的峰面积；cr表示对照品溶液中4-甲氧基苄氯的浓度；
13、所述对照品溶液与供试品溶液的区别在于4-甲氧基苄氯替换待检测头孢克圬。
14、优选地，所述柱温为35℃；所述流动相中水和乙腈的体积比为60：40。
15、优选地，所述色谱柱的规格为4.6mm×250mm，5μm。
16、优选地，所述头孢克肟溶液的浓度为5～10mg/ml。
17、优选地，所述头孢克肟溶液中甲醇和乙腈的体积比为1：(1.5～4)。
18、优选地，配制供试品溶液时，所述头孢克肟的质量与甲醇的体积比为25～50mg/ml。
19、优选地，所述对照品溶液的制备方法包括：将4-甲氧基苄氯与甲醇和乙腈混合进行降解，得到4-甲氧基苄氯降解产物溶液，作为对照品溶液。
20、优选地，配制对照品溶液时，所述4-甲氧基苄氯的质量与甲醇和乙腈的总体积比为0.06～3.6μg/ml。
21、优选地，所述高效液相色谱检测的进样量为10～30μl。
22、优选地，所述流动相的洗脱方式为等度洗脱，所述流动相的流速为0.8～1.2ml/min。
23、本专利技术提供了一种头孢克肟中4-甲氧基苄氯杂质的检测方法，包括以下步骤：将待检测头孢克肟与甲醇和乙腈混合，得到头孢克肟溶液，作为供试品溶液；对所述供试品溶液进行高效液相色谱检测，根据获得的供试品溶液的液相色谱图得到供试品溶液的定量和/或定性结果，所述高效液相色谱检测的条件包括：检测波长：233nm；色谱柱：c18色谱柱；柱温：20～40℃；流动相：水和乙腈，所述水和乙腈的体积比为(45～60)：(40～55)；若所述供试品溶液的液相色谱图中出现与对照品溶液的液相色谱图出峰位置相同或保留时间±1％范围内的峰代表含有4-甲氧基苄氯杂质；所述定量结果根据公式i获得：cx＝ax/ar×cr；其中cx表示供试品溶液中4-甲氧基苄氯杂质浓度；ax表示对照品溶液的峰面积；ar表示供试品溶液的峰面积；cr表示对照品溶液中4-甲氧基苄氯的浓度；所述对照品溶液与供试品溶液的区别在于4-甲氧基苄氯替换待检测头孢克圬。本专利技术采用甲醇对4-甲氧基苄氯进行降解，利用4-甲氧基苄氯降解产物更稳定的特性，通过检测4-甲氧基苄氯降解产物的含量来确定4-甲氧基苄氯的含量，提高了头孢克肟中4-甲氧基苄氯杂质检测的准确性，避免了直接测定易降解的4-甲氧基苄氯而导致检测结果不准确的问题；通过限定高效液相色谱的柱温和流动相的组成，使头孢克肟中4-甲氧基苄氯杂质的检测峰面积高、拖尾因子低、理论塔板数高，进而提高检测的灵敏度和准确度。实施例结果显示：由本专利技术提供的检测方法对头孢克肟中4-甲氧基苄氯杂质的检测限为0.020μg/ml、定量限为0.060μg/ml，灵敏度高；4-甲氧基苄氯的回收率为101.15％～103.94％；检测时间可低至12.92min。
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1.一种头孢克肟中4-甲氧基苄氯杂质的检测方法，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述柱温为35℃；
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为4.6mm×250mm，5μm。
4.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述头孢克肟溶液的浓度为5～10mg/mL。
5.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述头孢克肟溶液中甲醇和乙腈的体积比为1：(1.5～4)。
6.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，配制供试品溶液时，所述头孢克肟的质量与甲醇的体积比为25～50mg/mL。
7.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述对照品溶液的制备方法包括：将4-甲氧基苄氯与甲醇和乙腈混合进行降解，得到4-甲氧基苄氯降解产物溶液，作为对照品溶液。
8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，配制对照品溶液时，所述4-甲氧基苄氯的质量与甲醇和乙腈的总体积比为0.06～3.6μg/mL。
9.根据权利要求1或
10.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述流动相的洗脱方式为等度洗脱，所述流动相的流速为0.8～1.2mL/min。
...【技术特征摘要】
1.一种头孢克肟中4-甲氧基苄氯杂质的检测方法，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述柱温为35℃；
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为4.6mm×250mm，5μm。
4.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述头孢克肟溶液的浓度为5～10mg/ml。
5.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述头孢克肟溶液中甲醇和乙腈的体积比为1：(1.5～4)。
6.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，配制供试品溶液时，所述头孢克肟的质量与甲醇的体积比为25～5...
【专利技术属性】
技术研发人员：吕鑫萌，黄金果，李淑云，金联明，门万辉，
申请(专利权)人：湖北凌晟药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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