【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及mar1纳米复合物及其制备方法与在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用。
技术介绍
1、心肌缺血再灌注(mi/r)损伤是心肌梗死后血运重建治疗中常见的并发症，其机制涉及免疫炎症反应及氧化应激等方面。它可能导致心脏功能障碍，严重影响患者的生活质量和预后，但在临床实践中仍然缺乏预防、治疗心肌缺血再灌注损伤的有效药物。
2、特殊促消退介质(specialized pro-resolving mediators，spms)家族是是一类在组织修复过程中由多价不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,pufa)分解合成的生物活性代谢产物。具有限制炎性粒细胞募集、调控巨噬细胞极化、介导炎症的主动消退等作用，并且不会引起免疫抑制等负面作用。maresin 1(mar1，消退素1)是近年来新发现的spms家族一员，主要由巨噬细胞通过脂氧合酶对二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,dha)进行催化，经一系列脂质氧合作用，转化为一类具有立体选择性的抗炎介质。mar1是spms家族中在损伤部位合成最快、出现最早的响应炎症信号的消退炎症介质，基于其强大的抗炎作用而受到广泛的关注。然而，mar1的临床应用也受到了其稳定性差、易降解、靶向效率低以及潜在的毒性等问题的限制。目前，mar1对心肌缺血再灌注损伤的作用尚未有相关研究。
3、因此，亟需提供治疗心肌缺血再灌注损伤的有效靶向药物，以提高心肌缺血再灌注损伤的治疗效果。
技术实
1、专利技术目的：本专利技术要解决的技术问题是提供一种采用脂质体连接有mar1、心肌靶向肽的mar1纳米复合物，以提供一种稳定性好、不易降解、靶向效率高的靶向心肌纳米复合物，以提高心肌缺血再灌注损伤的治疗效果。
2、本专利技术还要解决的技术问题是提供上述mar1纳米复合物的制备方法。
3、本专利技术最后要解决的技术问题是提供上述mar1纳米复合物在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用。
4、技术方案：为解决上述技术问题本专利技术提供如下技术方案：
5、一种mar1纳米复合物，所述mar1纳米复合物包括脂质体、靶向肽以及包载在脂质体内的mar1或其药学上可接受的盐；
6、所述mar1的结构式如式(ⅰ)所示：
7、
8、所述脂质体由胆固醇、dspc、dspe-peg2k和dspe-peg2k-mal制备得到；
9、所述心肌靶向肽是脂质体表面偶联的抗体，其氨基酸序列如seq id no.1所示。
10、进一步地，所述胆固醇、dspc、dspe-peg2k和dspe-peg2k-mal的质量比为20：5：7：5。
11、进一步地，所述脂质体与mar1或其药学上可接受的盐的质量比为(2：1)-(2:0.1)。
12、进一步地，所述脂质体与靶向肽的体积比为16:5。
13、mar1纳米复合物的制备方法，包括如下步骤：
14、(1)将胆固醇、dspc、dspe-peg2k和dspe-peg2k-mal按照质量比20：5：7：5的比例混合，得到脂质混合物；
15、(2)将上述脂质混合物溶解于无水乙醇中，得到载体溶液；
16、(3)取载体溶液、pbs缓冲液，分别预热至60℃，将预热的载体溶液和pbs缓冲液混合，得到脂质体混合液；
17、(4)随后加热脂质体挤出器到63℃，使用孔径100nm的聚碳酸酯膜反复挤出21次，得到粒径100nm的脂质体溶液；
18、(5)取上述脂质体溶液与mar1药物溶液混合，将混合液在液氮中冷冻10s液体完全冻住后放入40℃水浴锅水浴加热3min循环10次，形成包含mar1的载药脂质体；
19、取150μl靶向肽溶液、480μl载药脂质体，37℃下孵育1h后4500rpm超滤离心30min，取超滤管上层液体，用pbs冲洗超滤管内壁至500μl，最终得到靶向心肌的mar1纳米复合物。
20、步骤(2)中，所述载体溶液的浓度为20mg/ml。
21、步骤(3)中，所述载体溶液与pbs缓冲液的体积比为1：9；所述pbs缓冲液的参数为10mm、ph 7.4。
22、步骤(5)中，脂质体溶液与mar1药物溶液的质量比为2：1；
23、所述mar1药物溶液的配制方法如下：取100μg maresin1粉末溶于1ml乙醇中。
24、步骤(5)中，所述靶向肽液的配制方法如下：
25、1mg心肌靶向肽、200μl pbs混合，用naoh调ph＝7.4；
26、所述心肌靶向肽的氨基酸序列如seq id no.1所示。
27、上述mar1纳米复合物在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用在本专利技术的保护范围之内。
28、有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下显著优点：
29、本专利技术提供的纳米药物能够有效地将mar1递送至心脏，可以增强局部巨噬细胞的吞噬能力和清除作用，并促进巨噬细胞由促炎的m1型转为抗炎的m2型，减少心肌内活性氧的形成。进一步我们发现mar1纳米可以有效的改善心肌功能，抑制心肌细胞凋亡，减轻心脏纤维化的程度进而发挥改善心肌缺血再灌注损伤的作用。同时，mar1纳米药物在体内表现出了良好的体内安全性和生物相容性，证实了纳米药物设计的合理性。因此，我们制备的mar1纳米药物的生物利用度高、性质稳定、起效快，副作用低，对心肌再灌注损伤有显著的保护作用。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种MaR1纳米复合物，其特征在于，所述MaR1纳米复合物包括脂质体、靶向肽以及包载在脂质体内的MaR1或其药学上可接受的盐；
2.根据权利要求1所述的MaR1纳米复合物，其特征在于，所述胆固醇、DSPC、DSPE-PEG2k和DSPE-PEG2k-mal的质量比为20：5：7：5。
3.根据权利要求1所述的MaR1纳米复合物，其特征在于，所述脂质体与MaR1或其药学上可接受的盐的质量比为2：1-2:0.1。
4.根据权利要求1所述的MaR1纳米复合物，其特征在于，所述脂质体与靶向肽的体积比为16:5。
5.MaR1纳米复合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的MaR1纳米复合物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述载体溶液的浓度为20mg/mL。
7.根据权利要求5所述的MaR1纳米复合物的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述载体溶液与PBS缓冲液的体积比为1：9；所述PBS缓冲液的参数为10mM、pH 7.4。
8.根据权利要求5所述的MaR1纳米复合物
9.根据权利要求5所述的MaR1纳米复合物的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述靶向肽液的配制方法如下：
10.权利要求1～4任一所述MaR1纳米复合物在制备治疗心肌缺血再灌注损伤药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种mar1纳米复合物，其特征在于，所述mar1纳米复合物包括脂质体、靶向肽以及包载在脂质体内的mar1或其药学上可接受的盐；
2.根据权利要求1所述的mar1纳米复合物，其特征在于，所述胆固醇、dspc、dspe-peg2k和dspe-peg2k-mal的质量比为20：5：7：5。
3.根据权利要求1所述的mar1纳米复合物，其特征在于，所述脂质体与mar1或其药学上可接受的盐的质量比为2：1-2:0.1。
4.根据权利要求1所述的mar1纳米复合物，其特征在于，所述脂质体与靶向肽的体积比为16:5。
5.mar1纳米复合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
6.根据权利要求...
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