【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及一种用于检测兔骨髓间充质干细胞的核酸适配体及其应用。
技术介绍
1、间充质干细胞(mesenchymal stem cells，mscs)是一种多功能干细胞，经特异性诱导后可分化为脂肪细胞、成骨细胞、神经细胞等多种细胞。另外，mscs还可分泌sdf-1(stromal cell-derived factor 1，基质细胞衍生因子-1)及其受体cxcr4以利于其归巢、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，vegf)以促进血管形成。
2、近年来，mscs逐渐成为组织工程的研究热点。目前mscs的移植主要通过联合生物材料、基因修饰等以促进其定向分化，并且取得了积极的结果。然而，mscs的移植也存在着一些缺陷，在一定程度上限制了其在组织工程的应用，例如，依赖外源性mscs时，静脉移植时mscs的定向归巢是保证疗效的关键，但目前尚无明确手段可确保mscs完全到达目标区域；依赖内源性mscs时，尚无法有效富集循环中mscs到达目标区域。因此，需要一种可以改善这些方案局限性的方法，为优化mscs移植治疗提供希望。
3、适配体是一种人工合成的小分子单链寡核苷酸，通过静电相互作用、范德华力、氢键或通过折叠形成一个特殊的三维空间结构(如发夹、茎环及g四连体)与靶标紧密连接，其靶标多种多样，如离子、肽类、蛋白质、病毒或细菌、整个细胞甚至活体动物、其它有机物或无机物等。适配体与靶标结合的方式多种多样，可通过磷酸钙共沉淀法、胞吞及胞饮等方式进入细胞内与细
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于，针对现有技术的上述不足，提供了一种用于检测兔骨髓间充质干细胞的核酸适配体及其应用，该核酸适配体具有更高的亲和力和特异性、无免疫原性而且能够化学合成、分子量小，稳定，易于标记和保存。
2、为实现上述目的，本专利技术采用如下的技术方案：
3、本专利技术的第一目的是提供用于检测兔骨髓间充质干细胞的核酸适配体，所述核酸适配体包括如seq id no.1所示的dna片段。
4、进一步的，所述核酸适配体还包括在所述的dna片段上结合生物素、地高辛、荧光物质、纳米发光材料或酶标记的复合物。
5、进一步的，所述荧光物质为fam荧光基团或cy5荧光基团；和/或，所述纳米发光材料为量子点或上转换纳米颗粒；和/或，所述酶标记为辣根过氧化物酶或蔗糖酶。
6、本专利技术的第二目的是提供一种用于检测兔骨髓间充质干细胞的检测试剂盒，包含上述的核酸适配体。
7、本专利技术的第三目的是提供核苷酸序列为seq id no.1所示的核酸适配体在制备募集兔骨髓间充质干细胞产品中的应用。
8、本专利技术的第四目的是提供核苷酸序列为seq id no.1所示的核酸适配体用于制备识别兔骨髓间充质干细胞的生物探针中的应用。
9、本专利技术的第五目的是提供一种包含如权利要求1所述核酸适配体的3wj rna纳米颗粒，所述3wj rna纳米颗粒为3wj-m4-ckipsirna，其中3wj为核心支架，m4为靶向mscs的靶标配体，ckipsirna作为治疗剂。
10、进一步的，所述3wj rna纳米颗粒还包括荧光示踪剂，所述荧光示踪剂为alexa647。
11、进一步的，所述3wj rna纳米颗粒促进间充质干细胞成骨分化。
12、进一步的，所述3wj rna纳米颗粒靶向聚集于股骨。
13、与现有技术比较，本专利技术提供的技术方案带来的有益效果是：
14、(1)本专利技术筛选得到了特异性结合兔骨髓间充质干细胞的核酸适配体，该核酸适配体具有更高的亲和力与特异性，免疫原性小，稳定性好，能够体外化学合成，分子量小，可以对不同部位进行修饰和取代，且化学性质稳定，易于保存，便于标记。本专利技术的可识别兔骨髓间充质干细胞的核酸适配体结合能力强，利用本专利技术的核酸适配体对其结合的靶分子进行捕获，可能得到其靶标分子，可以大大促进兔骨髓间充质干细胞的分离和富集，在组织工程和再生医学领域具有广阔应用前景。
15、(2)本专利技术提供的核酸适配体识别的是活细胞，可以用于募集兔骨髓间充质干细胞，为兔骨髓间充质干细胞的有效分离和富集提供了新思路，为后续组织工程和再生医学领域的应用提供了坚实的基础。
16、(3)本专利技术提供的核酸适配体识别的是活细胞，可以用于识别兔骨髓间充质干细胞的生物探针，能够将小分子靶向递送至该核酸适配体识别的兔骨髓间充质干细胞中，为解决目前msc临床应用中的部分问题开辟新的途径。
17、(4)本专利技术提供了一种含有用于检测兔骨髓间充质干细胞的核酸适配体的检测试剂盒，由于核酸适配体的合成成本较抗体制备成本低，且周期短，重现性好，采用本专利技术的核酸适配体进行兔骨髓间充质干细胞的检测时，操作更为简单、迅速。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种用于检测兔骨髓间充质干细胞的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体包括如SEQ ID NO.1所示的DNA片段。
2.如权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体还包括在所述的DNA片段上结合生物素、地高辛、荧光物质、纳米发光材料或酶标记的复合物。
3.如权利要求2所述的核酸适配体，其特征在于，所述荧光物质为FAM荧光基团或Cy5荧光基团；和/或，所述纳米发光材料为量子点或上转换纳米颗粒；和/或，所述酶标记为辣根过氧化物酶或蔗糖酶。
4.一种用于检测兔骨髓间充质干细胞的检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1-3中任一项所述的核酸适配体。
5.核苷酸序列如权利要求1中SEQ ID NO.1所示的核酸适配体在制备募集兔骨髓间充质干细胞产品中的应用。
6.核苷酸序列如权利要求1中SEQ ID NO.1所示的核酸适配体用于制备识别兔骨髓间充质干细胞的生物探针中的应用。
7.一种包含如权利要求1所述核酸适配体的3WJ RNA纳米颗粒，其特征在于，所述3WJRNA纳米颗粒为3WJ-M4-CkipsiR
8.如权利要求7所述的3WJ RNA纳米颗粒，其特征在于，所述3WJ RNA纳米颗粒还包括荧光示踪剂，所述荧光示踪剂为Alexa647。
9.如权利要求7或8所述的3WJ RNA纳米颗粒，其特征在于，所述3WJ RNA纳米颗粒促进间充质干细胞成骨分化。
10.如权利要求7或8所述的3WJ RNA纳米颗粒，其特征在于，所述3WJ RNA纳米颗粒靶向聚集于股骨。
...【技术特征摘要】
1.一种用于检测兔骨髓间充质干细胞的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体包括如seq id no.1所示的dna片段。
2.如权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体还包括在所述的dna片段上结合生物素、地高辛、荧光物质、纳米发光材料或酶标记的复合物。
3.如权利要求2所述的核酸适配体，其特征在于，所述荧光物质为fam荧光基团或cy5荧光基团；和/或，所述纳米发光材料为量子点或上转换纳米颗粒；和/或，所述酶标记为辣根过氧化物酶或蔗糖酶。
4.一种用于检测兔骨髓间充质干细胞的检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1-3中任一项所述的核酸适配体。
5.核苷酸序列如权利要求1中seq id no.1所示的核酸适配体在制备募集兔骨髓间充质干细胞产品中的应用。
6.核...
【专利技术属性】
技术研发人员：李章华，刘想忠，徐亮亮，杨翼，许海甲，唐锡杰，
申请(专利权)人：武汉市第三医院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。